新疆出血熱(Xinjiang hemorrhagic fever,XHF)是由新疆出血熱病毒引起的、硬蜱傳播的自然疫源性傳染病。本研究從不同感染途徑和攻毒后不同時間點(diǎn)兩個方面,通過光鏡、電鏡、免疫組化、原位雜交和RT-PCR等多種技術(shù)手段,觀察新疆出血熱病毒感染乳鼠后引起的病理學(xué)變化,建立病理學(xué)診斷方法,初步探討新疆出血熱的發(fā)病機(jī)理。 結(jié)果:1、乳鼠經(jīng)皮下和腹腔兩種途徑接種XHF病毒后均出現(xiàn)肝細(xì)胞的變性、壞死等病理學(xué)改變,肝細(xì)胞的感染與損傷不伴有明顯的炎性反應(yīng);部分乳鼠的腦組織亦出現(xiàn)出血改變。2、免疫組化可在肝細(xì)胞胞漿查見病毒抗原,原位雜交可在肝細(xì)胞胞漿查見病毒核酸,透射電子顯微鏡下可在肝細(xì)胞胞漿內(nèi)查見病毒粒子,RT-PCR可在心、肝、脾、腎以及腦組織內(nèi)檢測到病毒核酸。3、通過感染后不同時間的動態(tài)病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),肝細(xì)胞的損傷于攻毒后4到7天逐漸加重,以第6、7兩天病變最為典型;肝組織內(nèi)病毒抗原或核酸的陽性信號多與肝細(xì)胞的變性、壞死改變同時出現(xiàn)。 結(jié)論:1、乳鼠對新疆出血熱病毒敏感,經(jīng)皮下與腹腔接種病毒均可發(fā)病。2、肝臟是新疆出血熱病毒感染乳鼠的主要靶器官,主要病變?yōu)楦螌?shí)質(zhì)細(xì)胞的變性、壞死。3、免疫組化、原位雜交、透射電子顯微鏡技術(shù)與RT-PCR技術(shù)相結(jié)合可對組織中的新疆出血熱病毒進(jìn)行檢測。4、經(jīng)皮下與腹腔注射病毒懸液所引起的組織病理學(xué)變化、病變進(jìn)展、轉(zhuǎn)歸以及病毒分布大致相同,二者均可作為臨床新疆出血熱病毒感染的模擬途徑。5、感染后不同時間的動態(tài)病理學(xué)觀察結(jié)果提示,肝細(xì)胞的損傷可能是病毒的致細(xì)胞病變效應(yīng)所直接介導(dǎo)的。
【學(xué)位單位】：中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2005
【中圖分類】：R363
【部分圖文】：

2.5反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)采用特異性引物和Rl’-PCR方法可從所檢測實(shí)驗(yàn)組乳鼠肝臟中擴(kuò)增出與預(yù)期大小相一致(260Pb)的目的基因條帶(圖37);BALST結(jié)果表明其與國內(nèi)分離株同源性均較高(95%以上)，與唐青等人提交于GneeBank的新疆出血熱病毒

檢側(cè)其它器官發(fā)現(xiàn)除肝臟外，腦組織與腎組織內(nèi)亦能擴(kuò)增出較為明顯的目的基因條帶，心臟和脾臟內(nèi)只能擴(kuò)增出亮度很低的目的基因條帶，而肺組織未見目的基因條帶(圖38)。對照乳鼠各器宮均未見上述條帶。2345500~250一100~圖37不同時間點(diǎn)及不同攻毒途徑乳鼠肝臟R-TPCR結(jié)果，M.DNAM田火er，1.皮下攻毒6d;2.腹腔攻毒d6;3.皮下攻毒d7;4.腹腔攻毒d7;5.正常對照組表2Rl’-pCR產(chǎn)物與己知CCHF病毒核昔酸序列同源性比較GenBank登錄號毒株來源同源性(%)戶J010649840299%Chnai︸︸恤ChnaiAF354296AF362080AY029157U7567678037502488166H-Y1398%98%AF481805HU896697%AJ0106486601

皮下攻毒第d7乳鼠肝臟明顯腫大(左圖)，右圖為對照組乳鼠d7肝臟
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 唐青,高佃平,趙秀芹,韓磊,杭長壽;5株新疆出血熱病毒分子流行病學(xué)研究[J];中華流行病學(xué)雜志;2002年06期

本文編號：2883251