發(fā)布時間：2018-03-10 18:36

  本文選題：奶牛　切入點：亞臨床酮病　出處：《安徽農業(yè)大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：奶牛酮病分為臨床型和亞臨床型。臨床型酮病的特征是奶牛血液、尿液或乳汁中酮體的含量明顯升高,臨床表現(xiàn)食欲不振、體重下降、產奶量明顯下降等。而亞臨床酮病未表現(xiàn)明顯的臨床癥狀,但血液、尿液或乳汁中酮體含量超過正常水平。目前國內外,關于臨床型酮病的報道已經較多,而有關亞臨床酮病的研究相對較少。本試驗選擇21頭年齡、胎次、泌乳量和泌乳天數(shù)相近的亞臨床酮病奶牛(1.2mmol·L~(-1)≤BHBA2.2 mmol·L~(-1))和非酮病奶牛(BHBA1.2 mmol·L~(-1)),分成兩組。分別于清晨飼喂前,通過尾靜脈采集抗凝血,用于血液常規(guī)指標檢測;采集非抗凝血,用于氧化抗氧化狀態(tài)、肝功能和免疫指標檢測;收集新鮮乳樣用于乳成分檢測。同時,體外培養(yǎng)奶牛原代肝細胞,并添加不同濃度的非酯化脂肪酸(NEFA),分別刺激12、24和36 h,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和實時熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測肝細胞中氧化抗氧指標的含量、活性及mRNA水平。試驗結果顯示:與非酮病奶牛相比,亞臨床酮病奶牛白細胞總數(shù)(WBC)、淋巴細胞總數(shù)(LYM)顯著降低(P0.05),平均血小板體積(MPV)極顯著降低(P0.01),而中間細胞數(shù)(MID)、中性粒細胞數(shù)(NEU)、紅細胞總數(shù)(RBC)、血小板總數(shù)(PLT)、血小板壓積(PCT)和血小板分布寬度(PDM)均差異不顯著(P0.05)。乳脂肪比(MF)顯著升高(P0.05),乳蛋白比(MP)和全脂乳固體比(TS)極顯著降低(P0.01),而乳糖比(L)差異不顯著(P0.05)�？偪寡趸�能力(TAC)顯著降低(P0.05),谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性極顯著降低(P0.01),丙二醛(MDA)含量極顯著升高(P0.01),超氧化物歧化酶(SOD)的活性有降低趨勢,但差異不顯著(P0.05)。丙氨酸氨基轉移酶(ALT)活性顯著升高(P0.05);總蛋白(TP)含量顯著降低(P0.05);堿性磷酸酶(AKP)活性、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)活性、總膽紅素(TB)、低脂密度膽固醇(LDL-c)含量極顯著升高(P0.01);總膽固醇(TCH)、高脂密度膽固醇(HDL-c)和白蛋白(ALB)含量極顯著降低(P0.01);乳酸脫氫酶(LDH)活性差異不顯著(P0.05)。免疫球蛋白IgG水平顯著降低(P0.05);白細胞介素-2(IL-2)、白細胞介素-8(IL-8)和干擾素-γ(IFN-γ)水平有下降趨勢,但差異不顯著(P0.05)。不同濃度的NEFA均抑制了原代培養(yǎng)奶牛肝細胞中抗氧化指標(TAC、GSH-PX、SOD)的活性及mRNA表達水平,提高了丙二醛(MDA)的含量,并且呈現(xiàn)劑量依賴性。綜上所述,亞臨床酮病可造成奶牛肝功能指標發(fā)生變化;導致機體出現(xiàn)免疫抑制現(xiàn)象;體內和體外試驗均證明了亞臨床酮病可造成奶牛出現(xiàn)氧化應激。
[Abstract]:Cow ketosis is divided into clinical type and subclinical type. The characteristic of clinical ketosis is that the content of ketone body in blood, urine or milk of cow is obviously increased, and the clinical manifestation is loss of appetite and weight loss. The milk production decreased obviously, while subclinical ketosis did not show obvious clinical symptoms, but the ketone body content in blood, urine or milk exceeded the normal level. At present, there have been more reports of clinical ketosis at home and abroad. In this study, 21 subclinical ketosis cows with similar age, birth order, lactation volume and lactation days were selected and divided into two groups: BHBA2.2 mmol 路L ~ (-1)) and non-ketosis cows (BHBA 1.2 mmol 路L ~ (-1)). Collection of anticoagulant blood through tail vein for routine blood test; collection of non-anticoagulant blood for oxidation and antioxidant state, liver function and immune indexes; collection of fresh milk samples for milk component detection. At the same time, Primary hepatocytes of dairy cattle were cultured in vitro and supplemented with different concentrations of non-esterified fatty acids (NEFAA) for 1224 and 36 hours respectively. The content of oxidative oxygen resistance in hepatocytes was detected by Elisa and real-time fluorescence quantitative PCRQRT-PCRRmethod. Activity and mRNA level. The results showed that compared with non-ketosis cows, In subclinical ketosis dairy cows, the total number of white blood cells (WBCU) and the total number of lymphocytes (LYM) decreased significantly (P 0.05), and the mean platelet volume (MPV) decreased significantly (P 0.01), while the number of intermediate cells, neutrophils, erythrocyte count, platelet count, platelet count and platelet compaction were significantly decreased. There was no significant difference between PCT and PDM (P 0.05). Milk fat ratio (MFF) increased significantly (P 0.05), milk protein ratio (MPN) and whole milk solid ratio (TSS) decreased significantly (P 0.01), but lactose ratio (L) was not significantly different (P 0.05). Total antioxidant capacity (TAC) was significantly lower than that of wheat (P 0.05), and the total antioxidant capacity (TAC) was significantly lower than that of whole milk (P 0.05). The activity of glutathione peroxidase (GSH-Px) decreased significantly, the content of malondialdehyde (MDAs) increased significantly, and the activity of superoxide dismutase (SOD) decreased. The activity of alanine aminotransferase (alanine aminotransferase) increased significantly (P 0.05); the content of total protein (TP) decreased P0.05; the activity of alkaline phosphatase (AKP), aspartate aminotransferase (AST), and the activity of aspartate aminotransferase (AST). The contents of total bilirubin (TBX), low density cholesterol (LDL-c), total cholesterol (TCHG), high density cholesterol (HDL-cc) and albumin (Alb) contents were significantly increased (P 0.01); the activity of lactate dehydrogenase (LDH) was not significantly different from that of low fat density cholesterol (LDHs). The level of immunoglobulin (IgG) was significant. The levels of IL-2, IL-8, IL-8 and IFN- 緯) decreased. However, the difference was not significant (P 0.05). Different concentrations of NEFA inhibited the activity and expression of mRNA in primary cultured dairy cow hepatocytes, and increased the content of malondialdehyde (MDA) in a dose-dependent manner. Subclinical ketosis can cause changes in liver function indexes of dairy cows; lead to immunosuppressive phenomenon; in vivo and in vitro tests have proved that subclinical ketosis can cause oxidative stress in cows.
【學位授予單位】：安徽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.23

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