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依博素檢測(cè)方法的研究

發(fā)布時(shí)間:2018-07-12 21:51

  本文選題:依博素 + ICE酶; 參考:《中國新藥雜志》2015年01期


【摘要】:目的:依博素是一種鏈霉菌產(chǎn)生的新天然化合物,體內(nèi)具有較強(qiáng)抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎活性,有可能發(fā)展成為具有我國自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新藥。為了確定發(fā)酵液中依博素的含量,基于其對(duì)ICE酶(IL-1β轉(zhuǎn)化酶)具有抑制活性,本研究建立了一種檢測(cè)依博素的方法。方法:以熒光標(biāo)記的ICE酶底物Ac-Trp-Glu-AlaAsp-AMC與含依博素的發(fā)酵液進(jìn)行反應(yīng),采用不加依博素及重組ICE酶的樣品作為對(duì)照,用多標(biāo)記微孔板檢測(cè)儀測(cè)定產(chǎn)物熒光強(qiáng)度,確定發(fā)酵液中依博素的含量。結(jié)果:采用上述方法,分別對(duì)多批次搖瓶及發(fā)酵罐培養(yǎng)的發(fā)酵液進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果顯示,本方法可有效確定發(fā)酵液中依博素的含量。結(jié)論:本方法是檢測(cè)依博素發(fā)酵水平的有效方法。
[Abstract]:Objective: ephedrin is a new natural compound produced by Streptomyces. It has strong anti-rheumatoid arthritis activity in vivo and may develop into a new drug with independent intellectual property rights in China. In order to determine the content of ephedrin in fermentation broth, based on its inhibitory activity on ICE enzyme (IL-1 尾 invertase), a method for the detection of ephedrin was established in this study. Methods: the fluorescence labeled ICE substrate Ac-Trp-Glu-AlaAsp-AMC was used to react with the fermentation broth containing epophorin. The fluorescence intensity of the product was determined by multi-label microplate detector. To determine the content of ephedrin in fermentation broth. Results: the fermentation broth cultured in many batches of shaking flask and fermenter were determined by the above method. The results showed that the method could effectively determine the content of ephedrin in fermentation broth. Conclusion: this method is an effective method for detecting the fermentation level of ephedrin.
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所 衛(wèi)生部抗生素生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;華北制藥集團(tuán)新藥研究開發(fā)有限責(zé)任公司;
【基金】:國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(2012ZX09301002-001-023-02)
【分類號(hào)】:R927

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