未成年兔腰椎結(jié)核模型的建立及外科干預(yù)的實驗研究
【摘要】 目的：通過建立未成年兔脊柱結(jié)核模型，觀察未成年兔后路脊柱內(nèi)固定治療脊柱結(jié)核對生長發(fā)育的影響情況，探討小兒脊柱結(jié)核早期外科干預(yù)的效果。方法：將未成年兔腰4椎體鉆孔植入結(jié)核標準菌株H37Rv，建立兔脊柱結(jié)核模型。將25只未成年兔隨機分成5組，每組5只。A組，空白對照組，B組只行腰椎結(jié)核造模，不予以任何干預(yù)治療；C組，抗癆組，行腰椎結(jié)核造模后，予以抗癆治療；D組，抗癆+病灶清除組，行前路病灶清除后予以抗癆治療；E組，抗癆+病灶清除+內(nèi)固定組，行前路病灶清除聯(lián)合后路內(nèi)固定后，予以抗癆治療。5組干預(yù)前均行腰椎CT，以測量L3-L5的椎管面積、椎管橫徑、椎管矢徑、椎體橫徑、椎體矢徑、椎體高度及L1-L7脊柱長度。對D、E組進行外科干預(yù)治療，4w、8w、12w對5組均進行腰椎X線及CT，了解骨質(zhì)融合及脊柱發(fā)育的情況，判斷脊柱的穩(wěn)定性及脊柱結(jié)核的治療效果。結(jié)果：4w各組椎管面積、椎管橫徑、椎管矢狀徑、椎體橫徑、L3、L4、L5椎體高度、L1-L7脊柱長度，統(tǒng)計學分析各組之間無顯著差異（P>0.O5）。8w、12w X線及CT測量，椎管面積、椎管橫徑、椎管矢狀徑、椎體橫徑、椎體矢狀徑：B、C、D、E組較A組有顯著統(tǒng)計學差異（P<0.05）,A組優(yōu)于B、C、D、E組；C、D、E組較B組有顯著統(tǒng)計學差異（P<0.05），E組優(yōu)于B、C、D組。各組L1-L7脊柱長度比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。B、C、D、E組L3、L4、L5椎體高度無顯著差異（P>0.05）。E組L4椎體高度小于L3、L5。結(jié)論：1.通過椎體鉆孔植入結(jié)核菌的方法可以建立未成年兔脊柱結(jié)核模型。2.未成年兔腰椎結(jié)核在規(guī)律抗結(jié)核治療的基礎(chǔ)上，早期外科干預(yù)治療的療效要優(yōu)于保守治療，但內(nèi)固定對脊柱發(fā)育有一定影響，主要是造成椎體高度降低，對椎管發(fā)育影響不大，其對脊柱整體發(fā)育的影響是有限的。
前言
近年來，肺結(jié)核在我國仍在流行，肺外結(jié)核一半累及脊柱，且有發(fā)病呈低齡化趨勢。目前認為脊柱結(jié)核治療的原則: 早期診斷, 早期治療，穩(wěn)定脊柱，恢復功能。
兒童正處于生長發(fā)育期, 其脊柱的解剖特點與成人不同, 因此小兒脊柱結(jié)核的臨床特點與成人存在差異。兒童脊柱結(jié)核的發(fā)病和預(yù)后不同于成人。脊柱結(jié)核的發(fā)病率在生長發(fā)育期的兒童始終較高,其帶來的遠期并發(fā)癥遠比成人嚴重。不但在結(jié)核病變活動期可導致小兒畸形,而且在病變靜止期由于兒童生長發(fā)育的需要，加之受累椎體的上下骨骺受到不同程度的破壞，使得椎體的前方、后方、側(cè)方出現(xiàn)生長不平衡，同時影響椎體與椎弓之間的發(fā)育,最終導致已存在的后凸畸形進一步加重或伴有側(cè)凸畸形。嚴重的脊柱畸形給患兒造成多方面的負面影響:①由于外觀的異常導致出現(xiàn)多種心理問題包括自卑、孤僻、過分敏感等; ②心肺發(fā)育不全所致的功能障礙; ③由于脊髓持續(xù)受壓，將導致遲發(fā)性癱瘓; ④嚴重影響身高與體態(tài)，⑤極易失去勞動力。
小兒脊柱結(jié)核的治療目前沒有統(tǒng)一的標準，處于探索階段。由于兒童椎體軟骨較多, 脊柱亦較軟, 椎體處于生長發(fā)育階段，椎體釘不易擊入，常需先鉆孔。目前手術(shù)治療的方法常有 4 種：①前路病灶清除+植骨融合術(shù);②單純后路植骨融合術(shù); ③前路病灶清除+植骨融合+后路植骨融合術(shù);④單純前路病灶清除術(shù)。為了保證椎體前后均衡生長只有施行前路病灶清除+植骨融合+后路植骨融合術(shù)和單純前路病灶清除術(shù)。前路減壓椎體間融合+后路固定術(shù)，這一術(shù)式可以有效的阻止神經(jīng)功能進一步受損，預(yù)防遲發(fā)性癱瘓的發(fā)生。認為小兒脊柱結(jié)核的治療中,如何有效化療，并在此基礎(chǔ)上, 如何選擇脊柱結(jié)核的手術(shù)時機，如何徹底切除病灶、能否置入內(nèi)固定，如何一期穩(wěn)定脊柱等，都值得深入探討。
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實驗一 未成年兔腰椎結(jié)核模型建立
1.實驗材料
1.1 主要試劑
人型結(jié)核分支桿菌標準菌株（H37Rv）菌株：湖南省結(jié)核病防治所
抗酸染色試劑盒：安徽省巢湖市弘慈醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)
HE 染色試劑盒：上海圻明生物科技有限公司生產(chǎn)
烏拉坦：規(guī)格 500g/瓶，湖南師范大學醫(yī)學院生理學實驗室提供
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2 實驗方法
2.1 動物實驗
30 只未成年兔隨機取 25 只，25 只未成年兔先隨機分成 5 組，每組 5 只，剩余 5 只作預(yù)留動物用。A 組，空白對照組；B 組只行腰椎結(jié)核造模，不予以任何干預(yù)治療；C 組，抗癆組，行腰椎結(jié)核造模后，予以抗癆治療；D 組，抗癆+病灶清除組，行前路病灶清除后予以抗癆治療；E 組，抗癆+病灶清除+內(nèi)固定組，行前路病灶清除聯(lián)合后路內(nèi)固定后，予以抗癆治療。將標準菌株 H37Rv 菌株在湖南省結(jié)核病防治所檢驗科用羅氏培養(yǎng)基進行擴增 2 周和取生長良好的菌落，配成1mg/ml 的均勻菌懸液。將實驗動物左側(cè)腹部脫毛備皮，右側(cè)臥固定在手術(shù)板上。用 25%烏拉坦，1g/kg 麻醉。常規(guī)消毒鋪巾(圖 2-1 至圖 2-2)，取左側(cè)腹膜外入路顯露腰 3、4、5 椎體。從左前方向右后方在腰 4 椎體上部近椎間盤處鉆0.3x0.8cm 的骨孔，骨孔內(nèi)填入浸有結(jié)核菌懸液 1.0ml 的明膠海綿(圖 2-3 至圖2-4)。1-0 絲線間斷關(guān)閉切口(圖 2-5)。術(shù)后動物隔離分籠飼養(yǎng)。于 12w 動物處死后密封送醫(yī)院焚燒處理，動物房紫外光照射消毒。
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實驗二 未成年兔腰椎結(jié)核外科干預(yù)的實驗研究............. 26-41
1.實驗材料 ...............26-27
2.實驗方法 ..................27-32
3.統(tǒng)計學方法 .................32
4.結(jié)果 ................32-39
討論
脊柱是骨骼系統(tǒng)結(jié)核最常見的受累部位[7]，近年來脊柱結(jié)核發(fā)病率在發(fā)達國家及發(fā)展中國家均有升高的趨勢。發(fā)展中國家較嚴重[8]，在我國有低齡化發(fā)展趨勢。而對于處在生長發(fā)育階段的兒童來說，治療不當較易導致嚴重的后凸畸形。兒童腰椎脊柱結(jié)核治療，特別是手術(shù)指征、手術(shù)方式固定節(jié)段等問題均存在爭議。
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總 結(jié)
1.在未成年兔腰椎上鉆孔植入浸有H37Rv標準菌株懸液的明膠海綿，可以建立了大體外觀、影像學表現(xiàn)及組織病理與小兒脊柱結(jié)核相似的動物模型。
2. 未成年兔腰椎結(jié)核在規(guī)律抗結(jié)核治療的基礎(chǔ)上，早期外科干預(yù)治療的療效要優(yōu)于保守治療，但內(nèi)固定對脊柱發(fā)育有一定影響，主要是造成椎體高度降低，其對脊柱整體發(fā)育的影響是有限的。對臨床處理小兒脊柱結(jié)核有一定的指導意義。
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參考文獻:
- [1] 劉豐勝,賈晨光,張國山,高建國. 經(jīng)頸胸骨上段入路治療頸胸段椎體結(jié)核[J]. 河北醫(yī)藥. 2008(12)
- [2] 張成程,陳建明,張志輝,許天明,文景. 病灶清除+同種異體骨移植治療小兒脊柱結(jié)核[J]. 頸腰痛雜志. 2007(05)
- [3] 賈連順. 脊柱結(jié)核外科治療的現(xiàn)狀與問題[J]. 中國矯形外科雜志. 2007(07)
- [4] 王漢林,李亞洲,王志強. 不同月齡幼兔脊柱后路固定對其生長發(fā)育的影響[J]. 中國矯形外科雜志. 2006(21)
- [5] 金大地. 化療和外科干預(yù)并重,進一步提高脊柱結(jié)核治療水平[J]. 中華骨科雜志. 2005(02)
- [6] 李定越,盧潤生,蔣紹雙,鄭德福. 結(jié)核病實驗動物模型[J]. 四川醫(yī)學. 2003(07)
- [7] 王惠琴. 椎旁弧形切口治療胸椎結(jié)核(附89例療效分析)[J]. 河北醫(yī)藥. 1982(03)
本文編號：9073
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