發(fā)布時間：2018-04-05 02:15

  本文選題：糖尿病心肌病　切入點：胰島素樣生長因子-1　出處：《延邊大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是由糖尿病(diabetes)引起的一種嚴重并發(fā)病,主要表現(xiàn)為心肌結(jié)構(gòu)和功能的障礙,嚴重影響人類的身體健康和生活質(zhì)量,如何抑制其發(fā)生、發(fā)展已成為一個亟待解決的問題。本文的主要目的是為了研究胰島素樣生長因子-1(insulin-like growth factor-1)對糖尿病心肌病的保護作用及機制。方法:本實驗選用24只6～8周Wistar大鼠(雄性,200-250g),隨機分為3組:空白對照組(Con組)、糖尿病心肌病組(DCM組)、IGF-1治療組(DM + IGF-1組)。DCM組和IGF-1治療組中的大鼠通過腹腔一次性注射鏈脲霉素(STZ,60mg/kg)的方式制備糖尿病模型。待STZ注射72小時之后進行空腹血糖檢測,當(dāng)血糖濃度≥16.7mmol/L時,被認為糖尿病模型制備成功。IGF-1組大鼠開始接受IGF-1治療,從治療之日起開始計時,用藥10周后,將大鼠處死,測量體重、空腹血糖,收集血液、尿液及心肌組織待用。作者對三組大鼠的血液進行了血液生化檢查,指標(biāo)包括:甘油三酯、總膽固醇。并且檢測了血液中的炎癥因子:白介素-1β、腫瘤壞死因子-αα,以及氧化應(yīng)激標(biāo)記物:超氧化物歧化酶的活性和丙二醛的含量。此外,應(yīng)用了 HE染色、Masson染色、透射電鏡的方法觀察了心肌組織的結(jié)構(gòu)改變和細胞器形態(tài);利用TUNEL熒光染色結(jié)合Bcl-2/Bax在心肌細胞中的表達(WesternBlotting法檢測)的方法測定了心肌細胞凋亡狀況。最后,通過Western Blotting法對心肌組織進行檢測,觀察其內(nèi)Akt,GSK-3β及它們的磷酸化表達。結(jié)果:1.基本情況觀察。作者主要觀察了大鼠的飲食、體態(tài)及精神狀態(tài),發(fā)現(xiàn)與正常組大鼠相比,DCM組大鼠平日表現(xiàn)出多飲、多食、多尿(尿量顯著增加,P0.05),肉眼觀察結(jié)合尿量檢測可發(fā)現(xiàn)其明顯消瘦、體重減輕(P0.05);倦怠、活動量少;皮毛泛黃,無光澤;瞳孔呈乳白色,視物無焦距。觀察IGF-1治療組發(fā)現(xiàn),多飲、多食現(xiàn)象仍明顯存在,但尿量明顯減少(p0.05),體重明顯增加(p0.05),初步說明病情的發(fā)展因為IGF-1的應(yīng)用得以控制;但是本組大鼠的眼球著色及體表形態(tài)沒有明顯改變,推測可能是由于已經(jīng)發(fā)展為糖尿病眼病。2.血清炎癥因子改變。本實驗通過ELISA法檢測了血清中的IL-1β及TNF-α發(fā)現(xiàn),糖尿病組大鼠血清中IL-1β和TNF-α含量明顯增加(P0.05),說明糖尿病引起了炎癥因子浸潤,炎癥反應(yīng)發(fā)生。經(jīng)過IGF-1治療后,血清中的IL-1β和TNF-α含量明顯減少(P0.05)并接近于正常水平,說明IGF-1對糖尿病引動的炎癥反應(yīng)具有抵抗作用,為IGF-1的保護機制提供了部分理論依據(jù)。3.氧化應(yīng)激標(biāo)記物結(jié)果發(fā)現(xiàn),DCM發(fā)生時,SOD的活性明顯降低(P0.05),而MDA的含量明顯增加(P0.05),說明DCM時氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯;當(dāng)給予IGF-1后,SOD活性增加(P0.05),MDA含量降低(P0.05),且具有統(tǒng)計學(xué)意義。4.心肌細胞形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果:HE染色結(jié)果,正常組心肌結(jié)構(gòu)正常,肌纖維整齊排列,胞漿著色均勻,胞核大小均一,呈圓形或橢圓形,位于細胞中央;而DCM組中可見心肌纖維排列紊亂,不規(guī)則;DCM +IGF組心肌結(jié)構(gòu)得到明顯改善。Masson染色結(jié)果可見,正常組中間質(zhì)少量纖維化,均勻分布,形態(tài)纖細,著色淺;DCM組心肌間質(zhì)纖維明顯,被染成藍色,多分布于血管周圍;而IGF-1組中發(fā)現(xiàn),心肌間質(zhì)纖維化程度明顯減輕,面積明顯減小(P0.05)。透射電鏡結(jié)果發(fā)現(xiàn),正常大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)正常;DCM組線粒體損傷明顯:線粒體腫脹,空胞化,嵴斷裂、消失;經(jīng)過IGF-1治療后,心肌細胞超微結(jié)構(gòu)損傷較之前有所減輕。5.炎癥因子浸潤結(jié)果,機體處于正常情況時,炎癥因子浸潤量較少,血清中IL-1β 和 TNF-α 的含量分別為 12.73±0.79ng/L,152.6±12.04ng/L;DCM 組中大鼠血清IL-1β和TNF-α含量明顯增加,分別是17.47± 1.49ng/L,281.90±14.04ng/L(P0.05);IGF-1 組,IL-1β 和 TNF-α 含量分別為:16.13±0.82ng/L,220.10± 11.95 ng/L(P0.05)。說明IGF-1可能通過抵抗炎癥反應(yīng)保護糖尿病心肌病。6.氧化應(yīng)激標(biāo)志物變化情況:正常情況下,SOD的活性較高,MDA含量較低,不能夠引起氧化應(yīng)激;當(dāng)發(fā)生糖尿病心肌病時,SOD活性明顯降低(P0.05),并且MDA明顯增加(P0.05),從而造成氧自由基的生成增多,誘發(fā)氧化應(yīng)激反應(yīng);實驗發(fā)現(xiàn),IGF-1組大鼠血清內(nèi)SOD的活性較DCM組明顯升高(P0.05),卻未達到正常狀態(tài),而MDA含量顯著下降(P0.05),但含量仍高于正常組,說明IGF-1可能通過抑制氧化應(yīng)激從而保護糖尿病心肌病的發(fā)生、發(fā)展。7.細胞凋亡情況觀察:通過TUNEL熒光染色發(fā)現(xiàn),正常組心肌細胞的凋亡呈局限性,相對面積較小;DCM時明顯誘導(dǎo)心肌細胞的凋亡,呈大片狀壞死,熒光強度明顯增加(P0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義;IGF-1治療組中的心肌細胞凋亡數(shù)量較DCM組明顯減少(P0.05)。此外,Bcl-2/Bax比值變化與TUNEL熒光強度改變趨勢一致。8.心肌細胞表達Akt,GSK-3β及其磷酸化狀態(tài)變化:與正常組大鼠的心肌組織比較,p-Akt/Akt,p-GSK3β/GSK3β在糖尿病心肌病組大鼠的心肌組織中明顯降低(P0.05);與DCM組比較,IGF-1組中的心肌表達p-Akt/Akt和p-GSK3β/GSK3β蛋白水平則顯著升高(P0.05)。結(jié)論:IGF-1通過抗炎、抗氧化作用,以及激活A(yù)kt/GSK-37信號通路保護糖尿病心肌病。
[Abstract]:Objective : To study the protective effect and mechanism of insulin - like growth factor - 1 on diabetic cardiomyopathy . The main aim of this study was to study the protective effect and mechanism of insulin - like growth factor - 1 on diabetic cardiomyopathy . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . After 72 hours of injection , the rats were treated with fasting plasma glucose . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . After 10 weeks of treatment , the rats were sacrificed to measure body weight , fasting blood glucose , blood , urine and myocardial tissues . The levels of IL - 1尾 and TNF - 偽 in serum of diabetic rats were significantly decreased ( P0.05 ) . The results showed that the levels of IL - 1尾 and TNF - 偽 in the serum of diabetic rats were significantly decreased ( P0.05 ) . The levels of serum IL - 1尾 and TNF - 偽 were significantly increased ( P < 0.05 ) , and the levels of IL - 1尾 and TNF - 偽 in serum were significantly higher than those in DCM group ( P0.05 ) . CONCLUSION : IGF - 1 can protect diabetic cardiomyopathy by anti - inflammatory , anti - oxidation , and activation of the signal pathway in the diabetic cardiomyopathy . Conclusion : IGF - 1 can protect diabetic cardiomyopathy by anti - inflammatory and anti - oxidation effects .

【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R587.2;R542.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 陶桂香;徐洋;;1型糖尿病發(fā)病機制及治療研究[J];中國免疫學(xué)雜志;2015年10期

2 李靜波;林靜娜;宋軼萱;相莉;毋中明;;胰島素樣生長因子-1對糖尿病大鼠心肌保護作用的探討[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2014年42期

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本文編號：1712740