口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)引起牛、羊、豬等偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。FMDV屬于微RNA病毒科、口蹄疫病毒屬成員。微RNA病毒科病毒的基因組5’末端缺乏帽子結(jié)構(gòu),其蛋白合成起始依賴于5’非編碼區(qū)內(nèi)的翻譯順式作用元件一內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(Internal ribosome entry site, IRES),它能夠招募翻譯起始因子及核糖體從而起始翻譯。最近的研究發(fā)現(xiàn),不同病毒的IRES在不同細(xì)胞中的翻譯起始效率不同,這表明IRES可能是決定病毒細(xì)胞嗜性的重要元件。 為確定IRES元件是否與口蹄疫病毒的細(xì)胞嗜性有關(guān),我們?cè)贠型FMDV反向遺傳操作平臺(tái)基礎(chǔ)上,利用與FMDV IRES親緣關(guān)系最近的牛鼻病毒(BRV) IRES進(jìn)行置換,構(gòu)建并拯救了嵌合BRV IRES的重組FMDV。該嵌合病毒在鼠源細(xì)胞BHK-21上具有與親本毒相同的復(fù)制能力,然而在豬源細(xì)胞IBRS-2和PK-15上的復(fù)制能力卻比親本病毒下降100倍。這一發(fā)現(xiàn)表明,IRES是決定FMDV細(xì)...

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圖1.1口蹄疫病毒基因組結(jié)構(gòu)（引自Masonetal.2003)

nonstructuralproteins圖1.1口蹄疫病毒基因組結(jié)構(gòu)（引自Masonetal.2003)Fig1.1SchematicdiagramoftheFMDVgenome(RetrievedfromMasonetal.2003)FMDV....

圖2.1FMDV亞基因組復(fù)制子RepFMDV構(gòu)建結(jié)構(gòu)示意圖

圖2.1FMDV亞基因組復(fù)制子RepFMDV構(gòu)建結(jié)構(gòu)示意圖Fig.2.1SchematicdiagramofconstructionofthesubgenomicrepliconofFMDV2.1.6轉(zhuǎn)染

圖2.2RepFMDV的醒切鑒定

U:DL10000;1:PYS;2:RepFMDV圖2.2RepFMDV的醒切鑒定IdentificationoftheRepFMDVbyrestrictionenzymea制能力RepFMDV轉(zhuǎn)染BHK-2]后24h提取的細(xì)胞總所示。以上游或下游引物....

圖2.3RepFMDV轉(zhuǎn)染BHK-21細(xì)胞中負(fù)鏈RNA的RT-PCR檢測(cè)

M1 2loooobp7000bp4ooobplooobpU:DL10000;1:PYS;2:RepFMDV圖2.2RepFMDV的醒切鑒定Fig.2.2IdentificationoftheRepFMDVbyrestrictionenzymeana....

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