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  本文關(guān)鍵詞：納米級(jí)分子靶向超聲造影劑的制備及其對(duì)腫瘤靶向顯影的初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《第四軍醫(yī)大學(xué)》 2015年

納米級(jí)分子靶向超聲造影劑的制備及其對(duì)腫瘤靶向顯影的初步研究

楊恒麗  

【摘要】：目的制備純粒徑的納米微泡,將帶有HER2分子配體的Affibody與納米微泡偶聯(lián),合成對(duì)乳腺癌HER2分子具有特異靶向性的納米級(jí)微泡超聲造影劑“納米微泡-Affibody”,并通過(guò)體外、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其對(duì)乳腺癌HER2分子的特異靶向性,進(jìn)一步通過(guò)分子靶向超聲造影無(wú)創(chuàng)估測(cè)HER2分子在乳腺癌中的表達(dá)水平。另外探討制備攜載有IR780的多功能靶向納米微泡,為腫瘤的分子靶向超聲造影診斷和治療提供新的思路。方法1.將14mg DPPC和DSPE-PEG2000(biotin)按一定比例混合置于25m l旋蒸瓶成膜,聯(lián)合機(jī)械振蕩法,最終制備出純粒徑的納米微泡。使用熒光顯微鏡、掃描電鏡對(duì)納米微泡的形態(tài)進(jìn)行觀察,粒度/電位分析儀進(jìn)一步檢測(cè)其粒徑分布情況和表面電位,MTT法檢測(cè)納米微泡對(duì)細(xì)胞的毒性反應(yīng)。2.利用“生物素-親和素”法,將專(zhuān)門(mén)靶向乳腺癌HER2分子的微小蛋白“抗-HER2 Affibody”偶聯(lián)于納米微泡表面,連接好的“納米微泡-Affibody”分別與多種HER2(+)及HER2(-)腫瘤細(xì)胞共孵育,倒置熒光顯微鏡觀察其體外靶向性;流式細(xì)胞儀分析“納米微泡-Affibody”與HER2(+)乳腺癌細(xì)胞的靶向結(jié)合率情況;粒度/電位分析儀分析“納米微泡-Affibody”在模擬體內(nèi)溫度下的穩(wěn)定性情況;自制橡膠手套裝置檢測(cè)“納米微泡-Affibody”在體外的超聲造影成像效果。3.建立荷瘤裸鼠模型,經(jīng)尾靜脈注射“納米微泡-Affibody”,超聲診斷儀觀察其分子靶向超聲增強(qiáng)顯影效果。小動(dòng)物熒光成像系統(tǒng)觀察“納米微泡-Affibody”在體內(nèi)腫瘤及各重要臟器的分布代謝情況。腫瘤病理切片激光共聚焦顯微鏡觀察“納米微泡-Affibody”在腫瘤中的靶向分布情況。4.在納米微泡制作過(guò)程中,將微量的IR780混合入DPPC和DSPE-PEG2000(biotin)中成膜,直接制備出多功能納米微泡。激光共聚焦電子顯微鏡、透射電鏡及粒度/電位分析儀對(duì)其各項(xiàng)特性進(jìn)行檢測(cè)。體外培養(yǎng)多種腫瘤細(xì)胞,以大鼠心肌細(xì)胞作為陰性對(duì)照,體外觀察該多功能納米微泡對(duì)腫瘤細(xì)胞的特異靶向性及體外超聲造影成像效果。結(jié)果1.通過(guò)控制脂質(zhì)膜厚度能制備出純粒徑納米微泡:478.2±29.7 nm,其在掃描電鏡下為均勻分散分布的納米級(jí)空洞,穩(wěn)定性良好,對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性。2.合成”納米微泡-Affibody“分子靶向超聲造影劑。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)其對(duì)HER2(+)腫瘤細(xì)胞均有特異靶向性,對(duì)HER2(-)腫瘤細(xì)胞無(wú)靶向性,同時(shí)也證實(shí)了納米微泡對(duì)HER2(+)腫瘤細(xì)胞無(wú)靶向性。3.體內(nèi)超聲造影結(jié)果表明,“納米微泡-Affibody”雖然造影持續(xù)時(shí)間較短,但達(dá)峰時(shí)間快,且增強(qiáng)顯影強(qiáng)度明顯高于聲諾維和納米微泡(104.539±6.42 d B vs.79.451±8.05 d B,P0.05;104.539±6.42 d B vs.70.753±10.33 d B,P0.05)。小動(dòng)物熒光成像系統(tǒng)證實(shí),“納米微泡-Affibody”組的腫瘤在3min時(shí)熒光攝取率(4.79e07±210797.3)明顯高于納米微泡組(4.27e07±78270.26)(P0.05),到30min時(shí)熒光攝取率雖較前略有下降,卻依然高于納米微泡組(5.32e07±347809.7 vs.2.13e07±122119.9,P0.05)。腫瘤病理切片顯示,“納米微泡-Affibody”能更多地穿過(guò)腫瘤血管壁到達(dá)組織間隙和腫瘤細(xì)胞表面。4.新合成的多功能納米微泡,粒徑分布大小約為:552.7±55.0 nm,生物相容性好,對(duì)人乳腺癌細(xì)胞BT-474和MDA-MB-231都具有特異靶向性,而對(duì)大鼠心肌細(xì)胞無(wú)靶向性。結(jié)論通過(guò)控制磷脂膜的厚度,可以直接制備出純納米粒徑的微泡,從而避免了從微/納泡混懸液分離納米微泡的繁瑣步驟。新合成的分子靶向超聲造影劑“納米微泡-Affibody”,能在體內(nèi)、外特異性靶向HER2(+)乳腺癌腫瘤及細(xì)胞�！凹{米微泡-Affibod y”在體內(nèi)形成的分子靶向顯影為無(wú)創(chuàng)地判斷HER2分子在乳腺癌中的表達(dá)狀態(tài)提供了依據(jù)。同時(shí),成功制備了具有近紅外熒光成像、超聲造影成像及腫瘤靶向性的多功能納米微泡,更為腫瘤的分子靶向超聲造影提供了新的思路。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R445.1;R737.9;R730.44
【目錄】：

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5 王占科;;超聲微泡及其在分子影像中應(yīng)用[J];功能與分子醫(yī)學(xué)影像學(xué)(電子版);2013年03期

6 徐猛;李延鋒;楊本強(qiáng);段陽(yáng);;血腦屏障開(kāi)放及其灌注成像的影像評(píng)估[J];中國(guó)CT和MRI雜志;2014年05期

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1 郝長(zhǎng)春;王欣敏;朱久玲;楊靜;何光曉;孫潤(rùn)廣;;超聲控釋載藥脂質(zhì)體影響因素[A];2013年全國(guó)功率超聲學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

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1 胡成旭;乳腺疾病的拉曼光譜檢測(cè)及研究[D];吉林大學(xué);2013年

2 李民;基于AIE現(xiàn)象發(fā)光機(jī)理的納米熒光探針的設(shè)計(jì)及腫瘤細(xì)胞靶向成像的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

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6 崔金輝;新型納米基因載體和蛋白質(zhì)檢測(cè)探針的構(gòu)建、表征與應(yīng)用[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

7 李卓;熱消融及超聲介導(dǎo)長(zhǎng)春瑞濱長(zhǎng)循環(huán)熱敏脂質(zhì)體靶向釋放增強(qiáng)治療兔VX2腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

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2 潘弟儀;超聲造影劑—全氟丙烷脂質(zhì)微泡的制備與評(píng)價(jià)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

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6 喬璐;超聲聯(lián)合熒光微泡對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的釋放作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

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9 許婷婷;實(shí)時(shí)三維超聲激勵(lì)瘤內(nèi)注射微泡增強(qiáng)VX2移植瘤化療[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

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2 程文,張青萍;超聲造影劑在治療方面應(yīng)用研究的進(jìn)展[J];中國(guó)超聲醫(yī)學(xué)雜志;2001年07期

3 左松,劉政;新型超聲造影劑和成像方法在肝臟疾病中的應(yīng)用[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2002年01期

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5 朱彩霞,陳國(guó)琴;胃窗超聲造影劑臨床應(yīng)用體會(huì)[J];上海醫(yī)學(xué)影像;2003年04期

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9 張萍,高云華,劉平,譚開(kāi)彬,劉政;超聲造影劑對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響[J];重慶醫(yī)學(xué);2005年10期

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1 錢(qián)曉芹;超聲輻照載藥有序介孔有機(jī)硅超聲造影劑靶向治療腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 楊恒麗;納米級(jí)分子靶向超聲造影劑的制備及其對(duì)腫瘤靶向顯影的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 景香香;靶向超聲造影劑無(wú)創(chuàng)評(píng)價(jià)組織缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

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5 譚開(kāi)彬;長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)超聲造影劑“脂氟顯”的制備優(yōu)化及評(píng)價(jià)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

6 李?yuàn)W;多功能超聲造影劑的制備及顯像實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

7 張超;超聲造影劑對(duì)大鼠局灶性肝損傷的評(píng)價(jià)及對(duì)基因轉(zhuǎn)染的作用[D];華中科技大學(xué);2005年

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1 邱偉;自制胃腸超聲造影劑聯(lián)合靜脈超聲造影用于對(duì)胃癌的診斷及T分期的臨床研究[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

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3 李倩;包膜微氣泡非線性流變特性的建模研究[D];南京大學(xué);2013年

4 李靜;超聲造影劑的體內(nèi)外評(píng)價(jià)研究[D];華中科技大學(xué);2013年

5 黃偉欽;超聲造影劑在超聲輻射下對(duì)兔子睪丸生精細(xì)胞的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2009年

6 陳松;納米液態(tài)氟碳微球超聲造影劑的制備及體外尋靶實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

7 柯亨特;新型超聲造影劑的制備和應(yīng)用研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2009年

8 賓建國(guó);兩親性殼聚糖高分子膠束制備超聲造影劑的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

9 李曉東;自制超聲造影劑“表活顯”動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及化學(xué)修飾研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

10 紀(jì)剛劍;新型多功能型載藥納米超聲造影劑的研制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

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