發(fā)布時(shí)間：2020-11-17 23:37

　　 2010年,一種傳染性關(guān)節(jié)炎疾病首先在廣東和廣西兩省的本地品種肉雞中爆發(fā),隨后逐步蔓延至全國十余個(gè)省、市,給我國養(yǎng)禽業(yè)帶來了數(shù)億元的經(jīng)濟(jì)損失。為系統(tǒng)深入地掌握該病的病因和流行特點(diǎn)、探究有效的防控措施,本研究開展了病原分離鑒定、流行病學(xué)分析、疫苗和藥物防控研究等工作,結(jié)果如下。(一)本地品種雞傳染性關(guān)節(jié)炎病原鑒定與流行情況分析對(duì)來自16個(gè)省、市的本地品種肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)和種雞場(chǎng)的18063份滑液囊分泌液拭子、1688份血清和215份患病雞腿等樣品進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),滑液囊分泌液拭子Mycoplasma synoviae(M.synoviae)陽性率為96.31%,發(fā)病雞只血清中M.synoviae陽性率為69.57%-95.16%,從215份患病雞腿樣品中分離的110株M.synoviae感染SPF雞后,復(fù)制出典型的臨床癥狀。研究結(jié)果表明,引起上述傳雞染性關(guān)節(jié)炎的主要致病原為M.synoviae。M.synoviae是引起雞和火雞出現(xiàn)急性或慢性傳染性關(guān)節(jié)炎的一種重要病原。中國本地品種雞中M.synoviae感染的流行病學(xué)特點(diǎn)表現(xiàn)為:1.種雞場(chǎng)不同日齡群中M.synoviae感染具有普遍性,蛋傳率高:8-29周齡雞群抗體陽性率7%-97%不等;30周齡后雞群抗體陽性率高達(dá)100%;7～9日齡的雞胚核酸檢測(cè)陽性率平均16.14%,最高陽性率可達(dá)36.8%。2.M.synoviae感染雞體后抗體反應(yīng)緩慢,呈現(xiàn)周期性排毒,水平傳播能力強(qiáng):1日齡雛雞體內(nèi)可同時(shí)檢測(cè)到M.synoviae抗原和母源抗體,1日齡雞群中10%的雞只感染M.synoviae后雞群中免疫產(chǎn)生的抗體初見于50日齡左右,100日齡抗體陽性達(dá)到100%;10-70日齡,雞只帶毒率為10-80%,呈現(xiàn)周期性升高的趨勢(shì)。3.M.synoviae在中國流行范圍廣,本地品種雞易感:流行病學(xué)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn),2010～2015年,在廣東、廣西、福建、浙江等16省均出現(xiàn)雞M.synoviae感染和發(fā)病,共9773群雞發(fā)病,超過1000萬只雞被淘汰;十多個(gè)本地品種雞對(duì)M.synoviae易感,防控壓力較大。4.種雞抗體水平影響M.synoviae在子代肉雞的水平傳播和繁殖速度:對(duì)三個(gè)品種分析發(fā)現(xiàn),竹絲雞種雞抗體水平最低、胚蛋感染率最高,子代肉雞抗體呈現(xiàn)陽性最早、轉(zhuǎn)陽性率最高;清遠(yuǎn)麻種雞抗體水平最高、胚蛋感染率接近竹絲雞,但子代肉雞抗體呈現(xiàn)陽性最晚、抗體轉(zhuǎn)陽性率最低。(二)雞M.synoviae中國分離株遺傳進(jìn)化及其致病性測(cè)定將本研究中110株M.synoviea分離株和國外分離株vlhA基因76～421 nt區(qū)域推導(dǎo)氨基酸序列進(jìn)行比對(duì),結(jié)果發(fā)現(xiàn)共有6處區(qū)域存在明顯的差異。遺傳進(jìn)化分析結(jié)果顯示,絕大部分分離株屬于新的K亞群,6個(gè)小分支,番鴨分毒株與疫苗株MS-H同屬E基因亞群。K亞群不同毒株存在致病力差異,但不同分支分離株致病力差異無規(guī)律性。將M.synoviea分離株體外連續(xù)傳代至70～77代后發(fā)現(xiàn),各實(shí)驗(yàn)株VllhA蛋白序列均出現(xiàn)了不同程度的突變,突變集中在161～240、321～400位氨基酸區(qū)域。分離株QZ-ZZX的vlhA蛋白70～200位氨基酸區(qū)域130個(gè)氨基酸缺失后,致病力下降60%,說明此區(qū)域氨基酸與致病力存在密切關(guān)系。(三)雞M.synoviae疫苗研制及免疫效果評(píng)估本研究研制出M.synovia 滅活疫苗,確定肌肉注射方式為免疫后保護(hù)效果評(píng)估的攻毒模式、HN03為滅活疫苗株、20和41日齡(0.3 mL/只/次)兩次免疫為最佳的免疫程序,證實(shí)免疫滅活疫苗的SPF雞、本地品種雞對(duì)M.synoviae感染有不同程度的保護(hù)力(存在品種差異)。試驗(yàn)雞接種兩次滅活疫苗后,抗體水平維持在抗體陽性率≥60%、抗體滴度均值≥5000狀態(tài)大約10周左右,通過加強(qiáng)免疫可迅速提升免疫雞群的抗體水平。本地品種種雞免疫后,其攜帶M.synoviae母源抗體的子代小雞可以有效抵抗M.synoviae野毒的侵襲,抗體滴度越高,保護(hù)效果越顯著,但是攜帶母源抗體的SPF小雞抗M.synoviae侵襲能力相對(duì)較低。研究表明,本研究研制的滅活疫苗可以為免疫雞及其子代提供保護(hù)力,抵抗M.synoviae野毒侵襲,但不能完全清除M.synoviae的影響。本研究還評(píng)估確定:0.2×104EID50傳染性支氣管病毒株IBV-GX與107 CCU M.synoviea分離株QZ-ZZX為MS-H疫苗免疫后最佳的共感染評(píng)估模型;免疫M(jìn)S-H疫苗的雞群人工感染M.synoviea可獲得100%保護(hù);臨床應(yīng)用MS-H疫苗免疫超過124萬只本地品種肉雞群,其群發(fā)病率和群內(nèi)發(fā)病率相對(duì)未免疫雞群分別降低了 20%和1.62%,本地品種肉雞免疫M(jìn)S-H可獲得對(duì)M.synoviea感染的保護(hù)力。(四)雞M.synviae藥物防治效果評(píng)估·體外藥敏測(cè)定結(jié)果顯示,2012-2015年M.synoviae分離株對(duì)金霉素、泰萬菌素、泰樂菌素、泰妙菌素、林可-大觀霉素、多西環(huán)素等藥物較為敏感,但對(duì)土霉素和諾氟沙星耐藥性明顯。雞只感染M.synoviae后飼喂含金霉素飼料,只能延緩實(shí)驗(yàn)雞只的發(fā)病時(shí)間(1-3天),但對(duì)感染結(jié)果無實(shí)質(zhì)性影響;雞只飼喂金霉素(150ppm)后感染M.synoviae,可延緩實(shí)驗(yàn)雞發(fā)病、降低發(fā)病率,但不同毒株存在很差異;種雞周期性飼喂含金霉素(400 ppm)和泰萬菌素(50ppm)的飼料后,M.synoviae在雞群體內(nèi)生長繁殖受到有效抑制,藥物防控時(shí)間越早、效果越明顯。研究表明,藥物防治可以降低M.synviae感染和發(fā)病率,適合作為M.synviae預(yù)防措施。(五)雞M.synoviae綜合防控措施應(yīng)用評(píng)估本研究根據(jù)研究結(jié)果制定了一套M.synviae防控方案,并在全國16個(gè)M.synoviae感染高發(fā)的省(市)推廣、應(yīng)用和驗(yàn)證,結(jié)果收到良好的應(yīng)用效果:M.synoviae感染發(fā)病的臨床病例從2013年最高時(shí)的4500群,快速下降到2015年的不足1000群,月群內(nèi)發(fā)病率超過1%的群數(shù)從2013年最高的300群減少到2015年不足50群。結(jié)果表明,通過采取本研究制定的綜合防控措施,2013-2015年16個(gè)省應(yīng)用養(yǎng)殖場(chǎng)M.synviae感染發(fā)病群數(shù)減少80%,發(fā)病情況得到有效控制。
【學(xué)位單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S858.31
【部分圖文】：

廣西大學(xué)博士論文本地品種雞傳染性關(guān)節(jié)炎的病因鑒定、ｉＪｉｔ行病學(xué)分析及防拉技木研究??編碼數(shù)超過７００個(gè)蛋白，但目前只有大約２０個(gè)主要蛋白確定了編碼基因＆７９］。目前對(duì)??ｖ／／ｔ４?基因（ｖａｒｉａｂｌｅ?ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ?ａｎｄ?ｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ?Ａ?ｇｅｎｅ）的功能研宄較為深入。??３．１?ｖｌｈＡ?基因??ｖ／Ｍ基因家族包括６４個(gè)基因，其中含６３個(gè)假基因ＷＷ。ｖ／／ｄ假基因的長度范圍為??２１５－］９６１ｂｐ不等，位置也存在較大差異＿。ｖ／Ｍ基因編碼ＶｌｈＡ蛋白，分為前導(dǎo)區(qū)（丨－７５??ｎｔ）、５’端保守區(qū)（７６－１０２５?ｎｔ）以及３’端多變區(qū)（１０２６?ｎｔ，依據(jù)彳叚基因的插入長度而定），??分別編碼信號(hào)肽、ＭＳＰＢ和部分ＭＳＰＡ蛋白。編碼ＭＳＰＢ蛋白的基因片段包含了一個(gè)銜??接的脯氨酸富集重復(fù)區(qū)（ＰＲＲｓ），一個(gè)遺傳高度多態(tài)區(qū)（ＲＩＵ，３４３－４００?ｎｔ），?—個(gè)多變??區(qū)（假基因重組區(qū)，４２Ｍ０２４?ｎｔ）（圖丨－２）?＠１。通過內(nèi)切酶和放射性探針技術(shù)分析Ｍ??？ｓｙｗｏｖ／ａｅ基因組物理圖譜，發(fā)現(xiàn)ｖ／Ｗ假基因和ｖ／ＡＪ表達(dá)基因都集中于Ｍ?１１４?ｋｂ??區(qū)域的基因組內(nèi)，雞毒支原體的ｖ／／ｄ基因則分布于基因組的若干個(gè)區(qū)域內(nèi)１８２］。??Ａ：?ｖｌｈＡｅｎｅ??

３．結(jié)果??３．１病原調(diào)查和鑒定??結(jié)果如圖２－１所示，２０１０年以來發(fā)生傳染性滑液囊炎的本地品種雞群臨床癥狀表??現(xiàn)為行動(dòng)障礙（圖２－１－１）、腿部關(guān)節(jié)腫大（圖２－１－２）、生長發(fā)育不良（圖２－１－１），解剖病理可??看到關(guān)節(jié)腔有淡黃色分泌液或黃色干酪樣分泌物附著（圖２－１－?３，?４，?５，?６）。該病群發(fā)病率??為１０％－１００％，群內(nèi)發(fā)病率平均為５％－８％?（最高可超過２０％），廣西三黃雞、竹絲、清??遠(yuǎn)麻、太湖草、矮腳黃、文昌雞、山坑鳳、江西雞、青腳麻和烏皮麻等本地品種肉雞均??有發(fā)生。??Ｉ?ｍｊ??圖２－１傳染性滑液囊炎臨床表現(xiàn)和病理學(xué)解剖特征??發(fā)病雞出現(xiàn)發(fā)育遲緩、行動(dòng)不便（１），病理上可見腿部、腳墊等關(guān)節(jié)處腫大（２），解剖可觀察到關(guān)??節(jié)處滑液囊有淡黃色液體（３、４、５）或干釀樣滲出物（６）。??Ｆｉｇ．?２－１?Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ?ｓｔｕｄｉｅｓ?ｏｆ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｃｈｉｃｋｅｎｓ?ｂｙ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ?ｓｙｎｏｖｉｔｉｓ??Ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｅｄ?ｃｈｉｃｋｅｎｓ，?ｗｈｉｃｈ?ｓｈｏｗｅｄ?ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ?ｍｏｖｅｍｅｎｔ?ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，?ｅｒｅｃｔ?ｆｅａｔｈｅｒｓ?ａｎｄ??ｓｔｕｎｔｅｄ?ｇｒｏｗｔｈ?（１），?ｗｅｒｅ?ｋｉｌｌｅｄ，?ａｎｄ?ａｎａｔｏｍｉｃａｌ?ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ?ｒｅｖｅａｌｅｄ?ｔｈｅ?ｐｒｅｓｅｎｃｅ?ｏｆ?ｔｈｉｃｋ?（２），?ｃｌｅａｒ?ｔｏ??ｍｉｌｋｙ?ｅｘｕｄａｔｅ?ｉｎ?ｅｎｌａｒｇｅｄ?ｊｏｉｎｔｓ?（３

ｔｈｏｓｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｃｈｉｃｋｅｎｓ．??３．２?２０１０－２０１５年１６個(gè)省本地品種雞養(yǎng)殖場(chǎng)中Ｍ?＾ｙ？ｏｖ／從感染流行分析??如圖２－３Ａ所示，２０１０年傳染性滑液囊炎主要發(fā)生在廣東和廣西兩省。但不久該病??的發(fā)生就成幾何式增長。２０１１－２０１４年該病逐漸蔓延福建、浙江、湖南、江蘇、安徽、??四川、云南、貴州、重慶、湖北、河北、江西、山東和海南等省、直轄市的養(yǎng)殖場(chǎng)，該??病的迅速蔓延流行可能與頻繁而大規(guī)模的活禽跨省轉(zhuǎn)運(yùn)有很大關(guān)系。如圖２－３Ｂ所示，??２０１０－２０１３年該病的病例成明顯上升趨勢(shì)，隨后逐漸減少，２０１３年傳染性滑液囊炎的發(fā)??生病例數(shù)達(dá)到最高值。２０１４年初，在我們研宄的基礎(chǔ)上，提出和實(shí)施了一套積極的防治??２５??
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 曹中贊;欒新紅;劉勝旺;何劍斌;;禽滑液囊支原體研究進(jìn)展[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2012年11期

本文編號(hào)：2888059