發(fā)布時(shí)間：2020-11-17 03:14

　　 目的:建立高效液相色譜法檢測(cè)萬古霉素在血清及關(guān)節(jié)引流液中藥物濃度的方法。探索關(guān)節(jié)置換術(shù)中局部應(yīng)用萬古霉素,術(shù)后血清及關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素藥物濃度情況。為關(guān)節(jié)置換術(shù)中萬古霉素局部預(yù)防用藥提供參考。方法:通過研究高效液相色譜條件、血液及關(guān)節(jié)引流液樣品處理方法,建立高效液相色譜法檢測(cè)萬古霉素在血清及關(guān)節(jié)引流液中藥物濃度的方法。進(jìn)行方法學(xué)考察,制備萬古霉素在血清及關(guān)節(jié)引流液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線,確定萬古霉素在血清及關(guān)節(jié)引流液中的定量下限,進(jìn)行專屬性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、回收率試驗(yàn)和穩(wěn)定性試驗(yàn)。收集我院2017年7月~2018年7月于初次關(guān)節(jié)置換術(shù)中局部應(yīng)用萬古霉素的患者,采集患者血清樣品及關(guān)節(jié)引流液樣品,使用高效液相色譜法檢測(cè)萬古霉素藥物濃度。行初次關(guān)節(jié)置換術(shù)的患者按萬古霉素給藥劑量分為3組,A組:術(shù)中將0.5瓶(250mg)萬古霉素粉末均勻涂撒于術(shù)區(qū)創(chuàng)面及骨面;B組:術(shù)中將1瓶(500mg)萬古霉素粉末均勻涂撒于術(shù)區(qū)創(chuàng)面及骨面;C組:術(shù)中將2瓶(1000mg)萬古霉素粉末均勻涂撒于術(shù)區(qū)創(chuàng)面及骨面。采用SPSS 22軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,GraphPad Prism 5軟件進(jìn)行圖形繪制。結(jié)果:高效液相色譜法測(cè)定血清中萬古霉素藥物濃度在5.00~80.00mg·L~(-1)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為y=3806.2x+48724,R~2=0.998,定量下限為5.13mg·L~(-1);高效液相色譜法測(cè)定關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素藥物濃度在2.00~3000.00mg·L~(-1)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為y=3806.1x+12297,R~2=0.996,定量下限為2.03mg·L~(-1)。專屬性好;回收率在89.26%~106.50%范圍內(nèi),RSD4%;日內(nèi)、日間RSD均8%;血清、關(guān)節(jié)引流液樣品在20℃室溫條件下放置0小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí),-80℃反復(fù)凍融1、2、3次條件下,RSD均9%;方法學(xué)考查符合要求。本研究納入45名行初次關(guān)節(jié)置換術(shù)的患者(置換關(guān)節(jié)52例次),采集樣品286份。7名患者于初次關(guān)節(jié)置換術(shù)中局部預(yù)防應(yīng)用萬古霉素粉末,術(shù)后3小時(shí)血液中萬古霉素濃度小于5.00mg·L~(-1)。研究關(guān)節(jié)引流液樣品采樣方案,發(fā)現(xiàn)術(shù)后1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)、24小時(shí)采集該時(shí)間段內(nèi)關(guān)節(jié)引流液樣品(即b采集方式),方案較優(yōu)。b采集方式下,11名A組患者術(shù)后1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)、24小時(shí)關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度分別為60.05±37.98mg·L~(-1)、67.16±59.04mg·L~(-1)、45.97±41.11mg·L~(-1)、39.10±30.58mg·L~(-1)、30.86±22.08mg·L~(-1)、18.92±14.92mg·L~(-1);16名B組患者術(shù)后1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)、24小時(shí)關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度分別為521.39±179.51mg·L~(-1)、247.96±118.81mg·L~(-1)、164.25±64.44mg·L~(-1)、174.74±82.61mg·L~(-1)、127.57±96.44mg·L~(-1)、83.00±47.99 mg·L~(-1);9名C組患者術(shù)后1小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、18小時(shí)、24小時(shí)關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度分別為1488.09±370.90mg·L~(-1)、1054.39±715.25mg·L~(-1)、917.03±698.20mg·L~(-1)、581.49±361.67mg·L~(-1)、232.12±164.23mg·L~(-1)、114.47±86.90mg·L~(-1)。利用混合線性模型分析關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度影響因素,僅取樣時(shí)間、萬古霉素給藥劑量與關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度的對(duì)數(shù)呈強(qiáng)相關(guān)性。萬古霉素給藥劑量的回歸系數(shù)β(95%CI)=0.71(0.37,1.05),P=0.001;取樣時(shí)間的回歸系數(shù)β(95%CI)=-0.024(-0.034,-0.015),P0.001。整個(gè)觀察期間,行初次關(guān)節(jié)置換術(shù)的患者中有1名出現(xiàn)假體周圍感染,所有患者均未出現(xiàn)藥品不良反應(yīng)。結(jié)論:本研究建立的高效液相色譜法檢測(cè)血清及關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素藥物濃度的方法準(zhǔn)確可行;萬古霉素在假體周圍感染的預(yù)防中具有重要臨床意義;關(guān)節(jié)置換術(shù)中局部應(yīng)用萬古霉素粉末,能夠在關(guān)節(jié)腔內(nèi)產(chǎn)生高濃度的藥物環(huán)境,有效預(yù)防假體周圍感染,而全身血藥濃度低,毒副反應(yīng)發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)小,安全性高;關(guān)節(jié)引流液中萬古霉素濃度僅與取樣時(shí)間、萬古霉素給藥劑量相關(guān),關(guān)節(jié)腔中萬古霉素半衰期為13.3小時(shí);本研究為關(guān)節(jié)置換術(shù)中萬古霉素局部預(yù)防用藥提供參考。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R969
【部分圖文】：

第一章 緒 論藥方式的特點(diǎn)。探討關(guān)節(jié)置換術(shù)中局部應(yīng)用萬古霉素預(yù)防PJI的有效性及安全性：有效性的主要指標(biāo)是術(shù)后有無 PJI 發(fā)生，次要指標(biāo)包括關(guān)節(jié)不適表現(xiàn)、患者住院天數(shù)、再次住院情況；安全性的主要指標(biāo)是 ADR 發(fā)生情況，次要指標(biāo)是患者的各項(xiàng)指標(biāo)是否出現(xiàn)異常。通過以上研究，為關(guān)節(jié)置換術(shù)中萬古霉素局部預(yù)防用藥提供參考，圖 1.1 為本研究的技術(shù)路線。

圖 2.1 萬古霉素在血清中的標(biāo)準(zhǔn)曲線（二）萬古霉素在關(guān)節(jié)引流液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線關(guān)節(jié)引流液樣品中萬古霉素峰面積與萬古霉素濃度在2.00~3000.00mg·L內(nèi)線性關(guān)系良好。其回歸方程為 y=3806.1x+12297，R2=0.996，標(biāo)準(zhǔn)曲線見。

萬古霉素在關(guān)節(jié)引流液中的標(biāo)準(zhǔn)曲線
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本文編號(hào)：2887020