發(fā)布時(shí)間：2020-11-19 14:09

　　 斑點(diǎn)熱群立克次體（spotted fever group Rickttsia，SFGR）系引起斑點(diǎn) 熱的病原體，是立克次體屬中最復(fù)雜的一群�！禕ergey's細(xì)菌學(xué)鑒定手冊(cè)》 第九版上收錄了8種斑點(diǎn)熱群立克次體，其中有5種對(duì)人具有致病性。 該立克次體與節(jié)肢動(dòng)物關(guān)系密切，世界各地都有發(fā)生。近年來(lái)，由于人 們社會(huì)活動(dòng)的增加、全球化貿(mào)易活動(dòng)的進(jìn)行、旅游業(yè)的發(fā)展等，導(dǎo)致斑 點(diǎn)熱發(fā)病率上升、新的病原體出現(xiàn)，原有疾病的情況及分布也發(fā)生了變 化。世界各地又陸續(xù)分離到10余種致病或不致病的SFGR，它們都被認(rèn) 為是斑點(diǎn)熱群新種，其中包括我國(guó)分離的黑龍江立克次體及內(nèi)蒙古立克 次體。我國(guó)自1962年從黑龍江東方田鼠分離到第一株斑點(diǎn)熱群立克次體 （虎林84）以來(lái)，已經(jīng)從不同地區(qū)的媒介蜱和嚙齒動(dòng)物以及斑點(diǎn)熱患者 中分離到多株斑點(diǎn)熱群立克次體，但多在北方地區(qū)，故一直以來(lái)人們認(rèn) 為南方?jīng)]有斑點(diǎn)熱。1986年日本內(nèi)田孝宏在日本四國(guó)地區(qū)分離出一株日 本斑點(diǎn)熱立克次體，為斑點(diǎn)熱群立克次體的一個(gè)新種，而海南島的自然 景觀與四國(guó)相似，其生態(tài)環(huán)境都非常有利于媒介昆蟲的繁殖，是否也有 日本斑點(diǎn)熱立克次體（R.japonica）或其他立克次體感染的存在？為探明 海南島立克次體，尤其是斑點(diǎn)熱立克次體的感染情況，我們于1990年及 1993年分別在海南島各地采樣開展立克次體血清學(xué)和病原學(xué)的調(diào)查研 究。1990年自海南島東南部（保亭縣）、中南部（通什市）和北部（海 口市）采取了 642份當(dāng)?shù)蒯t(yī)院診斷為非立克次體病的患者血清及 37份疑 似立克次體感染的患者血清，應(yīng)用微量間接免疫熒光法帥 FA）進(jìn)行了 人群血清日本斑點(diǎn)熱門．japonica人 鼠型斑疹傷寒立克次體皈．tyPhi） 抗體調(diào)查。調(diào)查結(jié)果，只有2份血清含有高滴度日本立克次體抗體（滴 度 31：160人提示海南島日本斑點(diǎn)熱立克次體感染罕見。但是，從海南 島東南部和中南部地區(qū)（五指山周邊區(qū)）的血清學(xué)調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在斑 疹傷寒 IgG抗體陽(yáng)性的人群血清中，40％有斑疹傷寒立克次體 lgM抗體 （滴度 31：80人 在當(dāng)?shù)匾伤屏⒖舜误w感染的患者血清中，約半數(shù)含有 高滴度斑疹傷寒立克次體 IgMI gG抗體（滴度均＞ 1：16 0人表明在門診 患者中有漏診的斑疹傷寒現(xiàn)癥病人或新近感染過斑疹傷寒的患者，在疑 似克次伸感染的患者中斑疹傷寒的感染相當(dāng)嚴(yán)重。 基于以上情況，我們又于1993年自海南島的東、南、西、北、中部 選點(diǎn)采集了561份各醫(yī)院診斷為非立克次體病的患者血清標(biāo)本，應(yīng)用 mIM進(jìn)行了斑點(diǎn)熱、流行性斑疹傷寒和恙蟲病立克次體抗體調(diào)查。調(diào)查 結(jié)果，血清 IgG 抗體的陽(yáng)性率分別為：斑點(diǎn)熱立克次體 30．830（164／532），流行性斑疹傷寒立克次體 18．770（101／538），恙蟲病 立克次體13．55叭76巧61入結(jié)果表明海南島有多種立克次體�。ò唿c(diǎn)熱、 斑疹傷寒、恙蟲病）存在，其地理分布較廣，主要在山區(qū)和丘陵地帶（瓊 中縣、大豐農(nóng)場(chǎng)、循州市、通什市、保亭縣等五指山周邊區(qū)人平原和濱 海城市（海口市、三亞市）較少。本調(diào)查首次發(fā)現(xiàn)海南島有斑點(diǎn)熱感染 存在，修正了過去認(rèn)為我國(guó)南方?jīng)]有斑點(diǎn)熱的觀點(diǎn)。 斑點(diǎn)熱群立克次體如同其他立克次體一樣，是專性話細(xì)胞內(nèi)寄生的微 生物，通常人們用動(dòng)物（豚鼠）和雞胚進(jìn)行立克次體的分離及傳代培養(yǎng)， 且標(biāo)本多來(lái)自媒介昆蟲或動(dòng)物。我們根據(jù)國(guó)外的相關(guān)報(bào)道，采用L929（鼠 纖維母細(xì)胞株）和V盯。H洲綠猴腎上皮細(xì)胞株）單層細(xì)胞培養(yǎng)法直接 從患者血液中分離立克次體，這在國(guó)內(nèi)尚屬首次。30份疑似立克次體病 或不明熱患者全血或血塊標(biāo)本中，先后共分離出 19株立克次體，經(jīng) ml FA、 多聚酶鏈反應(yīng)uCR）鑒定 11株是斑點(diǎn)熱群立克次體，4株是斑疹傷寒 立克次體，4株是恙蟲病立克次體。 PCR由于能在體外將特異性DNA序列進(jìn)行高效擴(kuò)增，為病原體的分型 2 提供了有力手段，目前已成為新的分類鑒定和診斷SFGR的方法。因PCR 法非常敏感，標(biāo)本中有2個(gè)個(gè)立克次體即可檢出，故可用于SFGR的快速、 早期診斷。 分于量為190kD蛋白基因是斑點(diǎn)熱群立克次體特有的基因＊ 年， Regnery首次根據(jù)立氏立克次體分子量為190kD蛋臼基因b呷A）設(shè)計(jì) 的 Rr190．70p不 Rrl90＊02n一對(duì)引物用于擴(kuò)增 SFGR o呷A的 ORF起始 部位 532 hp大小的基因片段，繼之用限制性內(nèi)切酶長(zhǎng)度多肽性圖譜法 oCR／RFLP）區(qū)別SFGR。由于該法具有快速。簡(jiǎn)便、特異等優(yōu)點(diǎn)，目 前已被廣泛用于SFGR新種的鑒定。我們對(duì)20例疑似立克次體感染或不 明熱患者的血液標(biāo)本經(jīng) L929細(xì)胞分離培養(yǎng)，共分離出 12株立克次體， 將這 12株立克次體的分離培養(yǎng)物用 Rr190．70p和 Rr190．602n這一對(duì)引 物進(jìn)行 PCR檢測(cè)，結(jié)果檢出 7株為斑點(diǎn)熱群立克次體。對(duì) 10例疑似立 克次體感染或不明熱患者的血液標(biāo)本先用立克次體屬（恙蟲病立克次體 除外）PCR引物對(duì)RpCS877p。RpCS1258n檢壩，結(jié)果7例卜性。將這 7例陽(yáng)性血液標(biāo)本接種Vero細(xì)胞分離培養(yǎng)，均分離出立克次體。這7株 立克次體
【學(xué)位單位】：江西醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2001
【中圖分類】：R376
【文章目錄】：
一、 中文摘要
二、 英文摘要
三、 前言
四、 材料與方法
五、 結(jié)果
六、 討論
七、 小結(jié)
八、 致謝
九、 參考文獻(xiàn)
十、 個(gè)人簡(jiǎn)歷
十一、 綜述

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本文編號(hào)：2890086