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酒制瑞香狼毒對S180荷瘤小鼠抑瘤作用實驗研究

發(fā)布時間:2020-11-22 10:03
   目的:通過建立S180皮下移植瘤小鼠模型,實驗研究酒制對瑞香狼毒抑瘤活性及毒性反應(yīng)的影響,并初步探討其抗腫瘤作用機制。方法:昆明種小鼠80只,隨機抽取10只小鼠做空白對照,剩余70只在小鼠左上肢腋下部位,行S180肉瘤皮下移植瘤造模。將荷瘤小鼠隨機分成模型組、瑞香狼毒生藥低中高劑量組、酒制瑞香狼毒低中高劑量組7個實驗組。以灌胃的方式給藥,空白對照組和模型組給予生理鹽水,生藥組和酒制組分別給予瑞香狼毒生藥及酒制水煎劑,低中高劑量組的藥物濃度分別為5g/kg、10g/kg、20g/kg。末次給藥24h后,將小鼠稱重、脫頸椎處死,解剖摘取腫瘤組織、脾、胸腺,稱重并留取組織樣本制成石蠟切片。進行HE染色,顯微鏡觀察腫瘤組織、脾、胸腺的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu),免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織Ki-67、Caspase-3的表達水平。結(jié)果:1.瑞香狼毒生藥組與酒制瑞香狼毒組腫瘤組織重量均低于模型組(P0.05,P0.01),生藥低中高劑量組的抑瘤率分別為:34.80%、44.00%、33.18%,酒制低中高劑量組的抑瘤率分別為:46.80%、57.97%、54.95%,瑞香狼毒生藥與酒制瑞香狼毒均能抑制S180腫瘤組織增長。酒制瑞香狼毒組抑瘤作用優(yōu)于生藥組,其中以酒制中劑量組抑瘤率最高,為57.97%。2.與空白對照組相比,酒制瑞香狼毒組小鼠的脾指數(shù)未發(fā)生明顯改變(P0.05),生藥組的脾指數(shù)降低,其中以高劑量組降低最為顯著(P0.05);各用藥組小鼠胸腺指數(shù)未發(fā)生明顯改變(P0.05)。鏡下觀察發(fā)現(xiàn),各組小鼠的脾和胸腺未發(fā)生明顯的形態(tài)學(xué)改變。3.形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn):較模型組相比,瑞香狼毒生藥及酒制各劑量組的腫瘤細胞排列稀疏,數(shù)量較少,多見散在淺粉色片狀壞死區(qū),壞死區(qū)內(nèi)腫瘤組織的正常結(jié)構(gòu)消失,細胞膜破裂,胞核碎裂或消失,周圍可見間質(zhì)細胞增多,伴有不同程度的白細胞浸潤。4.免疫組化檢測結(jié)果顯示:與模型組相比,酒制瑞香狼毒能夠顯著下調(diào)S180荷瘤小鼠腫瘤組織中的Ki-67的表達(P0.01),其中酒制中、高劑量組的Ki-67增殖指數(shù)最低,分別為26.50%±8.90%、26.28%±7.23%;能顯著上調(diào)Caspase-3的表達(P0.01),其中酒制中、高劑量組的Caspase-3陽性表達率最高,分別為50.75%±18.48%、40.40%±17.60%。結(jié)論:1.通過酒制,能增強瑞香狼毒對S180皮下荷瘤小鼠的抑瘤活性。2.在增強抑瘤作用的同時,酒制能降低瑞香狼毒的毒性反應(yīng),減輕生藥對小鼠體質(zhì)量和脾指數(shù)的影響。3.酒制瑞香狼毒的抗腫瘤作用機制可能與通過下調(diào)Ki-67的表達、上調(diào)Caspase-3的表達,從而抑制S180皮下荷瘤小鼠腫瘤細胞的增殖并促進其發(fā)生凋亡有關(guān)。
【學(xué)位單位】:河北大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R285.5
【部分圖文】:

體質(zhì)量,小鼠,增長曲線


在實驗第 7 日,各實驗組小鼠的體質(zhì)量差異開始明顯(P<0.05),鼠體質(zhì)量增長較空白對照組緩慢。結(jié)果見表 1、圖 1。表 1 各組小鼠體質(zhì)量情況( x ±S,n=10)第 1 日(g) 第 3 日(g) 第 5 日(g) 第 7 日(g) 21.26±0.98 22.36±1.60 23.28±2.07 24.81±1.19 21.41±1.26 21.81±1.83 21.24±2.05 21.94±1.75* 21.34±1.24 21.17±1.93 21.89±2.38 22.92±1.30* 21.37±1.09 21.40±1.52 22.15±2.54 22.76±1.46* 21.40±0.84 21.78±1.36 22.03±2.03 23.19±1.14 21.28±1.06 21.26±1.39 22.51±2.17 24.56±1.32 21.27±1.00 21.51±1.42 22.72±1.96 24.63±1.56 21.48±1.10 21.29±2.02 22.70±2.74 25.14±2.07 白對照組比較,P <0.01;#表示與模型組比較,P <0.05;△表示與模型組

荷瘤小鼠,增長曲線,腫瘤,低劑量


表 3 各組荷瘤小鼠腫瘤體積比較( x s,n=10)組別 第 2 日(mm3) 第 4 日(mm3) 第 6 日(mm3) 第 8 日(m型組 32.895±12.520 56.009±6.666 238.660±109.881 269.286±4低劑量組 28.294±10.901 52.738±25.257 224.351±85.217 255.731±5中劑量組 27.179±8.517 49.255±12.967 182.554±69.120 229.198±4高劑量組 35.853±14.128 50.210±8.251 189.909±84.779 213.875±72低劑量組 28.686±5.429 40.502±17.120* 175.208±66.890 241.585±4中劑量組 26.314±5.425 41.084±14.573* 132.518±75.360*#161.403±51高劑量組 26.243±7.011 50.123±14.962 120.707±39.059*#191.468±71*表示與模型組比較,P <0.05;#表示與生藥低劑量組比較,P <0.05。

荷瘤小鼠,腫瘤組織,腫瘤細胞,生藥


A:模型組;B:生藥組;C:酒制組圖 3 造模第 8 日各組荷瘤小鼠腫瘤組織超聲影像圖2.3.3 腫瘤組織的形態(tài)學(xué)觀察形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn):高倍鏡下,可見模型組腫瘤細胞排列緊密,數(shù)量較多,細胞大小不等、形狀不規(guī)則;可見散在的呈核分裂狀的增殖細胞,細胞核較大,呈深染。生藥及酒制各劑量組腫瘤細胞數(shù)量較少,排列稀疏,多見散在片狀淺粉色壞死區(qū),壞死區(qū)內(nèi)正常組織結(jié)構(gòu)消失,腫瘤細胞胞膜破裂,胞核碎裂或消失,周圍可見間質(zhì)細胞增多,伴有不同程度的白細胞浸潤。結(jié)果見圖 4。
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