發(fā)布時間：2018-03-10 07:52

  本文選題：單色光　切入點(diǎn)：雞　出處：《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：前期研究發(fā)現(xiàn)不同波長的單色光能夠影響雞的生長發(fā)育和繁殖性能。下丘腦GnRH-Ⅰ和GHRH是調(diào)節(jié)雞生殖和生長的重要因子,但是光色信息對雞下丘腦GnRH-Ⅰ和GHRH分泌的影響及其作用途徑尚不清楚。本研究選擇剛出殼的雄性AA肉雞分別飼養(yǎng)于LED燈照射下的白光(400～760 nm)、紅光(660 nm)、綠光(560 nm)和藍(lán)光(480 nm)下,第3天進(jìn)行松果體摘除手術(shù)和假手術(shù)處理,14日齡取下丘腦。探索不同波長的單色光對雞下丘腦GnRH-Ⅰ和GHRH表達(dá)的影響及其作用途徑。主要研究結(jié)果如下:1.褪黑激素在單色光影響雞下丘腦GnRH-Ⅰ表達(dá)中的作用免疫組化反應(yīng)發(fā)現(xiàn)在雞下丘腦的視前區(qū)、視前室周核、隔內(nèi)側(cè)核、隔外側(cè)核和皮質(zhì)聯(lián)合床核有GnRH-Ⅰ的免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元,其中以皮質(zhì)聯(lián)合床核的陽性神經(jīng)元最多。與白光和紅光相比,單色綠光顯著降低雞下丘腦GnRH-ⅠmRNA、蛋白水平、皮質(zhì)聯(lián)合床核中陽性神經(jīng)元面積百分比和平均光密度,且分別降低了 13.18%-34.46%(P=0.013-0.046)和19.59%-39.08%(P=0.002-0.018)。另外,與GnRH-Ⅰ的表達(dá)相似,綠光顯著降低雞血漿睪酮水平,且分別比白光、紅光和藍(lán)光降低了 19.04%(P=0.009)、21.66%(P=0.003)和 10.41%(P=0.183)。松果體摘除后,隨著褪黑激素水平的下降,顯著提高了雞下丘腦GnRH-Ⅰ的表達(dá)和血漿睪酮水平,且四個光色組之間比較變?yōu)闊o顯著差異(P=0.185-0.986)。同時體外試驗(yàn)表明褪黑激素(250 pg/mL)能顯著降低下丘腦GnRH-ⅠmRNA的表達(dá)水平。這些試驗(yàn)結(jié)果表明褪黑激素介導(dǎo)單色光對雞下丘腦GnRH-Ⅰ表達(dá)的影響。2.褪黑激素在單色光影響雞下丘腦GnIH表達(dá)中的作用GnIH免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元主要出現(xiàn)在雞下丘腦的室旁核。單色綠光顯著提高了雞下丘腦GnIH mRNA、蛋白、陽性神經(jīng)元面積百分比和平均光密度,分別比白光、紅光和藍(lán)光提高了19.62%-34.46%(P=0.013-0.046)、23.12%-39.08%(P=0.006-0.018)和 9.81%-17.33%(P=0.006-0.400)。當(dāng)摘除松果體后,與假手術(shù)組相比,顯著降低了 GnIH/mRNA和蛋白表達(dá)水平;白光、紅光、綠光和藍(lán)光分別降低了 22.05%-24.25%(P=0.001-0.005)、22.58%-25.04%(P=0.005-0.007)、26.39%-26.94%(P=0.000)和 24.55%-24.99%(P=0.001),且松果體摘除組四種光色之間沒有顯著差異。體外試驗(yàn)表明褪黑激素(250Pg/mL)能顯著提高下丘腦GnIH的表達(dá)水平。這些試驗(yàn)結(jié)果表明褪黑激素介導(dǎo)單色光對雞下丘腦GnIH表達(dá)的影響。3.褪黑激素受體介導(dǎo)單色光影響雞下丘腦GnIH的表達(dá)褪黑激素受體Mel1a分布在雞下丘腦的視前區(qū)、視前室周核和視交叉上核,褪黑激素受體Mel1b分布在雞下丘腦的視前區(qū)和視交叉上核,褪黑激素受體Mel1c分布在雞下丘腦的室旁核。單色綠光提高了雞下丘腦褪黑激素受體Mel1a、Mel1b和Mel1c的mRNA、蛋白表達(dá)水平和血漿褪黑激素水平,分別比白光、紅光和藍(lán)光提高了 10.72%-31.28%(P=0.000-0.008)、9.18%-36.91%(P=0.000-0.022)和 7.58%-25.25%(P=0.001-0.170)。此外,血漿褪黑激素水平與下丘腦中GnIH蛋白表達(dá)呈正相關(guān)。體外試驗(yàn)顯示褪黑激素通過Mel1c影響下丘腦GnIH的表達(dá)。同時熒光雙標(biāo)染色發(fā)現(xiàn)雞下丘腦室旁核GnIH神經(jīng)元有Mel1c的共表達(dá)。這些試驗(yàn)結(jié)果表明褪黑激素受體Mel1c參與褪黑激素介導(dǎo)的單色光影響雞下丘腦GnIH的表達(dá)。4.GnIH在褪黑激素介導(dǎo)單色光影響雞下丘腦GnRH-Ⅰ表達(dá)中的作用單色綠光顯著增強(qiáng)雞下丘腦GnIHR的mRNA和蛋白表達(dá)水平,分別比白光、紅光和藍(lán)光提高了 21.61%-22.83%(P=0.005-0.032)、26.69%-26.79%(P=0.002-0.020)和 8.62%-12.12%(P=0.075-0.296)。另外,松果體摘除后顯著降低了下丘腦GnIHR的表達(dá)水平,且四種光色間無顯著差異。血漿褪黑激素濃度與下丘腦GnRH-Ⅰ蛋白水平呈負(fù)相關(guān),與下丘腦GnIHR蛋白水平呈正相關(guān)。下丘腦GnIHR蛋白水平與下丘腦GnRH-Ⅰ蛋白水平呈負(fù)相關(guān)。體外試驗(yàn)說明褪黑激素通過Mel1c受體抑制下丘腦組織GnRH-Ⅰ的表達(dá)。同時熒光雙標(biāo)染色發(fā)現(xiàn)GnRH-Ⅰ神經(jīng)元上存在GnIH陽性纖維的軸突末端,GnRH-Ⅰ陽性神經(jīng)元有GnIHR的共表達(dá)。這些試驗(yàn)結(jié)果表明GnIH參與褪黑激素受體Mel1c途徑介導(dǎo)單色光影響雞下丘腦GnRH-Ⅰ的表達(dá)。5.褪黑激素在單色光影響雞下丘腦GHRH表達(dá)中的作用免疫組織化學(xué)反應(yīng)發(fā)現(xiàn)在雞下丘腦的漏斗核出現(xiàn)了 GHRH的免疫反應(yīng)陽性神經(jīng)元。單色綠光顯著提高了雞下丘腦GHRH的mRNA、蛋白表達(dá)水平和血漿GH水平,分別比白光、紅光和藍(lán)光提高了 9.10%-21.75%(P=0.010-0.050)、9.19%-34.51%(P=0.002-0.013)和 6.76%-8.71%(P=0.051-0.473)。血漿褪黑激素水平與下丘腦GHRH蛋白表達(dá)和血漿GH水平呈正相關(guān)。另外,松摘后下丘腦GHRH蛋白表達(dá)和血漿GH水平顯著降低,且松果體摘除后四種光色之間無顯著差異。這些試驗(yàn)結(jié)果表明褪黑激素介導(dǎo)單色光影響雞GHRH的表達(dá)和GH的分泌。結(jié)論:綠光直接作用于雞松果體影響褪黑激素的分泌,褪黑激素通過其受體Mel1c作用于雞下丘腦的GnIH神經(jīng)元,提高了下丘腦GnIH的表達(dá)水平,同時GnIH通過其神經(jīng)纖維或受體抑制下丘腦GnRH-Ⅰ的表達(dá),降低血漿睪酮水平。另一方面綠光通過褪黑激素影響雞下丘腦GHRH的表達(dá)水平,從而提高血漿GH水平。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S831

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1592416