發(fā)布時(shí)間：2020-11-22 09:31

　　 目的:探討補(bǔ)陽還五湯對(duì)大鼠脊髓缺血再灌注損傷(SCII)后細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Beclin 1、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)、P62(死骨片1)影響的機(jī)制研究。方法:48只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、觀察組和3-MA組,模型組腹腔內(nèi)注射生理鹽水,觀察組在造模的前三天給予補(bǔ)陽還五湯湯藥灌胃,3-MA(3-甲基腺嘌呤)組腹腔注射3-MA注射液,然后夾閉腹主動(dòng)脈40min開放,造模后,在缺血3h、6h后進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分、取材,進(jìn)行免疫組化檢測(cè)Beclin 1、LC3、P62的表達(dá)變化、透視電鏡檢測(cè)。結(jié)果:在缺血3h后、6h后,假手術(shù)組與其他三組在Beclin1、LC3和P62等方面比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型組、觀察組和3-MA組三種蛋白的表達(dá)均上調(diào)。行為學(xué)評(píng)分、透視電鏡檢測(cè)與免疫組化結(jié)果基本一致,可以相互印證。結(jié)論:補(bǔ)陽還五湯可能會(huì)對(duì)細(xì)胞自噬進(jìn)行雙向調(diào)節(jié),保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。
【部分圖文】：

假手術(shù)組大鼠脊髓組織神經(jīng)元組織結(jié)構(gòu)基本正常，核型規(guī)則為圓形或橢圓形，核膜完整，核內(nèi)染色質(zhì)均勻，核仁明顯。胞質(zhì)中細(xì)胞器形態(tài)分布及數(shù)目正常，髓鞘圍繞軸索呈同心圓排列，軸索內(nèi)有微絲和微管，排列規(guī)則，未見軸漿變性及顆粒狀崩解（詳見圖a,b）。模型組3 h后、6 h后可見脊髓組織神經(jīng)元胞漿廣泛水腫，線粒體腫脹、空泡化，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)松散，游離核糖體增多，溶酶體形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞中有大量由單層膜組成的自噬囊泡，其中有高電子密度的吞噬顆粒（即自噬小體）（詳見圖1c,d）。觀察組3 h后髓鞘水腫明顯，髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列，軸索內(nèi)有微絲和微管，排列較紊亂，但未見軸漿變性及顆粒狀崩解，線粒體腫脹、空泡化，可見部分自噬小體。觀察組6 h后髓鞘水腫明顯減退，神經(jīng)元組織結(jié)構(gòu)基本正常，核型規(guī)則為圓形或橢圓形，核膜完整，核內(nèi)染色質(zhì)均勻，核仁明顯，髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列，軸索內(nèi)有微絲和微管，排列規(guī)則，自噬小體減少（詳見圖1e,f）。3-MA組3h后、6 h后髓鞘板層圍繞軸索呈同心圓排列，軸索內(nèi)有微絲和微管，排列較紊亂，線粒體腫脹、空泡化，但未見軸漿變性及顆粒狀崩解，未見明顯自噬小體（詳見圖1g,h）。3 討論
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