目的:研究小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs）對實驗性干燥綜合征小鼠（experimental Sj?gren syndrome,ESS）疾病進(jìn)程的影響;探究BM-MSCs對髓源性抑制細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cells,MDSCs）的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。方法:（1）構(gòu)建ESS小鼠模型,于初次免疫后的第18天和第25天經(jīng)尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs至ESS小鼠,檢測小鼠唾液流速,酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測小鼠血清中抗SG抗體,抗核抗體和抗M3R抗體的水平。流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry,FCM）檢測小鼠脾臟及頸部淋巴結(jié)中Th1和Th17細(xì)胞的比例。（2）尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs于ESS小鼠,FCM檢測小鼠脾臟及頸部淋巴結(jié)中總MDSCs及其亞群多核細(xì)胞樣MDSCs（polymorphonuclear MDSCs,PMN-MDSCs）和單核細(xì)胞樣MDSCs（monocytic MDSCs,M-MDSCs）的比例。采用免疫磁珠法分選不同處理組ESS小鼠脾臟中的CD... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

原發(fā)性干燥綜合征中涉及到的細(xì)胞和分子機(jī)制[8]

圖 1.3 MSCs 的免疫調(diào)節(jié)能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本實驗的研究目的、方法、實驗設(shè)計及意義1.4.1 實驗的研究目的前期的實驗結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)隨著 ESS 疾病的發(fā)生發(fā)展，MDSCs 的免疫抑制功能逐漸喪失，進(jìn)而促進(jìn)疾病進(jìn)程。本研究初步探討 BM-MSCs 對 ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的調(diào)控及分子機(jī)制作用，為臨床干燥綜合征的治療提供新的策略。1.4.2 實驗方法BM-MSCs 原代培養(yǎng)及純化、實驗性干燥綜合征小鼠模型的構(gòu)建、流式細(xì)胞術(shù)、免疫磁珠分選法、逆轉(zhuǎn)錄 PCR、實時熒光定量 PCR、轉(zhuǎn)染、CFSE 標(biāo)記的淋巴細(xì)胞增殖實驗等。

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文**: p<0.01, *: p<0.05）。2.3 實驗結(jié)果2.3.1 BM-MSCs 對 ESS 小鼠疾病進(jìn)程的影響如圖 2.1A 所示，分別在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天，通過尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs 至 ESS 小鼠體內(nèi)，并觀察其對 ESS 小鼠疾病進(jìn)程的影響。結(jié)果顯示，過繼轉(zhuǎn)移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后，小鼠的唾液流速明顯加快（圖 2.1B）（**p<0.01）；多種與ESS 疾病進(jìn)程密切相關(guān)的自身抗體，包括抗 SG 抗體，抗核抗體和抗 M3R 抗體的水平顯著下降（圖 2.1C.D.E）（**p<0.01）。


本文編號：2898737