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花生質(zhì)膜H + -ATPase基因AhHA1的克隆與功能研究

發(fā)布時(shí)間:2024-07-06 06:42
  質(zhì)膜H+-ATPase是植物細(xì)胞膜上唯一介導(dǎo)H+外排到胞外區(qū)域的質(zhì)子泵,H+外排產(chǎn)生跨膜電化學(xué)梯度,為大量次級(jí)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白提供跨膜驅(qū)動(dòng)力,因此質(zhì)膜H+-ATPase在跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用。本研究鑒定了一個(gè)鹽脅迫誘導(dǎo)的花生質(zhì)膜H+-ATPase基因AhHA1,并利用生物信息學(xué)技術(shù)篩選了栽培種花生基因組中AhHA1的同源基因,進(jìn)行了系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析、亞細(xì)胞定位研究和組織表達(dá)分析。結(jié)果表明栽培種花生基因組編碼24個(gè)AhHA1同源基因,分屬于5個(gè)亞家族,其中AhHA1與擬南芥AHA4和AHA11同源;亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)顯示AhHA1定位在細(xì)胞質(zhì)膜上;組織表達(dá)分析顯示AhHA1/2在根中的表達(dá)量最高。為研究AhHA1的功能,構(gòu)建了AhHA1過(guò)表達(dá)轉(zhuǎn)基因株系,分析了鹽脅迫下轉(zhuǎn)基因株系的表型。結(jié)果表明,過(guò)表達(dá)AhHA1的轉(zhuǎn)基因擬南芥種子的萌發(fā)率、幼苗成活率和生物量均有提高,說(shuō)明該基因的過(guò)量表達(dá)能夠提高植物的耐鹽能力。本研究增加了對(duì)花生耐鹽機(jī)理和花生質(zhì)膜H+-ATPase家族...

【文章頁(yè)數(shù)】:11 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 生物信息學(xué)分析
    1.3 Real-time RT-PCR
    1.4 載體構(gòu)建
    1.5 Ah HA1轉(zhuǎn)基因植物構(gòu)建和生理分析
    1.6 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 花生質(zhì)膜H+-ATPase基因家族的組成
    2.2 花生Ah HA家族系統(tǒng)進(jìn)化分析
    2.3 Ah HA1/2基因表達(dá)模式分析
    2.4 Ah HA1蛋白亞細(xì)胞定位
    2.5 花生Ah HA1擬南芥異源表達(dá)株系獲取
    2.6 鹽脅迫對(duì)花生Ah HA1轉(zhuǎn)基因株系萌發(fā)率和苗期存活率的影響
3 討論與結(jié)論



本文編號(hào):4002209

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