BM-MSCs通過增強MDSCs免疫抑制功能治療小鼠實驗性干燥綜合征的實驗研究
發(fā)布時間:2020-12-05 02:56
目的:研究小鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)對實驗性干燥綜合征小鼠(experimental Sj?gren syndrome,ESS)疾病進程的影響;探究BM-MSCs對髓源性抑制細胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的調控作用及其分子機制。方法:(1)構建ESS小鼠模型,于初次免疫后的第18天和第25天經尾靜脈過繼轉移BM-MSCs至ESS小鼠,檢測小鼠唾液流速,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測小鼠血清中抗SG抗體,抗核抗體和抗M3R抗體的水平。流式細胞術(flow cytometry,FCM)檢測小鼠脾臟及頸部淋巴結中Th1和Th17細胞的比例。(2)尾靜脈過繼轉移BM-MSCs于ESS小鼠,FCM檢測小鼠脾臟及頸部淋巴結中總MDSCs及其亞群多核細胞樣MDSCs(polymorphonuclear MDSCs,PMN-MDSCs)和單核細胞樣MDSCs(monocytic MDSCs,M-MDSCs)的比例。采用免疫磁珠法分選不同處理組ESS小鼠脾臟中的CD...
【文章來源】:江蘇大學江蘇省
【文章頁數】:68 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
原發(fā)性干燥綜合征中涉及到的細胞和分子機制[8]
圖 1.3 MSCs 的免疫調節(jié)能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本實驗的研究目的、方法、實驗設計及意義1.4.1 實驗的研究目的前期的實驗結果我們發(fā)現(xiàn)隨著 ESS 疾病的發(fā)生發(fā)展,MDSCs 的免疫抑制功能逐漸喪失,進而促進疾病進程。本研究初步探討 BM-MSCs 對 ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的調控及分子機制作用,為臨床干燥綜合征的治療提供新的策略。1.4.2 實驗方法BM-MSCs 原代培養(yǎng)及純化、實驗性干燥綜合征小鼠模型的構建、流式細胞術、免疫磁珠分選法、逆轉錄 PCR、實時熒光定量 PCR、轉染、CFSE 標記的淋巴細胞增殖實驗等。
江蘇大學碩士學位論文**: p<0.01, *: p<0.05)。2.3 實驗結果2.3.1 BM-MSCs 對 ESS 小鼠疾病進程的影響如圖 2.1A 所示,分別在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天,通過尾靜脈過繼轉移BM-MSCs 至 ESS 小鼠體內,并觀察其對 ESS 小鼠疾病進程的影響。結果顯示,過繼轉移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后,小鼠的唾液流速明顯加快(圖 2.1B)(**p<0.01);多種與ESS 疾病進程密切相關的自身抗體,包括抗 SG 抗體,抗核抗體和抗 M3R 抗體的水平顯著下降(圖 2.1C.D.E)(**p<0.01)。
本文編號:2898737
【文章來源】:江蘇大學江蘇省
【文章頁數】:68 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
原發(fā)性干燥綜合征中涉及到的細胞和分子機制[8]
圖 1.3 MSCs 的免疫調節(jié)能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本實驗的研究目的、方法、實驗設計及意義1.4.1 實驗的研究目的前期的實驗結果我們發(fā)現(xiàn)隨著 ESS 疾病的發(fā)生發(fā)展,MDSCs 的免疫抑制功能逐漸喪失,進而促進疾病進程。本研究初步探討 BM-MSCs 對 ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的調控及分子機制作用,為臨床干燥綜合征的治療提供新的策略。1.4.2 實驗方法BM-MSCs 原代培養(yǎng)及純化、實驗性干燥綜合征小鼠模型的構建、流式細胞術、免疫磁珠分選法、逆轉錄 PCR、實時熒光定量 PCR、轉染、CFSE 標記的淋巴細胞增殖實驗等。
江蘇大學碩士學位論文**: p<0.01, *: p<0.05)。2.3 實驗結果2.3.1 BM-MSCs 對 ESS 小鼠疾病進程的影響如圖 2.1A 所示,分別在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天,通過尾靜脈過繼轉移BM-MSCs 至 ESS 小鼠體內,并觀察其對 ESS 小鼠疾病進程的影響。結果顯示,過繼轉移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后,小鼠的唾液流速明顯加快(圖 2.1B)(**p<0.01);多種與ESS 疾病進程密切相關的自身抗體,包括抗 SG 抗體,抗核抗體和抗 M3R 抗體的水平顯著下降(圖 2.1C.D.E)(**p<0.01)。
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