發(fā)布時間：2020-11-17 18:39

　　 本論文利用Diquat構(gòu)建小尾寒羊慢性氧化應(yīng)激模型并在應(yīng)激狀態(tài)下飼喂沙蔥及沙蔥黃酮,探討沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊氧化應(yīng)激是否具有緩解作用,為沙蔥作為抗氧化劑的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。本論文的主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:試驗一,小尾寒羊慢性氧化應(yīng)激模型的建立。選取12只體重在35±5 kg的小尾寒羊母羊,隨機(jī)分為4組,即正常對照組(等量生理鹽水)、低濃度組(8mg/kg BW Diquat)、中濃度組(10mg/kg BW Diquat)、高濃度組(12mg/kg BW Diquat),每組3只羊,試驗期共24 d。試驗期每天記錄試驗羊的采食量,并在第0、6、12、18、24 d在晨飼前稱重并進(jìn)行靜脈采血,分離血清,測定血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)等抗氧化指標(biāo)。結(jié)果表明,與正常對照組相比,各Diquat濃度組的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)及血清SOD、CAT、GSH-Px活性和T-AOC均顯著降低(P0.05),MDA含量顯著升高(P0.05)。在試驗期第12d時Diquat低濃度組試驗羊的血清抗氧化指標(biāo)和ADFI、ADG與對照組相比差異不顯著(P0.05),恢復(fù)到對照組的正常水平,說明低濃度的Diquat引起的氧化應(yīng)激持續(xù)時間較短。Diquat高濃度組試驗羊在注射Diquat后的第6 d出現(xiàn)死亡情況,說明,此濃度產(chǎn)生的氧化應(yīng)激過強(qiáng),不能用于后續(xù)試驗研究。Diquat中濃度組試驗羊在注射Diquat后的第6 d,與對照組相比,ADFI、ADG,血清SOD、CAT及GSH-Px活性和T-AOC均顯著降低,MDA含量顯著升高(P0.05)。在第12 d時各項指標(biāo)均達(dá)到峰值,而在第18 d時,各項指標(biāo)雖然有所恢復(fù)但仍顯著低于對照組(P0.05)。說明,腹腔注射10 mg/kg BW Diquat溶液對小尾寒羊產(chǎn)生的氧化應(yīng)激至少能夠持續(xù)18d以上,達(dá)到產(chǎn)生慢性氧化應(yīng)激的目的。因此,本試驗選擇10 mg/kg BW Diquat進(jìn)行后續(xù)試驗研究。試驗二,沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊氧化應(yīng)激的緩解作用。選擇15只體重在40±5 kg小尾寒羊母羊,隨機(jī)分為3組,分別為對照組、沙蔥組及黃酮組。預(yù)飼期15 d,試驗期42 d。試驗期第1d開始,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,沙蔥組和黃酮組分別在基礎(chǔ)日糧中添加10 g/只/d沙蔥粉和120 mg/只/d黃酮粉進(jìn)行飼喂。在試驗期第30 d對各組試驗羊按10 mg/kg BW一次性腹腔注射Diquat溶液,繼續(xù)飼喂12 d。并在試驗期第42 d,每組隨機(jī)選取3只羊屠宰采取肝臟;并且在整個試驗期分別在0、15、30、34、38和42 d晨飼前稱重并采血,分離血清,測定血清中的抗氧化指標(biāo)(SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC、MDA)。試驗結(jié)果表明,在試驗期第30d(未注射Diquat之前),與對照組相比,沙蔥組和黃酮組試驗羊血清中SOD、GSH-Px及CAT活性和T-AOC、ADFI、ADG均顯著上升(P0.05),MDA含量顯著降低(P0.05)。在注射Diquat后,沙蔥及黃酮組各項指標(biāo)均顯著優(yōu)于對照組(P0.05),且黃酮組顯著優(yōu)于沙蔥組(P0.05)。表明,沙蔥及沙蔥黃酮能緩解由Diquat誘導(dǎo)引起的小尾寒羊氧化應(yīng)激,且沙蔥黃酮緩解效果顯著優(yōu)于沙蔥(P0.05)。試驗三,沙蔥及沙蔥黃酮對Diquat誘導(dǎo)的小尾寒羊氧化應(yīng)激抗氧化機(jī)制的影響。試驗設(shè)計同試驗二。檢測血清中NO含量并用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測小尾寒羊肝臟中NF-κB和iNOS的基因表達(dá)量。試驗結(jié)果顯示,沙蔥組和黃酮組小尾寒羊肝臟中NF-κB和iNOS基因的表達(dá)及血清中NO的含量均顯著低于對照組(P0.05),黃酮組小尾寒羊肝臟中NF-κB和iNOS基因的表達(dá)及NO的含量顯著低于沙蔥組(P0.05)。表明,沙蔥及沙蔥黃酮可通過抑制肝臟中NF-κB和iNOS基因的表達(dá),來減少NO的產(chǎn)生,沙蔥黃酮的抑制效果顯著優(yōu)于沙蔥(P0.05)。綜上所述,10 mg/kg BW Diquat能夠建立穩(wěn)定的小尾寒羊慢性氧化應(yīng)激模型。在日糧中添加沙蔥及沙蔥黃酮均能緩解Diquat對小尾寒羊引起的氧化損傷,且沙蔥黃酮的緩解作用優(yōu)于沙蔥。
【學(xué)位單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S826.5
【部分圖文】：

卜，吐ion擴(kuò)增曲線與溶解曲線

iNOS擴(kuò)增曲線與溶解曲線

圖５?ＮＦ－?ｋ?Ｂ擴(kuò)增曲線與溶解曲線??Ｆｉｇ．５?Ｒｅａｌ?ｔｉｍｅ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｃｕｒｖ－ｅ?ａｎｄ?ｍｅｌｔｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＮＦ－ｋＢ??
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2887793