發(fā)布時間：2020-12-04 02:20

　　研究背景阿霉素（Doxorubicin,Dox）又稱多柔比星,是廣泛使用和成功的抗腫瘤藥物之一。研究表明,阿霉素誘導的心臟病理學與擴張型心肌�。―CM）相似。而異常表達的長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,1ncRNA）已被認為是心臟病的關鍵來源之一。然而,1ncRNA在阿霉素（DOX）誘導的心臟毒性中的作用仍然在很大程度上未知。因此,我們建立DOX誘導的心肌細胞損傷模型,在體外實驗中探討1ncRNA在阿霉素（DOX）誘導的心臟毒性中的作用及其機制。研究方法第一部分:原代培養(yǎng)的心肌細胞（PC）制備,計算原代心肌細胞的存活率、觀察細胞形態(tài)和活力分析及細胞純度計算（鑒定）。第二部分:長鏈非編碼RNALINC00339在阿霉素誘導的心肌細胞凋亡中的作用。1.CCK-8法檢測阿霉素對心肌細胞增殖活性的影響。2.Western blot方法檢測阿霉素對心肌細胞Caspase 3蛋白表達的影響。3.Q-PCR方法檢測阿霉素刺激心肌細胞后細胞中INC00339的表達變化。4.Q-PCR方法檢測敲低LINC00339后心肌細胞細胞中LINC00339的表達變化。5.CCK-8法檢... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．肌鈣蛋白ｃＴＮＴ免疫熒光法心肌細胞鑒定??

１．不同濃度阿霉素對心肌細胞的增殖活性的影響（ＣＣＫ－８法檢測）。與，＊ｐ＜０．０５，?＊＊ｐ＜０．０１，ｎ＝６。??素對心肌細胞Ｃａｓｐａｓｅ?３蛋白表達的影響??過采用Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ方法檢測原代心肌細胞（ＰＣ）與大鼠Ｈ９ｃ２心肌細胞中??ｅ３的蛋白表達情況，結果顯示：在原代心肌細胞中，與對照組相比，阿??ｐｍｏｌ／Ｌ組的Ｃａｓｐａｓｅ?３的蛋白表達呈現(xiàn)顯著上調(diào)，差異具有顯著統(tǒng)計學．０１）。在大鼠心肌細胞（１＾２）中，阿霉素５嘩〇１幾組的３５口３５６?３的蛋白??顯著上調(diào)，差異具有顯著統(tǒng)計學意義（Ｐ＜０．０１）。??一結果表明：阿霉素促進心肌細胞凋亡相關蛋白Ｃａｓｐａｓｅ?３蛋白的表達。??。）??

義（卩＜０．０１）。在大鼠心肌細胞（１＾２）中，阿霉素５嘩〇１幾組的＃常悼冢常擔叮牐車牡鞍祝崳?表達也顯著上調(diào)，差異具有顯著統(tǒng)計學意義（Ｐ＜０．０１）。??這一結果表明：阿霉素促進心肌細胞凋亡相關蛋白Ｃａｓｐａｓｅ?３蛋白的表達。??（見圖２。）??３９??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]差異表達基因的幾種篩選方法[J]. 蔡磊,趙青川.  第四軍醫(yī)大學學報. 2007(03)
[2]新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)方法的改進[J]. 郭軍,鮑翠玉,林國生,楊波.  心血管康復醫(yī)學雜志. 2006(06)
[3]新生大鼠心肌細胞培養(yǎng)技巧[J]. 王濤,余志斌,謝滿江,車紅磊.  第四軍醫(yī)大學學報. 2003(02)

博士論文
[1]轉錄因子SP1調(diào)控小鼠原始卵泡形成的機制研究[D]. 蔡晗.中國農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]功能化納米探針在microRNA分析中的應用[D]. 代文浩.北京科技大學 2019
[3]MAP誘導內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激介導的巨噬細胞凋亡及其對小鼠感染M.bovis的影響[D]. 岳瑞超.中國農(nóng)業(yè)大學 2019
[4]miR-193b靶向RAB22A基因調(diào)節(jié)外泌體介導的乳腺癌細胞增殖和轉移的作用機制研究[D]. 孫亮.吉林大學 2018
[5]Micro RNA靶向Wnt信號通路抑制腎細胞癌增殖和侵襲作用機制的研究[D]. 宋海濤.吉林大學 2018
[6]轉錄組測序技術分析鼠李素對心肌氧化應激損傷保護作用的分子機制研究[D]. 李旭東.吉林大學 2018
[7]Long non-coding RNA ZFAS1通過結合miR-150促進腫瘤發(fā)生機制的研究[D]. 黃小平.蘇州大學 2018
[8]非編碼RNA的數(shù)據(jù)庫構建及其癌癥基因組研究[D]. 柳純潔.華中科技大學 2018
[9]microRNA493-5p對肝癌細胞增殖、凋亡及侵襲遷移作用機制的研究[D]. 王冠男.安徽醫(yī)科大學 2018
[10]基于鈣離子濃度調(diào)節(jié)、抗氧化應激、抗炎癥反應的丹參酸A對心血管保護作用的研究[D]. 宋瓊濤.河北醫(yī)科大學 2018



本文編號：2896862