發(fā)布時間：2020-03-20 23:00

【摘要】：芒果葉為芒果(Mangifera indica L.;原始花被亞綱,無患子目,漆樹科)的干燥葉子,其獲得途徑容易,為我國傳統(tǒng)中藥,在臨床上可治療熱結(jié)腹痛、腹脹等疾病,煎藥外洗可治療爛瘡。我們對廣西省、云南省不同品種的芒果葉藥材進行了生藥鑒定(基原、原植物形態(tài)、性狀、粉末、橫切面等),為該藥材的區(qū)分和進一步的開發(fā)研究提供了科學(xué)依據(jù)。芒果苷(Mangiferin,MFN)為芒果葉的主要有效成分,因其無毒無副作用在臨床上廣泛應(yīng)用。近代研究表明MFN有抗炎、抗脂質(zhì)代謝異常、抗糖尿病、抗癌、殺菌及促雌激素樣作用。結(jié)合酒精性肝損傷(Alcoholic liver disease,ALD)發(fā)病原因和MFN的藥理活性,推測MFN可能對ALD具有治療作用,這在我們的前期實驗中也得到了證實。采用40%酒精誘導(dǎo)的大鼠ALD模型,與人長期過度酗酒導(dǎo)致的ALD具有相似性,是研究ALD疾病的理想模型。本文探討了不同品種的芒果葉的鑒定及MFN的提取與純化,并通過肝功、相關(guān)生化指標(biāo)的檢測,病理組織學(xué)檢查和實時熒光定量PCR技術(shù)的應(yīng)用,從多方面評價MFN是否具有抗ALD的功效與作用,初步探討其相關(guān)機制。主要研究內(nèi)容如下:1.芒果葉的鑒定及芒果苷的提取與純化不同品種芒果葉片在顏色、導(dǎo)管、非腺毛、石細胞、草酸鈣結(jié)晶和葉中脈橫切面上有較大區(qū)別,有時散落分布在主脈兩側(cè),有時連續(xù)呈半環(huán)狀;厚壁組織、分泌細胞、髓、髓射線、油室有多有少;初生木質(zhì)部和次生木質(zhì)部導(dǎo)管直徑的相對大小有時相差不大,有時明顯可以區(qū)分。以上實驗結(jié)論可作為不同品種的芒果葉的性狀和粉末、橫切面的鑒定依據(jù)。通過不同品種芒果葉中MFN的含量檢測,我們發(fā)現(xiàn)百色芒果葉中MFN的含量最多。因此本實驗以百色芒果葉為材料,依次通過乙醇提取、石油醚萃取脫色、低壓加熱濃縮、過濾、重結(jié)晶、濃縮、過濾等一系列處理后得到MFN粗品;然后使用聚酰胺柱色譜以水-乙醇系統(tǒng)梯度洗脫分離得到純品MFN,產(chǎn)率為77.6%;最后利用高效液相色譜法與MFN標(biāo)準(zhǔn)品對比,測定提純得到的MFN的純度為98%,完全符合后續(xù)MFN藥理學(xué)實驗要求,且為工業(yè)化提取分離MFN提供了一定的借鑒。2.MFN對ALD大鼠的保護作用將實驗大鼠隨機分為正常組、模型組、水飛薊賓組(SYN,20 mg/kg)和MFN高、低劑量組(100、50 mg/kg),采取40%酒精(10 mL/kg)灌胃的方式建立ALD大鼠模型,同時進行藥物治療。4周后,檢測血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的濃度,肝組織中TNF-α和IL-6的水平以及NF-κB mRNA的表達,并觀察肝組織HE和油紅O染色情況。結(jié)果所示,相比于正常組,模型組大鼠肝、脾、腎相對重量明顯升高(P0.01),模型組大鼠血清中ALT、AST、TBIL、DBIL和IBIL的濃度明顯升高(P0.01),肝組織中TNF-α和IL-6水平以及NF-κB mRNA表達程度亦明顯升高(P0.01),同時肝臟出現(xiàn)大量空泡病變、肝細胞腫脹、脂肪聚集、炎癥細胞浸潤等現(xiàn)象。MFN高、低劑量組對上述指標(biāo)異常均有顯著的改善作用(P0.01,P0.05),肝細胞病變程度明顯減輕,并且具有劑量依賴性。綜上所述,不同品種芒果葉在生藥鑒定中有較大區(qū)別,其生藥鑒定為該藥材的區(qū)分和進一步的開發(fā)研究提供科學(xué)依據(jù);本實驗中MFN的提取與純化方法,可為后面的MFN藥理學(xué)實驗研究提供基礎(chǔ);MFN具有良好的抗ALD的作用,其作用機制可能與促進肝細胞修復(fù),調(diào)節(jié)肝細胞炎癥因子TNF-α、IL-6水平和NF-κB的mRNA表達有關(guān)。
【圖文】：

其原產(chǎn)地為印度、馬來西亞、緬甸，現(xiàn)熱帶各地均有栽培，其葉廉價易得。我國芒果栽培歷史悠久，最早追溯到唐代，主要從印度引種[1]。我國的兩廣地區(qū)、南部沿海地區(qū)、四川攀枝花地區(qū)以及臺灣為芒果的主要產(chǎn)區(qū)。根據(jù)中國農(nóng)業(yè)部統(tǒng)計的種植面積和產(chǎn)量信息來看，中國已是世界第七大芒果生產(chǎn)國[2]。芒果葉一般表現(xiàn)為橢圓形或橢圓狀披針形，長約 10~30 cm，寬約 3~6 cm；葉較薄，，質(zhì)地韌且厚，多集中生長于枝頂；葉基部多近似圓形或楔形，尖端漸窄或呈現(xiàn)急尖狀，邊緣多呈波浪型；葉面光澤無毛，兩面突起，不顯網(wǎng)脈；葉柄的基部膨大，多具槽[3]，見圖 1-1。據(jù)《全國中草藥匯編》記載，芒果葉中含芒果苷、槲皮素、沒食子酸、鞣質(zhì)、鞣花酸、抗壞血酸、奎尼酸以及莽草精、山奈醇等多種化學(xué)物質(zhì)[4]。其中 MFN 在芒果葉中的含量能夠達到 10.8%左右，是芒果葉中含量較高的化學(xué)成分和有效的生物活性成分。隨著對芒果葉進行不斷深入的研究，芒果葉中大量未被發(fā)現(xiàn)的化學(xué)成分也逐漸得到了分離與鑒定。

第 1 章 前 言果苷的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)（mangiferin, MFN），別名莞知母寧、芒果素，是一種具有四羥基吡，屬于雙苯吡酮類的黃酮化合物，主要從扁桃樹的葉、果實、樹皮，龍骨科和光石韋龍膽科等植物中分離得到，也是中藥知母的主要活性灰黃色針狀結(jié)晶；熔點 267~272 ℃；略溶于水和有機溶劑（如甲醇、乙非極性溶劑。芒果苷分子式為 C19H18O11，分子量為 422.33。芒果苷的 1-2。
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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1 龔云麒;高小惠;李瑩;張偉;楊兆祥;;正交試驗法優(yōu)選gg果葉中芒果苷的閃式提取工藝[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2015年07期

2 陳儀新;衛(wèi)智權(quán);陸廣利;鄧家剛;;芒果不同部位化學(xué)成分和藥理作用的研究近況[J];廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2015年02期

3 孫兆林;王曉;王岱杰;李佳;段文娟;;聚酰胺色譜結(jié)合高速逆流色譜分離制備

本文編號：2592328