本文選題：主動縮窄術　切入點：心室重構　出處：《武漢大學》2016年博士論文

【摘要】：心室重構是心力衰竭發(fā)展的基礎。如何控制、延緩和逆轉(zhuǎn)心室重構,是治療心力衰竭的關鍵。丹參素(DSS)是一種水溶性酚性芳香酸類化合物,主要來源于唇形植物丹參和甘西鼠尾草的根。丹參素是一種天然活性產(chǎn)物且具有清除氧自由基、降解過氧化物及抗氧化特性,其抗氧化活性強于維生素C。研究報道丹參素通過其抗氧化特性和心臟保護效應抑制異丙腎上腺素誘導的心室肥厚,顯著降低心臟重量／體重比(HW/BW)和左心室重量/體重比(LVW/BW)。這些研究結(jié)果均提示丹參素具有心臟保護作用。但是,丹參素對壓力負荷后心室重構的影響尚未見報道。本研究通過主動脈縮窄術(TAC)構建心室重構模型,觀察丹參素對壓力負荷后心功能及心室重構的影響,并探討其機制。第一部分丹參素對壓力負荷后小鼠心功能及心室重構的影響目的：探討丹參素對壓力負荷后小鼠心功能及心室重構的影響。方法：將C57BL/6雄性小鼠隨機分成Sham-Saline組、Sham-DSS組、PAC-Saline組和TAC-DSS組,通過主動脈縮窄術制備小鼠心室重構模型,術后根據(jù)分組給予不同處理8周。心臟超聲檢測心臟結(jié)構和心臟功能;心臟超聲后處死小鼠,留取心臟組織標本。觀察各組小鼠心率(HR)、體重(BW)、肺臟重量/體重比(LW/BW)、心臟重量/體重比(HW/BW)和心臟重量/脛骨長度比(HW/TL);RT-PCR檢測ANP(心房鈉尿肽)、BNP(B型利鈉肽)、β-MHC(β-肌球蛋白重鏈)和α-MHC(α-肌球蛋白重鏈)的表達；HE染色觀察各組小鼠心臟體積和心肌細胞橫截面積。結(jié)果：(1)各組小鼠HR和BW之間差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)；(2)TAC-Saline組小鼠LW/BW、HW/BW和HW/TL均高于Sham-Saline組(p0.05),而TAC-DSS組較TAC-Saline組降低(p0.05);(3)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組的心功能減退和心室腔增大(p0.05),AC-DSS組心臟超聲指標優(yōu)于TAC-Saline組(p0.05);(4)RT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn),相比Sham-Saline組,TAC-Saline組ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達增加(p0.05)和α-MHC mRNA的表達降低(p0.05)；而TAC-DSS組較TAC-Saline組ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達降低(p0.05)和α-MHC mRNA的表達升高(p0.05)；(5)HE染色顯示主動脈縮窄術后心臟體積和心肌細胞橫截面積增大,而丹參素能夠降低主動脈縮窄術引起的心臟體積和心肌細胞橫截面積的增大。結(jié)論：丹參素干預可改善壓力負荷后小鼠的心功能和心室重構。第二部分丹參素對壓力負荷后小鼠心室重構時氧化應激、心肌細胞凋亡和心肌纖維化的影響及作用機制的研究目的：探討丹參素對壓力負荷后小鼠心室重構時氧化應激、心肌細胞凋亡和心肌纖維化的影響及作用機制的研究。方法：將C57BL/6雄性小鼠隨機分成Sham-Saline組、Sham-DSS組、TAC-Saline組和TAC-DSS組,通過主動脈縮窄術制備小鼠心室重構模型,術后根據(jù)分組給予不同處理8周。心臟超聲后處死小鼠,留取心臟組織標本。(1)TUNEL染色檢測各組小鼠心肌細胞凋亡情況和DCFH-DA檢測心肌細胞內(nèi)ROS水平,Western blot檢測Caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡相關蛋白表達；(2)Western blot檢測Nrf2、HO-1、NQO-1和y-GCS的蛋白表達；(3)RT-PCR檢測結(jié)締組織生長因子(CTGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達；(4)Western blot檢測TGF-β1/Smad信號通路相關蛋白表達；(5)Masson染色檢測心肌纖維化程度。結(jié)果：(1)TUNEL染色發(fā)現(xiàn),與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組心肌細胞凋亡增加(p0.05),TAC-DSS組心肌細胞凋亡低于TAC-Saline組(p0.05)；與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組心肌組織中的ROS水平升高(p0.05),而TAC-DSS組心肌組織中的ROS水平低于TAC-Saline組(p0.05)：與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組Bax和Caspase-3蛋白表達升高(p0.05),而TAC-DSS組較TAC-Saline組的Caspase-3和Bax蛋白表達減少(p0.05),各組Bcl-2蛋白表達之間無差異;(2)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組Nrf2和HO-1蛋白表達升高(p0.05),NQO-1和γ-GCS蛋白表達下降(p0.05),而TAC-DSS組Nrf2、HO-1、NQO-1和y-GCS蛋白表達均高于TAC-Saline組(p0.05);(3)與Sham-Saline組相比,TAC-Saline組TGF-β1、CTGF、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達升高(p0.05),而TAC-DSS組TGF-β1、 CTGF、Ⅰ型膠原蛋白和Ⅲ型膠原蛋白mRNA的表達低于TAC-Saline組(p0.05);(4)與Sham-Saline組比較,TAC-Saline組Smad2和Smad3磷酸化水平升高(p0.05)、TGF-β1蛋白表達增加(p0.05)和Smad7蛋白表達下降(p0.05)；而TAC-DSS組較TAC-Saline組的Smad2和Smad3磷酸化水平降低(p0.05)、TGF-β1蛋白表達減少(p0.05)和Smad7蛋白表達升高(p0.05)；(5)Masson染色提示主動脈縮窄術后心肌纖維化程度增加,而丹參素能夠降低主動脈縮窄術所致的心肌纖維化。結(jié)論：丹參素可降低壓力負荷引起的心肌細胞凋亡、氧化應激和心肌纖維化。
[Abstract]:The effects of danshensu on cardiac function and ventricular remodeling in mice after pressure loading were studied . The effects of danshensu on cardiac function and ventricular remodeling in rats after pressure loading were studied .
Results : ( 1 ) There was no significant difference between HR and BW ( p < 0.05 ) .
( 4 ) Compared with Sham - Saline group , the expression of ANP , BNP , 尾 - MHC mRNA in TAC - Saline group was increased ( p . 05 ) and the expression of 偽 - MHC mRNA decreased ( p . 05 ) .
Compared with TAC - Saline group , the expression of ANP , BNP , 尾 - MHC mRNA and the expression of 偽 - MHC mRNA in TAC - DSS group increased ( p < 0.05 ) .
Objective : To study the effects of danshensu on myocardial cell apoptosis and myocardial fibrosis in mice after pressure loading .
( 2 ) Western blot was used to detect protein expression of Nrf2 , HO - 1 , NQO - 1 and y - GCS ;
( 3 ) RT - PCR was used to detect the expression of connective tissue growth factor ( ctgf ) , transforming growth factor - beta1 ( TGF - 尾1 ) , type 鈪，

本文編號：1704344