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Profilin-1靶向的多模態(tài)納米探針對動脈粥樣硬化斑塊的分子影像研究

發(fā)布時(shí)間:2024-06-23 10:59
  研究背景: 隨著人類生活水平和飲食習(xí)慣的改變,心血管疾病已成為威脅人類健康的重大疾病之一,具有高發(fā)病率和高致死率的特點(diǎn)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),全球2008年心血管疾病的死亡率占所有致死因素的30%左右。世界衛(wèi)生組織預(yù)測,到2020年心血管疾病將成為全世界的第一死因。而大量的研究證明,動脈粥樣硬化易損斑塊所導(dǎo)致的斑塊破裂、血栓形成和血管阻塞是引起急性心血管事件的主要因素。雖然隨著研究的不斷深入,動脈粥樣硬化斑塊的預(yù)防和治療已形成很多的共識,包括生活方式的干預(yù)、藥物治療、介入治療和外科手術(shù)治療等。但是由于易損斑塊具有隱匿性和破裂的突發(fā)性等特點(diǎn),其所導(dǎo)致的急性臨床事件仍然居高不下。因此,如何實(shí)現(xiàn)對易損斑塊形態(tài)和成分性質(zhì)的早期診斷,并進(jìn)行積極有效的干預(yù)是心血管研究領(lǐng)域亟待解決的關(guān)鍵科學(xué)問題。 近年來蓬勃發(fā)展的分子影像技術(shù),區(qū)別與傳統(tǒng)的影像技術(shù),它能夠從組織和細(xì)胞水平反映疾病的病理形成過程,為實(shí)時(shí)動態(tài)觀察動脈粥樣硬化斑塊的結(jié)構(gòu)和成分變化提供了有效的工具,同時(shí)還可以用于判斷預(yù)防和治療的效果。特異性的分子成像探針的構(gòu)建和制備對于疾病的分子影像診斷至關(guān)重要,是提高成像的特異性和敏感度的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。而合成分子探針...

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
    1.心血管疾病的流行病學(xué)、治療現(xiàn)狀以及面臨的問題
    2.分子影像學(xué)在動脈粥樣硬化中的應(yīng)用
    3.Profilin-1與心血管疾病
    4.納米顆粒與分子影像
第一部分 Profilin-1 在動脈粥樣硬化進(jìn)展中的作用及機(jī)制研究
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 試劑和材料
        1.3 儀器和設(shè)備
    2 方法
        2.1 動脈粥樣硬化(Atherosclerosis, AS)小鼠模型的構(gòu)建和驗(yàn)證
        2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        2.3 甘油三酯 (TG) 水平檢測
        2.4 血漿高密度脂蛋白(LDL-C)水平檢測
        2.5 血漿高密度脂蛋白(HDL-C)水平檢測:
        2.6 血管大體標(biāo)本油紅染色
        2.7 血管組織 HE 染色和油紅染色
        2.8 血管組織免疫熒光染色
        2.9 Western blot 法檢測血管壁組織中 profilin-1 等蛋白的表達(dá)水平
        2.10 小鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞系(MOVAS)的培養(yǎng)和鑒定
        2.11 Profilin-1 siRNA 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.12 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分組
        2.13 CCK-8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.14 Transwell 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        2.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    3 結(jié)果
        3.1 各組小鼠血脂水平的比較:
        3.2 Atorvastatin 治療可減小斑塊的面積
        3.3 Profilin-1 蛋白的表達(dá)水平與斑塊的負(fù)荷相關(guān)
        3.4 血管平滑肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察和鑒定
        3.5 Ox-LDL 預(yù)處理促進(jìn) VSMCs 胞內(nèi) profilin-1 的表達(dá)
        3.6 Realtime PCR 篩選出干擾效果最佳的 Profilin-1 siRNA
        3.7 ox-LDL 預(yù)處理促進(jìn) VSMCs 的增殖和遷移
        3.8 ox-LDL 激活 VSMCs 的 Profilin-1/MEK/ERK 信號通路
    4 討論
第二部分 靶向 profilin-1 多模態(tài)納米探針的構(gòu)建和表征
    1 材料
        1.1 試劑和材料
        1.2 儀器和設(shè)備
    2 方法
        2.1 DMSA-Fe3O4納米顆粒的制備
        2.2 DMSA-Fe3O4納米顆粒的表征
        2.3 DMSA-Fe3O4納米顆粒生物學(xué)特性檢測
        2.4 多模態(tài) PF1-DMSA-Fe3O4納米探針的合成
        2.5 多模態(tài) PF1-DMSA-Fe3O-4納米探針偶聯(lián)效率檢測
        2.6 多模態(tài) PF1-DMSA-Fe3O4納米探針在體內(nèi)器官的生物學(xué)分布
        2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    結(jié)果
        3.1 DMSA-Fe3O4 納米顆粒的表征
        3.2 DMSA-Fe3O4 納米顆粒的穩(wěn)定性和生物相容性
        3.3 Profilin-1 與 DMSA-Fe3O4 納米顆粒的偶聯(lián)效率
        3.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4 納米探針在體內(nèi)的各主要器官代謝
    4 討論
第三部分 profilin-1多模態(tài)納米探針對小鼠動脈粥樣硬化斑塊進(jìn)展的在體分子成像
    1 材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        1.2 試劑和材料
        1.3 儀器和設(shè)備
    2 方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)方案
        2.2 MOVAS 細(xì)胞與探針體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        2.3 不同濃度探針與相應(yīng) MRI 1/T2值的相關(guān)關(guān)系
        2.4 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探針對小鼠動脈粥樣硬化斑塊的磁共振成像
        2.5 圖像處理和數(shù)據(jù)采集
        2.6 血管組織普魯士藍(lán)染色
        2.7 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 PF1-Cy5.5- DMSA-Fe3O4-NP 探針能夠特異性的與 MOVAS 細(xì)胞結(jié)合
        3.2 不同濃度探針與相應(yīng) 1/T2值的相關(guān)關(guān)系
        3.3 小鼠頸動脈斑塊 MRI T2成像
        3.4 小鼠頸動脈斑塊普魯士藍(lán)染色
        3.5 小鼠頸動脈斑塊熒光成像
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個人簡歷和研究成果
致謝



本文編號:3995365

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