發(fā)布時間：2020-11-21 12:12

　　 目的:收集行異基因造血干細胞移植(allo-HSCT)的白血病患兒的大便標本,利用體外發(fā)酵模型模擬人體腸道菌群對不同低聚糖的酵解,通過氣相色譜儀檢測糞便以及寡糖發(fā)酵后短鏈脂肪酸(SCFA)含量,了解allo-HSCT患兒腸道菌群紊亂與代謝產物的關系,探討行allo-HSCT的白血病患兒腸道菌群的紊亂程度及代謝特點,以期能通過調整膳食結構使SCFA朝著有益allo-HSCT患兒的方向發(fā)展及改善預后來提供臨床依據。資料與方法:本研究為前瞻性、觀察性研究。根據入選標準,選擇2017年1月至2017年12月期間在蘇州大學附屬兒童醫(yī)院血液科行allo-HSCT的白血病患兒,收集四個時期的大便標本,分別為預處理前期(T1)、移植后粒細胞缺乏期(T2)、粒細胞植入期(T3)和發(fā)生腸道急性移植物抗宿主病(GI-a GVHD,簡稱腸排)的時期(T4)。收集并處理其糞便標本后于接種于含有4種低聚糖培養(yǎng)基(低聚果糖FOS、低聚甘露糖MOS、菊粉INU、木糖醇XYI)和不含任何碳水化合物的對照培養(yǎng)基(YCFA)中發(fā)酵24小時后檢測氣體產生量,同時采集上清液測定SCFA含量,最后應用SPASS 20.0對數(shù)據進行統(tǒng)計學分析。結果:1.HSCT患兒未經發(fā)酵的糞便中總酸、乙酸、丙酸和丁酸等的含量總體上呈現(xiàn)T1期最高,T2期下降,T3期回升,T4期最低的趨勢�？偹帷⒁宜帷⒈�酸、丁酸、異丁酸、異戊酸、戊酸在四個時期之間的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.在不同的培養(yǎng)基發(fā)酵后總酸及各酸的含量均有不同程度的上升。其中經MOS、INU培養(yǎng)基發(fā)酵后,T1期總酸、乙酸、丙酸的含量明顯高于T2期(P0.05);在FOS、XYI培養(yǎng)基中T1期丙酸的含量明顯高于T2期(P0.05);在各培養(yǎng)基中丁酸在四個時期之間的含量仍無統(tǒng)計學意義的差異。3.同一時期與YCFA培養(yǎng)基縱向比較:T1期、T4期四種低聚糖培養(yǎng)基中總酸、乙酸、丙酸及丁酸含量差異無統(tǒng)計學意義;T2期MOS、FOS、INU培養(yǎng)基中總酸、乙酸、丙酸及丁酸的含量明顯降低(P0.05);T3期MOS培養(yǎng)基中總酸及主要SCFA與之無明顯差異(P0.05),FOS培養(yǎng)基中總酸、乙酸、丁酸明顯降低(P0.05),INU培養(yǎng)基中總酸仍明顯降低(P0.05)。4.HSCT患兒未經發(fā)酵的糞便中,預處理前期(T1期)總酸、乙酸、丙酸及丁酸的含量與正常兒童無顯著差異(P0.05);在FOS培養(yǎng)基中,T1期乙酸低于正常兒童(P0.05);在XYI、YCFA培養(yǎng)基中T1期丙酸低于正常兒童(P0.05);在五組培養(yǎng)基中T1期丁酸含量與正常兒童均無顯著差異(P0.05)。5.HSCT患兒四個時期在不同培養(yǎng)基中產氣量不同。T1期及T3期MOS、INU、FOS、XYI培養(yǎng)基中產氣量高于YCFA培養(yǎng)基(P0.05);T2期、T4期各低聚糖培養(yǎng)基與YCFA培養(yǎng)基之間產氣量無統(tǒng)計學意義的差異。結論:1.HSCT患兒腸道菌群可利用不同的低聚糖產生更多的SCFA及氣體,提示糞便中的菌群存在活性。在T1、T2、T3、T4四個時期,乙酸都是產量最多的SCFA,其次是丙酸、丁酸,而異丁酸、異戊酸、戊酸的產量很低。2.Allo-HSCT患兒在移植過程中腸道菌群發(fā)生紊亂時主要表現(xiàn)為移植后粒細胞缺乏期(T2期)能利用MOS、INU產生乙酸、丙酸的菌種減少;粒細胞植入期(T3期)恢復的菌種能較好的利用MOS產生總SCFA,但不能較好的利用FOS產生乙酸和丁酸。3.Allo-HSCT過程中XYI培養(yǎng)基及YCFA培養(yǎng)基之間產酸無明顯差異,推測XYI及YCFA能作用于相似的菌群。4.Allo-HSCT患兒預處理前期糞便中總酸、乙酸、丙酸、丁酸與正常兒童無差異,但經不同低聚糖發(fā)酵后乙酸、丙酸減少,推測allo-HSCT患兒預處理前腸道菌群種類與正常兒童存在差異。5.測定糞便及低聚糖體外發(fā)酵模型中的SCFA可能有助于評估allo-HSCT患兒腸道菌群的紊亂程度,指導臨床通過調整膳食結構產生更多有益的SCFA。
【學位單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R733.7
【文章目錄】：
中文摘要
abstract
第一章 前言
    一、腸道菌群簡介
    二、造血干細胞移植中腸道菌群研究的進展及一些成果
    三、短鏈脂肪酸的簡介
第二章 材料與方法
    2.1 研究對象
    2.2 實驗方法
    2.3 統(tǒng)計方法
第三章 結果
    3.1 四個時期未經發(fā)酵的糞便中SCFA含量比較
    3.2 四個時期同種培養(yǎng)基中各酸的比較
    3.3 正常兒童組、HSCT患兒預處理前組（T1期）之間主要SCFA比較
    3.4 四個時期（T1-T4）各培養(yǎng)基產氣量比較
第四章 討論
    4.1 HSCT中短鏈脂肪酸的分析比較
    4.2 產氣量分析
    4.3 總結
第五章 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
英漢雙解縮略詞
致謝

【參考文獻】

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本文編號：2892979