發(fā)布時間：2018-10-31 13:49

【摘要】：漆酶是一種含銅的多酚氧化酶,其作用底物范圍廣,在食品、能源和環(huán)保等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值,因此篩選高產(chǎn)漆酶菌株對于其工業(yè)應(yīng)用具有重要意義。本實驗以78株香菇菌株為實驗材料,利用愈創(chuàng)木酚平板法初篩,液體發(fā)酵復(fù)篩的方法篩選高產(chǎn)漆酶香菇菌株,并通過實時定量PCR分析香菇漆酶同工酶在不同菌株之間轉(zhuǎn)錄表達(dá)的差異性和特異性。結(jié)果表明,不同香菇菌株的生長速度、變色圈大小存在差異,以菌絲圈和變色圈大小及其比例為依據(jù),從78株香菇菌株中篩選出19株潛在的漆酶高產(chǎn)菌株;液體發(fā)酵從這19株菌株中復(fù)篩出3株高產(chǎn)漆酶的菌株:香240、15和冕寧淺灰,其中香240在培養(yǎng)第3天酶活達(dá)到最高(3.583U/m L),香15和冕寧淺灰則在培養(yǎng)第7天酶活達(dá)到最高(分別為3.842U/m L和2.806U/m L);實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,10個漆酶同工酶基因在兩株香菇菌株中的表達(dá)存在差異性和特異性,其中Lelac5和Lelac9只在菌株香240中檢測到轉(zhuǎn)錄本;Lelac1 4在菌株15中表達(dá)量較高,而Lelac8、Lelac10和Lelac11在香240中的表達(dá)量較高。研究結(jié)果將為香菇漆酶的進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)。
[Abstract]:Laccase is a copper-containing polyphenol oxidase, which has a wide range of substrates and has important application value in food, energy and environmental protection. Therefore, it is of great significance to screen high-yield laccase strains for its industrial application. In this experiment, 78 strains of lentinus edodes were used to screen laccase strains with guaiacol plate method and liquid fermentation method. The transcriptional expression of laccase isozyme in Lentinus edodes was analyzed by real-time quantitative PCR. The results showed that there were differences in growth speed and chromotropic circle size among different strains of Lentinus edodes. According to the size and proportion of hyphal and chromotropic circles, 19 potential laccase producing strains were screened from 78 strains of Lentinus edodes. Three laccase producing strains were screened from the 19 strains by liquid fermentation: Xiang240P15 and Mianning light ash. The enzyme activity of Xiang240 reached the highest level on the 3rd day of culture (3.583U/m L),). On the 7th day of culture, the enzyme activity of Xiang15 and Mianning reached the highest level (3.842U/m L and 2.806U/m L);, respectively). The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that the expression of 10 laccase isozyme genes in two strains of Lentinus edodes was different and specific, among which Lelac5 and Lelac9 only detected transcripts in strain Xiang240. The expression of Lelac1 4 was higher in strain 15, while the expression of Lelac8,Lelac10 and Lelac11 in Xiang240 was higher than that in strain 15. The results will provide a basis for further study of laccase in Lentinus edodes.
【作者單位】： 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)資源學(xué)院微生物系;成都市農(nóng)林科學(xué)院園藝研究所;
【基金】：四川省教育廳重點項目(15ZA0013) 四川省科技支撐計劃項目 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)科研興趣培養(yǎng)計劃(20150316)~~
【分類號】：S646.12

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本文編號：2302425