微生物轉化是天然產物結構修飾的有效手段,開發(fā)新的微生物資源是實現(xiàn)轉化反應類型和轉化產物結構新穎多樣化的有力保障。本論文嘗試從植物內生真菌中挖掘具有宿主化學成分轉化能力的微生物資源,以期拓展宿主化學成分的結構多樣性。論文第一章為緒論,對石杉堿甲及其類似物的結構修飾研究進展,以及微生物(包括植物內生真菌)轉化在天然產物結構修飾方面的研究進展進行了綜述。論文第二章以藥用植物蛇足石杉(Huperzia serrata)為研究對象,從不同產地來源的植株中分離得到了120株內生真菌,通過篩選獲得了兩株具有石杉堿甲和石杉堿乙轉化能力的菌株ZJUT-HS28和ZJUT-HS39,經分子生物學鑒定,兩菌株分別為Bjerkandera sp.和Irpex lacteus。論文第三章研究了篩選獲得的兩株菌Bjerkandera sp.ZJUT-HS28和Irpex lacteus ZJUT-HS39對石杉堿甲和石杉堿乙的轉化作用。綜合運用現(xiàn)代色譜和波譜技術,從Irpex lacteus ZJUT-HS39的轉化體系中分離鑒定了2個化合物1和2;其中,化合物1和2互為非對映異構體,均為首次報道的新穎結構石杉堿甲轉化產物。從Bjerkandera sp.ZJUT-HS28的轉化體系中分離鑒定了5個化合物3-7,其中,化合物3為轉化產物8?,15?-環(huán)氧化石杉堿乙,為新化合物;化合物4為轉化產物8?,15?-環(huán)氧化石杉堿甲,該化合物僅有兩例報道,均為微生物轉化石杉堿甲所得,其中一例為蛇足石杉內生真菌轉化石杉堿甲所得。論文第四章對分離得到的轉化產物進行了抗神經細胞炎癥活性的初步研究。結果顯示化合物1和化合物2具有較強的抗炎活性,能夠顯著提高LPS誘導的星形膠質細胞存活率,為進一步探究石杉堿甲的神經保護作用研究奠定了基礎。本論文研究結果提示,利用內生真菌開展宿主植物化學成分的生物轉化,能夠獲得結構新穎的轉化產物,為植物來源天然產物的結構修飾提供一種新的方法。
【學位單位】：浙江工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R284
【部分圖文】：

-2 A 陰溝外側部位 Hup A 與酶的催化示意圖; B HupA 與膽堿酯酶結合部位放大re 1-2 A Catalysis of Hup A and Enzyme in the Outside of the Crypt; B amplified mHupA and cholinesterase binding sites堿甲的化學結構修飾堿甲的結構修飾主要從結構簡化、C10、吡啶酮環(huán)、脂橋環(huán)、環(huán)外雙等方面著手。在已合成的大量類似物中，只有少部分活性優(yōu)于天然于石杉堿甲是一個具有三環(huán)結構的剛性分子，其特有的橋環(huán)和氨基構改造帶不少的困難，因此其化學結構改造也具有一定的局限性[10]簡化紀 90 年代，何煦昌等[11]通過計算機模擬研究推測石杉堿甲分子結構 2 ( 1 H ) 吡啶酮結構可能是其藥效部分，設計并合成了石杉堿甲類

圖 2-1 部分蛇足石杉內生真菌Figure 2-1 Endophytic fungi isolated from Huperzia serrata在本節(jié)中，利用 PDA 平板培養(yǎng)基分離內生真菌，一共從藥用植物蛇足石杉(H.serrata)中分離獲得內生真菌 120 株，其中莖中最多，葉中次之，根部最少。在分離過程中，隨著分離次數(shù)的增加，分離所得內生真菌的重復率也越高，因此，要根據(jù)菌株的菌落形態(tài)，顏色，大小，生長速率，質地以及菌絲體和孢子的形態(tài)特征進行區(qū)分，以減少重復率。由于在分離和組織培養(yǎng)中較易染菌，可在滅菌后的培養(yǎng)基中加入 100 mg/L 的青霉素和 200 mg/L 的鏈霉素即可，以確保所分菌株為內生真菌。

檢測 (A 為 Hup A 轉化組，-HS28 (A: transformation gro驗 TLC 圖譜(碘化鉍鉀顯 檢測(A 為 Hup A 轉化組，-HS39 (A: transformation gro20株內生真菌中初步篩選
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 談寒一;夏文靜;;石杉堿甲的專利分析[J];廣東化工;2019年05期

2 ;中草藥提煉物石杉堿甲治療老年癡呆效果顯著[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2001年04期

3 俞超美;唐希燦;韓燕藝;;石杉堿甲及其注射液的研究[J];醫(yī)學研究通訊;1987年08期

4 李春德,閻敬初;石杉堿甲對膽堿酯酶的作用[J];中國藥理學與毒理學雜志;1989年02期

5 李春德,于瑞起,閻敬初;石杉堿甲對家兔腦電、肌電、呼吸和血流等的影響及其對膽堿酯酶的抑制[J];中國藥理學與毒理學雜志;1989年04期

6 宋韶錦;劉華麗;丁平田;;石杉堿甲-玉米醇溶蛋白微球釋放特性的研究[J];藥學研究;2014年01期

7 溫秀華;;石杉堿甲聯(lián)合腦復康治療血管性癡呆療效分析[J];科技信息;2011年29期

8 尹富敏,杜育陽,王力娥;血管性癡呆患者石杉堿甲的干預效果分析[J];現(xiàn)代康復;2001年21期

9 楊曉陽,張宏穎;石杉堿甲治療腦卒中后尿失禁的療效觀察[J];實用神經疾病雜志;2004年05期

10 李雯妮;虞華英;;石杉堿甲治療輕中度阿爾茨海默病老年患者的療效[J];中國老年學雜志;2011年11期

相關博士學位論文 前10條

1 呂佩源;小鼠血管性癡呆細胞分子生物學發(fā)病機制及石杉堿甲的影響[D];河北醫(yī)科大學;2004年

2 閆瑾;正電子發(fā)射斷層（PET）基礎與臨床研究：~（11）C-石杉堿甲制備方法及生物學初步評價[D];復旦大學;2007年

3 史俊;石杉堿甲-磷酸川芎嗪復方干預阿爾茨海默癥的研究[D];華東理工大學;2012年

4 高萍;石杉堿甲生物可降解長效注射微球的研究[D];沈陽藥科大學;2006年

5 張香梅;膠孢炭疽菌ES026石杉堿甲合成途徑關鍵酶基因CgCAO、CgLDC的克隆和功能驗證[D];華中農業(yè)大學;2017年

6 廖冬燕;PNS對SAMP8小鼠腦內Aβ沉淀及記憶相關信號通路的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學;2015年

7 楊春榮;轉鐵蛋白介導石杉堿甲納米結構脂質載體的腦靶向給藥系統(tǒng)研究[D];沈陽藥科大學;2010年

8 應優(yōu)敏;蛇足石杉化學成分及其內生真菌的代謝與生物轉化研究[D];浙江工業(yè)大學;2012年

9 郭微;磁性粒子表面修飾及其在功能性小分子作用組學研究中的應用[D];上海交通大學;2012年

10 王娟;蛇足石杉聚酮合酶的克隆鑒定及其在組合合成中的應用[D];北京中醫(yī)藥大學;2017年

相關碩士學位論文 前10條

1 張才學;基于蛇足石杉內生真菌生物轉化作用的石杉堿甲衍生物制備及活性評價[D];浙江工業(yè)大學;2018年

2 馬寶苗;石杉堿甲抑制海洛因自身給藥大鼠線索或海洛因誘導的覓藥行為[D];寧波大學;2010年

3 孫若瓊;蛇足石杉產石杉堿甲內生真菌的發(fā)酵條件及其產物的初步研究[D];安徽師范大學;2010年

4 葉紅闌;石杉堿甲可生物降解緩釋原位凝膠注射劑的研究[D];江蘇大學;2009年

5 鞠鏨;四種石杉科植物中產生石杉堿甲的內生真菌的分離、鑒定和其石杉堿甲含量的測定[D];復旦大學;2009年

6 方增軍;石杉堿甲殼聚糖微球的研究[D];山東大學;2007年

7 李薇;石杉堿甲解離常數(shù)的測定及其人體藥代動力學研究[D];南京醫(yī)科大學;2008年

8 張小紅;蛇足石杉中石杉堿甲雙水相萃取分離的工藝研究[D];合肥工業(yè)大學;2016年

9 徐雷;黃連解毒湯治療老年性癡呆的臨床及實驗研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2015年

10 孫蕊;可調控型生物降解緩控釋材料的制備和性能研究[D];上海工程技術大學;2012年

本文編號：2891312