發(fā)布時(shí)間：2020-11-18 04:03

　　 [背景]棕櫚酸(PA)和β-羥丁酸(BHBA)是一些代謝性疾病中炎癥反應(yīng)的重要誘導(dǎo)因子。PA作為非酯化脂肪酸(NEFA)中含量最高的飽和脂肪酸,跟BHBA一樣,在酮病牛血液中具有較高的濃度。高酮血癥和高游離脂肪酸血癥與圍產(chǎn)期奶牛炎癥性疾病(如乳腺炎和子宮內(nèi)膜炎)的發(fā)展密切相關(guān)。[目的]本研究的目的是探討高水平的PA和BHBA是否可以激活氧化應(yīng)激介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路以促進(jìn)牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞(BEND)中炎性因子的合成。為了解圍產(chǎn)期奶牛營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病與炎性疾病之間的關(guān)系提供理論依據(jù)。[方法]在本研究中,利用氧化指標(biāo)測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELIS A)、熒光定量PCR(RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)了不同濃度的PA和BHBA作用下BEND細(xì)胞的氧化狀態(tài),以及在添加N-乙酰半胱氨酸(NAC,抗氧化劑)和二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC,NF-κB信號(hào)通路抑制劑)后,各處理組中炎性因子的表達(dá)和NF-κB信號(hào)通路的激活情況。[結(jié)果]用較高濃度的PA和BHBA分別作用于體外培養(yǎng)的BEND細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中丙二醛(MDA)的含量顯著增加,谷胱甘肽(GSH)的含量減少,細(xì)胞中抗氧化系統(tǒng)的活性降低,包括谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和總抗氧化能力(T-AOC)。同時(shí),PA和B HBA誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激激活了NF-κB信號(hào)通路,上調(diào)了促炎因子的釋放。但是,當(dāng)分別同時(shí)加入PDTC和NAC時(shí),PA和BHBA對(duì)NF-κB信號(hào)通路的激活作用和對(duì)炎癥反應(yīng)的促進(jìn)作用被顯著抑制。[結(jié)論]高濃度的棕櫚酸和β-羥丁酸可誘導(dǎo)BEND細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激,激活NF-κB信號(hào)通路,促進(jìn)炎性細(xì)胞因子IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá),導(dǎo)致牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞發(fā)生炎性損傷。
【學(xué)位單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S858.23
【部分圖文】：

圖 2-1 細(xì)胞分離培養(yǎng) 0h(10×40) 圖 2-2 細(xì)胞分離培養(yǎng) 12h(10×40)Fig.2-1After passage 0h Fig.2-2 After passage 12h圖 2-3 細(xì)胞分離培養(yǎng) 24h(10×40) 圖 2-4 細(xì)胞分離培養(yǎng) 48h(10×40)Fig.2-3 After passage 24h Fig.2-4 After passage 48h2.3.2 不同濃度的 PA 作用不同時(shí)間對(duì) BEND 細(xì)胞活力影響的檢測(cè)結(jié)果如圖 2-5 所示，不同濃度的 PA 作用于 BEND 細(xì)胞，并比較了 PA 作用不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞活力的影響。由圖可知，隨著作用時(shí)間的增加，不同濃度的 PA 組間差異逐漸顯著，并且發(fā)現(xiàn) PA 對(duì) BEND 細(xì)胞活力的影響具有濃度依賴性。當(dāng)作用

圖 2-1 細(xì)胞分離培養(yǎng) 0h(10×40) 圖 2-2 細(xì)胞分離培養(yǎng) 12h(10×40)Fig.2-1After passage 0h Fig.2-2 After passage 12h圖 2-3 細(xì)胞分離培養(yǎng) 24h(10×40) 圖 2-4 細(xì)胞分離培養(yǎng) 48h(10×40)Fig.2-3 After passage 24h Fig.2-4 After passage 48h2.3.2 不同濃度的 PA 作用不同時(shí)間對(duì) BEND 細(xì)胞活力影響的檢測(cè)結(jié)果如圖 2-5 所示，不同濃度的 PA 作用于 BEND 細(xì)胞，并比較了 PA 作用不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞活力的影響。由圖可知，隨著作用時(shí)間的增加，不同濃度的 PA 組間差異逐漸顯著，并且發(fā)現(xiàn) PA 對(duì) BEND 細(xì)胞活力的影響具有濃度依賴性。當(dāng)作用

圖 2-3 細(xì)胞分離培養(yǎng) 24h(10×40) 圖 2-4 細(xì)胞分離培養(yǎng) 48h(10×40)Fig.2-3 After passage 24h Fig.2-4 After passage 48h2.3.2 不同濃度的 PA 作用不同時(shí)間對(duì) BEND 細(xì)胞活力影響的檢測(cè)結(jié)果如圖 2-5 所示，不同濃度的 PA 作用于 BEND 細(xì)胞，并比較了 PA 作用不同時(shí)間對(duì)細(xì)胞活力的影響。由圖可知，隨著作用時(shí)間的增加，不同濃度的 PA 組間差異逐漸顯著，并且發(fā)現(xiàn) PA 對(duì) BEND 細(xì)胞活力的影響具有濃度依賴性。當(dāng)作用時(shí)間為 24 h 時(shí)，組間差異開始明顯，所以綜合不同濃度 PA 組間細(xì)胞活力下降的顯著性和 BEND 細(xì)胞生長(zhǎng)周期等因素，我們篩選出 24 h 為后續(xù)試驗(yàn)的最佳 PA作用時(shí)間。觀察在 24 h 時(shí)細(xì)胞活力狀態(tài)，我們發(fā)現(xiàn)當(dāng) PA 濃度為 0.1~0.3 mmol/L時(shí)細(xì)胞活力下降不顯著，當(dāng) PA 濃度為 0.4 mmol/L 時(shí)細(xì)胞活力下降顯著，當(dāng) PA濃度為 0.6 mmol/L 時(shí)細(xì)胞活力下降極顯著。所以，我們選擇 0.2 mmol/L、0.4mmol/L(P<0.05)、0.6 mmol/L(P<0.01)這三個(gè)具有代表性的 PA 濃度進(jìn)行后續(xù)的細(xì)胞氧化狀態(tài)測(cè)定試驗(yàn)。
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邵毅;豐浩田;賈浩;;子宮內(nèi)膜細(xì)胞采集器篩查子宮內(nèi)膜癌臨床應(yīng)用146例分析[J];中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué);2013年04期

2 唐莉;黃荷鳳;張?jiān)葡?馬艷萍;周彩云;;子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜細(xì)胞與正常人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外生長(zhǎng)特性的比較[J];中外醫(yī)療;2009年15期

3 趙欣;周強(qiáng);顧明潔;郭玉娜;徐迅;虞蘊(yùn)佳;;子宮內(nèi)膜細(xì)胞診斷子宮內(nèi)膜癌及其癌前病變的臨床評(píng)價(jià)[J];中國(guó)生育健康雜志;2007年05期

4 歐俊;蔣錚;惠寧;;子宮內(nèi)膜細(xì)胞采集在子宮內(nèi)膜癌早期診斷中的應(yīng)用[J];中國(guó)生育健康雜志;2006年03期

5 劉曉璦,朱巖平,金毓翠;消炎痛對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞攝取前列腺素E_2的影響[J];生殖與避孕;1989年04期

6 王海燕;任玲;周健;雷靜霞;;子宮內(nèi)膜細(xì)胞采集器篩查子宮內(nèi)膜癌應(yīng)用價(jià)值分析[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2017年07期

7 劉念;胡超;任野;劉勝武;;人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的改良研究[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2011年03期

8 鄭艷;郭端英;李世彤;;宮腔鏡手術(shù)中膨?qū)m壓力對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞播散的影響[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)刊;2011年04期

9 陳佳紅;宋曉萍;孫雪榮;;不同月經(jīng)周期人子宮內(nèi)膜細(xì)胞的體外培養(yǎng)特性及鑒定[J];檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床;2010年21期

10 張一萍;王文玲;李亞里;荊麗敏;;體外培養(yǎng)的人子宮內(nèi)膜細(xì)胞中GnRH及其受體的表達(dá)[J];中國(guó)急救復(fù)蘇與災(zāi)害醫(yī)學(xué)雜志;2008年09期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 張艷艷;17β-雌二醇和孕酮對(duì)永生化山羊子宮內(nèi)膜細(xì)胞及外周血淋巴細(xì)胞的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

2 王永剛;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜細(xì)胞分化的體外實(shí)驗(yàn)[D];中南大學(xué);2012年

3 吳慶俠;永生化山羊子宮內(nèi)膜細(xì)胞系的建立[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

4 林蓓蓓;子宮內(nèi)膜異位癥miRNA表達(dá)譜的變化及相關(guān)機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2011年

5 張潤(rùn)駒;BK_（Ca）對(duì)人子宮內(nèi)膜容受性的影響及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2011年

6 姚佳;孕酮與干擾素-τ對(duì)體外培養(yǎng)的牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基因組表達(dá)譜的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 徐麗娜;槲皮素對(duì)多氯聯(lián)苯致大鼠胚胎著床障礙的保護(hù)作用機(jī)制[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

8 文繼紅;焦性沒食子酸對(duì)雌性小鼠的抗生育作用及其機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2011年

9 趙越超;小鼠圍著床期子宮中多胺相關(guān)基因的表達(dá)、調(diào)節(jié)與功能[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李蘭芝;棕櫚酸、β-羥丁酸誘導(dǎo)氧化應(yīng)激對(duì)牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路影響的研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

2 姜曉娜;ANXA8基因調(diào)控豬子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖作用的機(jī)理研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

3 李美琦;發(fā)酵乳桿菌對(duì)LPS誘導(dǎo)的牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎性損傷調(diào)節(jié)作用的研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

4 王佳美;發(fā)酵乳桿菌對(duì)LTA誘導(dǎo)的牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞炎性損傷干預(yù)作用的研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

5 鄭佳;高濃度棕酸條件下奶牛子宮內(nèi)膜細(xì)胞基因表達(dá)譜櫚差異分析[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

6 朱穎帆;環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞SGK1表達(dá)的影響[D];浙江大學(xué);2017年

7 益敏輝;米非司酮對(duì)人子宮內(nèi)膜細(xì)胞的影響及其機(jī)制初探[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2017年

8 馮燕翀;子宮內(nèi)膜細(xì)胞取材器診斷慢性子宮內(nèi)膜炎的價(jià)值[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

9 屈延延;性腺激素對(duì)山羊子宮內(nèi)膜細(xì)胞分泌活性及激素受體表達(dá)的影響[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

10 王艷玲;人分泌早期子宮內(nèi)膜細(xì)胞共培養(yǎng)體系對(duì)早期鼠胚體外發(fā)育的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2004年

本文編號(hào)：2888305