發(fā)布時間：2020-11-16 12:15

　　 雞球蟲病是由艾美耳屬一種或多種球蟲寄生于雞腸道黏膜上皮細胞所引起的流行性寄生蟲病。迄今為止,全球發(fā)現(xiàn)的球蟲有14種,我國報道的只有9種,有7種球蟲只感染雞,沒有中間宿主,其中以柔嫩艾美耳球蟲(E.tenella)毒力最強,主要寄生于雞盲腸內(nèi)。感染球蟲的雛雞因生產(chǎn)效率降低以及昂貴的治療費用,給養(yǎng)雞業(yè)帶來的損失始終居高不下�，F(xiàn)我國使用疫苗防治球蟲病還有很多局限性,臨床廣泛使用抗生素及化學合成類藥物來治療球蟲病,但是其造成的藥物殘留和產(chǎn)生的抗藥性已經(jīng)不容忽視。而中藥治療球蟲病能夠有效的解決藥物殘留和耐藥性等問題,擁有良好的發(fā)展前景。為尋求更好的治療球蟲病的中藥復方,本試驗在總結國內(nèi)有關中藥防治球蟲病研究資料的基礎上,首先依據(jù)雞球蟲病的臨床癥狀,選擇28味以解毒驅蟲、止血止痢、燥濕健脾為主治功能的單味中藥,通過單味體外抑制卵囊孢子化試驗確定28味中藥抑制卵囊孢子化的最佳濃度以及對卵囊孢子化率影響的高低,選擇抗球蟲效果好的單味中藥結合中藥配伍原則組成三組中藥復方,然后通過復方體外抑制卵囊孢子化試驗和復方體內(nèi)抗球蟲試驗,分析三組復方對卵囊孢子化的影響和抗球蟲的效果,最后通過檢測IgG和SIgA含量,并制作盲腸病理切片來對三組復方的抗球蟲效果進行進一步分析,獲取對E.tenella感染具有明顯治療效果的中藥復方制劑,為綜合防治雞球蟲病提供依據(jù),為進一步臨床應用提供參考。研究內(nèi)容及結果如下:首先,查找文獻結合E.tenella臨床癥狀及致病機理選擇抗蟲類、止血止痢類和抗菌清熱解毒類中藥,共28味。將所有單味中藥先制成1g/ml水提液,然后稀釋成0.2g/ml、0.15g/ml、0.1g/ml、0.05g/ml四個濃度與未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒溫水浴鍋中培養(yǎng),分別在培養(yǎng)至18h、24h、36h、42h、48h時測定卵囊孢子化率,選擇抗球蟲效果較好的單味中藥結合中藥配伍原則組成三組復方。選擇16味抗球蟲效果好的中藥添加輔藥后組成三組復方,分別為方劑一:常山20g、蛇床子20g、苦參10g、白茅根10g、石榴皮10g、柴胡12g、大黃10g、甘草8g;方劑二:蒼術20g、野菊花20g、白頭翁10g、白術20g、烏梅10g、仙鶴草10g、薏仁10g;方劑三:檳榔20g、常山20g、白頭翁10g、地榆10g、黨參20g、白術10g、當歸10g。然后,將上述三組方劑按比例稱量制成1g/ml復方水提液,再將三組復方均稀釋成1g/ml、0.7g/ml、0.5g/ml、0.3g/ml、0.1g/ml五個濃度與未孢子化E.tenella卵囊混合,并置于29℃恒溫水浴鍋中培養(yǎng),培養(yǎng)至18h、24h、36h、42h、48h時分別測定卵囊孢子化率,比較三組復方對卵囊孢子化率的影響。同時,將飼養(yǎng)至10日齡的320只雛雞,挑選體重相近的雛雞分為復方一組、復方二組、復方三組、球凈組、地克珠利組、攻蟲組(感染不給藥)和空白組(不感染不給藥),每組40只雛雞(剩余40只備用),除空白組外,其他組雛雞均灌服5×10~4E.tenella孢子化卵囊;感染球蟲12h后,復方一組、復方二組、復方三組每只雛雞每日均灌喂相應復方藥液0.3ml,球凈組和地克珠利組按照說明書配為水溶液,讓雛雞自由飲用,攻蟲組和空白組自由飲用高溫滅菌水。每天查看雛雞精神狀況,記錄雛雞死亡情況,感染后第7d將所有雛雞空腹稱重后心臟采血并剖殺,統(tǒng)計盲腸病變計分、病變值、卵囊值、成活率、增重率,計算抗球蟲指數(shù);檢測血清中的IgG含量和盲腸食糜中的SIgA含量;取各組盲腸制作病理組織切,觀察各組盲腸病理組織學變化。結果顯示,方劑一、二、三分別再在濃度為0.1g/ml、0.1g/ml、1g/ml時卵囊孢子化率最低,且0.1g/ml方劑二組卵囊孢子化率僅為33.38%,低于0.1g/ml方劑二組和1g/ml方劑三,說明方劑二對卵囊孢子化的抑制作用高于方劑一和方劑三。方劑二相對增重率為83.15%,與攻蟲組差異極顯著(P0.01),OPG為6.23×10~4,僅高于地克珠利組,說明方劑二能改善感染球蟲引起的增重下降情況,并能減少盲腸中的卵囊數(shù)量,方劑二抗球蟲指數(shù)為139,高于方劑一、方劑三和球凈組,低于地克珠利組,表明方劑二抗球蟲效果高于方劑一、方劑三和球凈組,但低于地克珠利組,為中等抗球蟲藥物;進一步研究表明方劑二能明顯提高病雞IgG和SIgA含量,并且能改善卵囊對盲腸的損傷,方劑一和方劑三組對病雞IgG、SIgA含量的影響和對盲腸損傷的改善均不明顯。
【學位單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S858.31
【部分圖文】：

圖 1.1 最佳濃度抗蟲類中藥在不同時間對卵囊孢子化率的影響re 1.1 Effect of the best concentrations of Chinese medicine agparasite on the spore rate of oocysts at different times止痢類單味中藥體外篩選結果1-2 和圖 1.2 統(tǒng)計分析可知，地榆在濃度為 0.2g/ml 時組間孢子的地榆在 18h~24h 時卵囊未出現(xiàn)孢子化現(xiàn)象，24h~42h 之間卵快，42h~48h 之間孢子化率上升變緩；烏梅在濃度為 0.2g/ml 與其他中藥組之間差異顯著（P＜0.05），在培養(yǎng) 36h 后卵囊，48h 時卵囊孢子化率僅為 15.52%；五倍子對卵囊的孢子化的8h 時卵囊孢子化率僅低于 2.5%重鉻酸鉀組，且隨藥物濃度的降影響逐漸減弱；石榴皮對卵囊孢子化率的影響隨藥物濃度的降藥物濃度為 0.2g/ml 時，卵囊的孢子化率為 76.96%，而在 0孢子化率僅為 23.96%，與其他中藥組之間差異顯著（P＜0.05囊孢子化率上升緩慢；仙鶴草在不同濃度時對卵囊孢子化率的物濃度為 0.2g/ml 時，卵囊孢子化率為 33.33%，但濃度下降至 0

2 Effect of different concentrations of Chinese medicine for hesentery on the spore rate of oocysts at different times (sporate unit:%)濃度（g/ml）0.2 0.15 0.1 28.57b56.25b62.50c 15.52a33.33a38.33a 90.20g91.38g97.06h 76.96f66.60c52.46b 33.33c81.82f87.50g 40.50d68.97d73.91d 65.00e78.05e82.35e 76.19f83.33f85.71f

1.3 最佳濃度抗菌、清熱解毒類中藥在不同時間對卵囊孢子化率的影3 Effect of best concentrations of Chinese medicine for antibaring and detoxifying on the spore rate of oocysts at differ(sporulation rate unit:%)體外抑制卵囊孢子化的試驗結果，結合中藥配伍“君臣佐使三組復方，其中方劑一以驅蟲為主，輔佐清熱解毒，方劑脾燥濕，方劑三以驅蟲為主，補益為輔佐。表 1-4 復方組成Table 1-4 Compound composition中藥組成及劑量（g）常山（20）、蛇床子（20）、苦參（10）、白茅根（10）、石榴皮（10）、柴胡（12）、大黃（10）、甘草（8）蒼術（20）、野菊花（20）、白頭翁（10）、白術（20）、
【參考文獻】

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本文編號：2886216