自2010年冬季以來,先后在我國包括安徽在內(nèi)的多個省份發(fā)生了大范圍的生豬腹瀉疫情,各種日齡的豬均有發(fā)生,其中以哺乳仔豬最為嚴(yán)重,表現(xiàn)為發(fā)病急、發(fā)病率和死亡率高的特點。根據(jù)全國豬病持續(xù)監(jiān)測和調(diào)查結(jié)果,當(dāng)前造成生豬腹瀉流行的主要病原是豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒,除此之外尚與豬輪狀病毒、博卡病毒、豬圓環(huán)病毒、沙門氏菌、致病性大腸桿菌等病原的存在有關(guān)。沙門氏菌和致病性大腸桿菌是引起仔豬腹瀉的主要細菌性病原菌。隨著獸醫(yī)臨床上抗生素的不合理使用,致使沙門氏菌、大腸桿菌耐藥菌株的數(shù)量逐年上升,臨床用藥效果不明顯,而生物膜的形成則是細菌增強抵抗不良環(huán)境的結(jié)果,如對抗生素的敏感性、毒力的改變等。針對安徽地區(qū)的生豬腹瀉疫情,為制定有效的防控措施提供科學(xué)依據(jù),我們分別從病毒性病原和細菌性病原兩個方面展開了調(diào)查研究。圍繞沙門氏菌和致病性大腸桿菌,本研究進行了以下工作：1、采用常規(guī)法結(jié)合PCR技術(shù),對601份糞便和腸道內(nèi)容物樣品進行沙門氏菌和致病性大腸桿菌的分離鑒定；并利用玻片凝集試驗鑒定分離菌株的血清型。結(jié)果顯示,601份樣品中分離到沙門氏菌69株,陽性檢出率為11.5%,致病性大腸桿菌129株,陽...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要符號列表
文獻綜述
1 引言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣本來源
        2.1.2 質(zhì)控菌株
        2.1.3 主要培養(yǎng)基和試劑
        2.1.4 抗生素藥敏紙片
        2.1.5 試驗中所用PCR引物
        2.1.6 實驗動物
        2.1.7 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 沙門氏菌的分離鑒定
            2.2.1.1 沙門氏菌的分離培養(yǎng)
            2.2.1.2 沙門氏菌分離株P(guān)CR鑒定
            2.2.1.3 沙門氏菌分離株血清型鑒定
        2.2.2 致病性大腸桿菌的分離鑒定
            2.2.2.1 大腸桿菌的分離培養(yǎng)
            2.2.2.2 大腸桿菌分離株生化鑒定
            2.2.2.3 大腸桿菌分離株致病性試驗
            2.2.2.4 致病性大腸桿菌分離株血清型鑒定
        2.2.3 分離菌株體外生物膜測定
        2.2.4 分離菌株耐藥性測定
            2.2.4.1 K-B紙片法測定藥物敏感性
            2.2.4.2 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株測定
            2.2.4.3 生物膜細菌與浮游菌最小抑菌濃度(MIC)測定
        2.2.5 細菌LD₅₀測定
            2.2.5.1 體外生長曲線的測定
            2.2.5.2 半數(shù)致死量(LD₅₀)的測定
    2.3 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 沙門氏菌和致病性大腸桿菌的分離培養(yǎng)與鑒定
        3.1.1 沙門氏菌和大腸桿菌的分離培養(yǎng)
        3.1.2 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株的鑒定
    3.2 樣品中沙門氏菌和致病性大腸桿菌的檢出率情況
    3.3 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株的血清型分布
    3.4 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株生物膜檢測結(jié)果
    3.5 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株的藥物敏感性實驗
        3.5.1 分離菌株的藥敏實驗結(jié)果
        3.5.2 分離菌株的多重耐藥譜
        3.5.3 分離菌株中產(chǎn)ESBLs菌株測定結(jié)果
        3.5.4 分離菌株生物膜與耐藥性相關(guān)性分析
        3.5.5 分離菌株體外生物膜生長曲線測定結(jié)果
        3.5.6 浮游細菌和生物膜細菌MIC測定結(jié)果
        3.5.7 細菌在不同時間形成生物膜時MIC測定結(jié)果
    3.6 分離株毒力測定
        3.6.1 體外生長曲線測定結(jié)果
        3.6.2 LD₅₀測定結(jié)果
4 討論
    4.1 樣品中沙門氏菌和致病性大腸桿菌檢出情況
    4.2 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株血清型分布
    4.3 沙門氏菌和致病性大腸桿菌分離株藥物感受性分析
    4.4 細菌生物膜與耐藥性關(guān)系
    4.5 細菌生物膜與毒力關(guān)系
結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡介
在讀期間發(fā)表論文



本文編號：3993756