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SPE-LC-MS/MS法測定人外周血單核細(xì)胞內(nèi)齊多夫定三磷酸化物

發(fā)布時間:2024-07-05 23:26
  目的:建立人外周血單核細(xì)胞(h PBMCs)內(nèi)齊多夫定三磷酸化物(ZDV-TP)的固相萃取-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(SPE-LCMS/MS)測定方法,并將其應(yīng)用于臨床試驗(yàn)中ZDV-TP在h PBMCs內(nèi)濃度的測定。方法:h PBMCs樣本采用強(qiáng)陰離子交換固相萃取小柱實(shí)現(xiàn)ZDV-TP與齊多夫定(ZDV)、齊多夫定一磷酸化物(ZDV-MP)和齊多夫定二磷酸化物(ZDV-DP)的分離后,加入酸性磷酸酶將其去磷酸化為等物質(zhì)的量的齊多夫定原藥。去磷酸化后的樣本經(jīng)HLB固相萃取小柱脫鹽處理后,采用Agilent XDB-C18色譜柱,以0.2%甲酸水溶液-甲醇為流動相進(jìn)行等度洗脫。采用ESI正離子模式檢測,離子監(jiān)測方式為MRM,用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z 267.9→m/z 126.8(ZDV)和m/z 247.9→m/z120.8(替硝唑,內(nèi)標(biāo))。結(jié)果:ZDV-TP在0.112 582.05 ng·m L-1(每106個細(xì)胞含ZDV-TP 0.0643 pmol),范圍內(nèi)線性良好(r=0.997 1),定量下限為0.112 5 ng·m L-1。日...

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1材料與方法
    1.1藥品與試劑
    2.2儀器
    2.3色譜-質(zhì)譜條件
    2.4分析方法
3方法學(xué)考察及應(yīng)用
    3.1特異性
    3.2線性及最低定量限
    3.3精密度及準(zhǔn)確度
    3.4回收率及基質(zhì)效應(yīng)
    3.5穩(wěn)定性考察
    3.6藥動學(xué)研究
4討論



本文編號:4001709

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