發(fā)布時(shí)間：2020-11-22 06:26

　　 目的:研究抗生素所致菌群失調(diào)腹瀉及七味白術(shù)散干預(yù)后對(duì)小鼠乳糖酶基因表達(dá)的影響,探明小鼠乳糖酶基因表達(dá)與小鼠腸道乳糖酶活性影響的相關(guān)性,為七味白術(shù)散對(duì)菌群失調(diào)腹瀉的療效機(jī)理提供依據(jù)。方法:SPF級(jí)昆明小鼠42只,雌雄各半,隨機(jī)分為正常組16只、模型組24只。連續(xù)造模5天,造模期間正常組予以蒸餾水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,模型組小鼠予以頭孢拉定膠囊+硫酸慶大霉素混合抗生素11.67m L/kg/次,每日灌胃2次,造成小鼠腸道菌群紊亂。造模成功后按照隨機(jī)數(shù)字表法從正常組和模型組中各取8只小鼠,雌雄各半,頸椎脫臼處死后無菌收集內(nèi)容物及腸粘膜,用于檢測(cè)菌群失調(diào)腹瀉造模后小鼠腸道乳糖酶活性和小鼠腸道乳糖酶mRNA的總量。造模第5天將模型組16只小鼠,雌雄各半,按照隨機(jī)數(shù)字表法,隨機(jī)分為模型組和七味組,正常組、模型組和七味組各8只小鼠,雌雄各半。連續(xù)治療4天,治療期間正常組和模型組予以蒸餾水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,七味組予以七味白術(shù)散0.104g/kg/次,每日灌胃2次,治療4天后分別處死三組的8只小鼠,用于檢測(cè)七味白術(shù)散治療菌群失調(diào)腹瀉小鼠后,小鼠腸道乳糖酶活性和小鼠腸道乳糖酶mRNA的總量。結(jié)果:菌群失調(diào)腹瀉造模5天后,與正常組相比,模型組小鼠內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性均出現(xiàn)了顯著的降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);正常組和模型組中小鼠內(nèi)容物和粘膜的mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05)。七味白術(shù)散治療4天后,與正常組相比,模型組小鼠內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性均降低,七味組小鼠內(nèi)容物(p0.01)及粘膜(p0.05)中的乳糖酶活性均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組相比,七味組小鼠腸道內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。正常組、模型組、七味組中小鼠內(nèi)容物和粘膜的mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05)。結(jié)論:菌群失調(diào)腹瀉造模會(huì)降低小鼠和細(xì)菌腸內(nèi)容物和腸黏膜中的乳糖酶活性,七味白術(shù)散可促進(jìn)小鼠和細(xì)菌腸道乳糖酶活性的恢復(fù)。菌群失調(diào)腹瀉造模及七味白術(shù)散治療對(duì)小鼠腸道乳糖酶mRNA的總量無影響。七味白術(shù)散可在蛋白水平調(diào)控小鼠腸道乳糖酶活性,在基因水平對(duì)小鼠腸道乳糖酶mRNA的總量的變化無影響。目的:研究抗生素所致菌群失調(diào)腹瀉及七味白術(shù)散干預(yù)后,對(duì)小鼠腸道細(xì)菌乳糖酶基因表達(dá)的影響,探明小鼠腸道乳糖酶活性與細(xì)菌乳糖酶基因表達(dá)的相關(guān)性,為七味白術(shù)散對(duì)菌群失調(diào)腹瀉的療效機(jī)理提供依據(jù)。方法:SPF級(jí)昆明小鼠42只,雌雄各半,隨機(jī)分為正常組16只、模型組24只。連續(xù)造模5天,造模期間正常組予以蒸餾水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,模型組小鼠予以頭孢拉定膠囊+硫酸慶大霉素混合抗生素11.67m L/kg/次,每日灌胃2次,造成小鼠腸道菌群紊亂。造模成功后按照隨機(jī)數(shù)字表法從正常組和模型組中各取8只小鼠,雌雄各半,頸椎脫臼處死后無菌收集內(nèi)容物及腸粘膜,用于檢測(cè)菌群失調(diào)腹瀉造模后腸道乳糖酶活性和小鼠腸道細(xì)菌乳糖酶mRNA的總量。造模第5天將模型組16只小鼠,雌雄各半,按照隨機(jī)數(shù)字表法,隨機(jī)分為模型組和七味組,使得正常組、模型組和七味組各8只小鼠,雌雄各半。連續(xù)治療4天,治療期間正常組和模型組予以蒸餾水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,七味組予以七味白術(shù)散0.104g/kg/次,每日灌胃2次,治療4天后分別處死三組的8只小鼠,用于檢測(cè)七味白術(shù)散治療菌群失調(diào)腹瀉小鼠后,腸道乳糖酶活性和小鼠腸道細(xì)菌乳糖酶mRNA的總量。結(jié)果:菌群失調(diào)腹瀉造模5天后,與正常組相比,模型組小鼠內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性均出現(xiàn)了顯著的降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);正常組和模型組中小鼠內(nèi)容物和粘膜的mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05)。七味白術(shù)散治療4天后,與正常組相比,模型組小鼠內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性均降低,七味組小鼠內(nèi)容物(p0.01)及粘膜(p0.05)中的乳糖酶活性均升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;七味組與模型組相比,小鼠腸道內(nèi)容物及粘膜乳糖酶活性顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);正常組、模型組、七味組中小鼠內(nèi)容物和粘膜的mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05)。菌群失調(diào)腹瀉造模5天后,正常組和模型組中小鼠腸道細(xì)菌內(nèi)容物和粘膜的mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05);七味白術(shù)散治療4天后,正常組、模型組、七味組中小鼠腸道內(nèi)容物和粘膜中細(xì)菌乳糖酶mRNA表達(dá)量無明顯差異(p0.05)。結(jié)論:菌群失調(diào)腹瀉造模會(huì)降低小鼠和細(xì)菌腸內(nèi)容物和腸黏膜中的乳糖酶活性,七味白術(shù)散可促進(jìn)小鼠和細(xì)菌腸道乳糖酶活性的恢復(fù)。菌群失調(diào)腹瀉造模及七味白術(shù)散治療對(duì)小鼠腸道細(xì)菌乳糖酶mRNA的總量無影響。七味白術(shù)散可在蛋白水平調(diào)控小鼠腸道細(xì)菌的乳糖酶活性,在基因水平對(duì)小鼠腸道細(xì)菌乳糖酶mRNA的總量的變化無影響。
【學(xué)位單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R285.5
【部分圖文】：

圖 8 七味白術(shù)散治療后小腸內(nèi)容物和粘膜細(xì)菌乳糖酶基因表達(dá) PCR 瓊脂糖凝膠電泳圖2.2 造模對(duì)小腸內(nèi)容物中細(xì)菌乳糖酶 mRNA 表達(dá)量的影響造模后所提取的正常組、模型組小鼠腸道細(xì)菌內(nèi)容物和粘膜總 RNA 濃度、純度及完整性均較好，為小鼠內(nèi)容物和粘膜 RNA 逆轉(zhuǎn)錄提供了良好的基礎(chǔ)。由表
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