發(fā)布時間：2020-12-21 13:38

　　運(yùn)動性心臟肥大是運(yùn)動員心臟的主要形態(tài)變化,左右心室均可發(fā)生肥大,但通常以左心室的肥大為主,其肥大程度與運(yùn)動方式、強(qiáng)度和持續(xù)時間有關(guān)。運(yùn)動員心臟的機(jī)能改變通常表現(xiàn)為：靜息心動徐緩、每搏輸出量增加、心力儲備增大。運(yùn)動性心臟肥大組織結(jié)構(gòu)的重塑主要表現(xiàn)為心肌纖維增粗肥大,心臟毛細(xì)血管新生,這構(gòu)成了運(yùn)動性心臟收縮性和有氧代謝功能的增強(qiáng)。運(yùn)動性心臟超微結(jié)構(gòu)的重塑主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞內(nèi)高爾基復(fù)合體及其功能結(jié)構(gòu)增多,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多,心房特殊顆粒增多且功能活性增強(qiáng),線粒體及其功能結(jié)構(gòu)多,肌原纖維增多,肌質(zhì)網(wǎng)和橫管系統(tǒng)發(fā)達(dá),核糖體和糖原增多。超微結(jié)構(gòu)的重塑性改變構(gòu)成了運(yùn)動性心臟內(nèi)分泌功能變化,心肌有氧氧化和能量產(chǎn)生增多,心肌收縮能力增強(qiáng),心力儲備增強(qiáng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。但是運(yùn)動性心臟肥大究竟如何形成,其發(fā)生的分子信號機(jī)制和調(diào)節(jié)機(jī)制是什么,相關(guān)信號通路中各信號分子的表達(dá)究竟如何變化,目前尚有待研究。miRNA是一種內(nèi)源性、單鏈、由18-25個單核苷酸組成的非編碼小RNA。專家預(yù)測在人類基因組中,miRNA基因不少于1000條,同時miRNA能夠?qū)Τ�過三分之一的人類蛋白編碼基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。miRNA與多種疾病及發(fā)育... 

【文章來源】：揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
目錄
符號說明
前言綜述
    1. 運(yùn)動性心臟肥大的運(yùn)動生理學(xué)研究進(jìn)展
        1.1 運(yùn)動引起心臟左室肥大的生理學(xué)研究進(jìn)展
            1.1.1 向心性心臟肥大
            1.1.2 離心性心臟肥大
            1.1.3 肥大心臟的功能變化
        1.2 運(yùn)動引起心臟右室肥大的生理學(xué)研究進(jìn)展
        1.3 運(yùn)動引起左心房肥大的生理學(xué)研究進(jìn)展
    2. 心臟肥大機(jī)制的究進(jìn)展
        2.1 內(nèi)分泌激素在心臟肥大中作用的研究進(jìn)展
            2.1.1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
            2.1.2 兒茶酚胺對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
            2.1.3 心鈉素對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
            2.1.4 心肌內(nèi)皮素對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
            2.1.5 胰島素樣生長因子對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
            2.1.6 血管內(nèi)皮生長因子對心臟肥大的調(diào)節(jié)作用
        2.2 G蛋白偶聯(lián)受體在心臟肥大中作用的研究進(jìn)展
        2.3 心臟肥大相關(guān)信號通路的研究進(jìn)展
            2.3.1 ERK信號通路在運(yùn)動性心臟肥大中的作用
            2.3.2 PI3K/AKT/mTOR信號通路在運(yùn)動性心臟肥大中的作用
    3. miRNA參與心臟肥大調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展
    4. 心臟肥大大鼠模型
    5. 展望
實(shí)驗(yàn)部分
    1. 引言
    2. 材料與方法
        2.1 試劑與儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 動物飼養(yǎng)與分組
        2.3 運(yùn)動訓(xùn)練方案
        2.4 體重測定
        2.5 血壓和心率測定
        2.6 樣本采集
        2.7 蘇木素伊紅染色（HE染色）
            2.7.1 蘇木素染液配制
            2.7.2 伊紅染液配制
            2.7.3 冰凍切片機(jī)切片
            2.7.4 HE染色步驟
        2.8 心肌組織HE染色圖片鏡下觀察及圖像分析
        2.9 心肌組織總RNA的提取
            2.9.1 準(zhǔn)備工作
            2.9.2 提取總RNA
            2.9.3 RNA質(zhì)量和濃度檢測
        2.10 miRNA芯片
            2.10.1 RNA標(biāo)記
            2.10.2 芯片雜交
            2.10.3 芯片結(jié)果分析
        2.11 使用microRNA TaqMan Assay試劑盒檢測miRNA的表達(dá)量
            2.11.1 miRNA反轉(zhuǎn)錄
            2.11.2 miRNA實(shí)時熒光定量PCR
        2.12 實(shí)時熒光定量PCR測定目的基因mRNA的表達(dá)量
            2.12.1 引物設(shè)計
            2.12.2 實(shí)時熒光定量反應(yīng)體系
            2.12.3 實(shí)時熒光定量反應(yīng)條件
            2.12.4 引物擴(kuò)增效率的計算
            2.12.5 實(shí)時熒光定量結(jié)果的計算
        2.13 蛋白印跡法檢測
            2.13.1 提取心室組織蛋白
            2.13.2 考馬斯亮藍(lán)法檢測蛋白含量
            2.13.3 制膠
            2.13.4 電泳
            2.13.5 轉(zhuǎn)膜
            2.13.6 免疫雜交與顯色
        2.14 統(tǒng)計與分析
    3. 結(jié)果
        3.1 大鼠體重變化
        3.2 8周游泳運(yùn)動對大鼠血壓和心率的影響
        3.3 提取總RNA的純度與完整性
        3.4 引物擴(kuò)增效率的檢測
        3.5 熒光定量PCR的溶解曲線
        3.6 8周游泳運(yùn)動后大鼠心臟肥大的評價
        3.7 8周游泳運(yùn)動對大鼠心肌病理性標(biāo)志物mRNA表達(dá)的影響
        3.8 生物芯片分析microRNA表達(dá)
        3.9 介導(dǎo)運(yùn)動性心臟肥大的信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)
Thr202/Tyr204-ERK1/2的蛋白表達(dá)量">            3.9.1 EKR和phospho^{Thr202/Tyr204}-ERK1/2的蛋白表達(dá)量
Ser473-AKT的蛋白表達(dá)量">            3.9.2 AKT1和phospho^Ser473-AKT的蛋白表達(dá)量
Ser2448-mTOR的蛋白表達(dá)量">            3.9.3 mTOR和phospho^Ser2448-mTOR的蛋白表達(dá)量
        3.10 miRNA靶點(diǎn)及表達(dá)分析
            3.10.1 miRNA靶點(diǎn)的生物信息學(xué)預(yù)測
            3.10.2 miRNA表達(dá)的芯片分析
            3.10.3 miRNA表達(dá)的實(shí)時熒光定量PCR分析
        3.11 miRNA靶點(diǎn)的表達(dá)分析
            3.11.1 PI3K（p110α）的表達(dá)
            3.11.2 PTEN的表達(dá)
            3.11.3 TSC2的表達(dá)
    4. 討論
    5. 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]運(yùn)動性心臟重塑過程中胰島素樣生長因子IGF-Ⅰ基因的表達(dá)[J]. 祁永梅,常蕓.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 2002(06)
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[3]三種訓(xùn)練對大鼠循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)分泌的影響[J]. 洪長青,鄧樹勛.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 2000(01)
[4]運(yùn)動性和高血壓性肥大心臟心肌內(nèi)皮素及其基因表達(dá)的研究[J]. 李昭波,高云秋,李維根,楊萍,唐朝樞.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 2000(01)
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[9]游泳訓(xùn)練對大鼠心肌α1腎上腺素受體及其亞型的影響[J]. 侯香玉,高云秋,韓啟德.  中國運(yùn)動醫(yī)學(xué)雜志. 1992(02)



本文編號：2929919