PTTG1基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化狀態(tài)在散發(fā)性結(jié)直腸癌中的檢測(cè)及其臨床意義
本文選題:PTTG1 切入點(diǎn):結(jié)直腸癌 出處:《福建醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:【目的】亞磷酸鹽測(cè)序法(BSP)檢測(cè)40例散發(fā)型性結(jié)直腸癌患者腫瘤組織及瘤旁相對(duì)正常的腸粘膜組織PTTG1基因啟動(dòng)子區(qū)Cp G島甲基化率,蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測(cè)PTTG1基因的表達(dá)情況,并進(jìn)一步研究其與病理及臨床特征之間的關(guān)系!痉椒ā40例散發(fā)性結(jié)直腸癌患者癌組織及癌旁相對(duì)正常的腸粘膜組織:亞磷酸鹽測(cè)序法檢測(cè)PTTG1基因啟動(dòng)子區(qū)Cp G島(-1~-400bp區(qū)域)的甲基化率;蛋白質(zhì)印記法(WB)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)技術(shù)分別檢測(cè)PTTG1蛋白和m RNA在癌組織及癌旁組織表達(dá);分析其PTTG1基因的表達(dá)與病理學(xué)特征及臨床關(guān)系!窘Y(jié)果】1.亞硫酸鹽測(cè)序法(BSP)檢測(cè)40例結(jié)直腸癌患者的癌組織及癌旁相對(duì)正常腸粘膜組織PTTG1基因啟動(dòng)子Cp G島(-1~-400bp區(qū)域)范圍內(nèi)共有32個(gè)可甲基化位點(diǎn)。其中腫瘤組織組甲基化率19.05±4.45,癌旁組為68.07±3.71,差異有統(tǒng)計(jì)意(P=0.032,P0.05)。結(jié)直腸癌組織PTTG1基因啟動(dòng)子區(qū)Cp G島的甲基化率低于癌旁組織,癌組織的甲基化率與腫瘤分化程度、浸潤(rùn)深度相關(guān),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、年齡、性別等因素?zé)o關(guān);2.免疫印記實(shí)驗(yàn)法(WB)檢測(cè)40例結(jié)直腸癌患者的癌組織及癌旁相對(duì)正常腸粘膜組織中PTTG1蛋白表達(dá)量分別為2.79±0.23和1.00±0.17,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。直腸癌癌組織PTTG1蛋白高表達(dá)與癌旁組織,PTTG1蛋白在直腸癌組織的高表達(dá)與腫瘤的浸潤(rùn)深度、分化程度相關(guān),與患者的年齡、性別以及腫瘤大小和淋巴轉(zhuǎn)移等無關(guān);3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR(q RT-PCR)檢測(cè)40例結(jié)直腸癌患者的癌組織及癌旁相對(duì)正常腸粘膜組織中PTTG1 m RNA表達(dá)量的2-ΔΔCT值分別為18.38±2.14和9.37±1.49,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.028,P0.05),顯示結(jié)直腸癌組織中PTTG1 m RNA表達(dá)水平較癌旁組織升高!窘Y(jié)論】1.PTTG1啟動(dòng)子區(qū)內(nèi)Cp G島(-1~-400bp區(qū)域)癌組織的甲基化率低于癌旁組織;2.PTTG1基因在散發(fā)性結(jié)直腸癌組織中高表達(dá),其與分化程度、浸潤(rùn)深度相關(guān)?赡転榻Y(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制、診斷、治療、預(yù)防提供新的思路。
[Abstract]:[objective] to detect the methylation rate of CpG island in the promoter region of PTTG1 gene in 40 patients with sporadic colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa by phosphite sequencing. Western blotting and real-time fluorescence quantitative PCR(q RT-PCR were used to detect the expression of PTTG1 gene. [methods] 40 patients with sporadic colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa were examined by phosphite sequencing for the detection of CP G islands in the promoter region of PTTG1 gene. [methods] the relationship between the pathological and clinical features was further studied. [methods] 40 patients with sporadic colorectal cancer were examined for CpG islands in the promoter region of the PTTG1 gene by phosphite sequencing. The methylation rate of the region was 400 BP. Protein imprinting and real-time quantitative PCR(q RT-PCR were used to detect the expression of PTTG1 protein and m RNA in cancer tissues and adjacent tissues, respectively. To analyze the expression of PTTG1 gene and its clinicopathological characteristics. [results] 1. The PTTG1 gene promoter of PTTG1 gene in 40 patients with colorectal cancer and adjacent normal intestinal mucosa was detected by sulfite sequencing. The methylation rate in tumor tissue group was 19.05 鹵4.45, and that in paracancerous group was 68.07 鹵3.71, the difference was statistically significant. The methylation rate in PTTG1 promoter region of colorectal cancer was lower than that in paracancerous tissue. The methylation rate of cancer tissue was related to the degree of differentiation, depth of invasion, lymph node metastasis, age, The expression of PTTG1 protein was 2.79 鹵0.23 and 1.00 鹵0.17 in 40 patients with colorectal cancer and relative normal intestinal mucosa, respectively, and the difference was statistically significant (P 0.05). The high expression of PTTG1 protein and the high expression of PTT G1 protein in the adjacent tissues of rectal cancer and the depth of tumor invasion. The degree of differentiation is related to the age of the patient, Sex, tumor size and lymphatic metastasis. Real-time quantitative PCR(q RT-PCR was used to detect the expression of PTTG1 m RNA in cancer tissues and adjacent normal intestinal mucosa of 40 patients with colorectal cancer. The values of 2- 螖 螖 CT were 18.38 鹵2.14 and 9.37 鹵1.49, respectively. The expression of PTTG1 m RNA in colorectal cancer tissues was significantly higher than that in adjacent tissues. [conclusion] 1. The methylation rate of PTT G1 promoter was lower than that of adjacent tissues. 2. PTTG1 gene was highly expressed in sporadic colorectal cancer tissues. It may provide new ideas for the pathogenesis, diagnosis, treatment and prevention of colorectal cancer.
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R735.34
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1561304
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