發(fā)布時間：2018-09-11 10:25

【摘要】：目的觀察大鼠腎臟缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)損傷中腎小管上皮細胞的自噬激活情況,探討其對腎臟I/R損傷發(fā)揮保護性作用的分子機制。方法將40只雄性Wistar大鼠隨機分為4組:假手術組(Sham)、I/R組、氯喹干預組(I/R+CQ)和雷帕霉素干預組(I/R+Rap)。常規(guī)方法建立大鼠腎臟I/R損傷模型,再灌注24 h后留取各組大鼠血和腎臟標本。血標本用于尿素氮(BUN)和血肌酐(Scre)含量檢測;腎組織標本行HE染色,觀察病理學損傷情況;TUNEL法檢測腎小管上皮細胞凋亡的改變;采用免疫組化法檢測Beclin-1和Caspase-3蛋白表達,透射電鏡觀察大鼠腎臟自噬泡的形成情況。結果與I/R組相比,I/R+CQ組BUN和Scre明顯升高(P0.05,P0.01),腎組織損傷積分增加(P0.01),TUNEL陽性細胞數(shù)增多(P0.05),Beclin-1蛋白表達減弱(P0.01),Caspase-3蛋白表達增強(P0.01),電鏡下自噬泡數(shù)量較少(P0.05);I/R+Rap組BUN和Scre顯著降低(P0.01),腎組織損傷積分減低(P0.05),TUNEL陽性細胞數(shù)減少(P0.05),Beclin-1蛋白表達增強(P0.01),Caspase-3蛋白表達減弱(P0.01),自噬泡數(shù)量明顯增多(P0.01)。結論自噬激活在腎臟I/R損傷過程中可通過抑制凋亡而發(fā)揮的保護作用,其機制可能涉及Beclin-1及Caspase-3等蛋白的表達調(diào)控。
[Abstract]:Objective to observe the activation of autophagy of renal tubular epithelial cells during renal ischemia-reperfusion (ischemia reperfusion,I/R) injury in rats and to explore the molecular mechanism of its protective effect on renal I / R injury. Methods Forty male Wistar rats were randomly divided into four groups: sham operation group (Sham) / I / R group), chloroquine intervention group (I / R CQ) and rapamycin intervention group (I / R Rap). The rat kidney I / R injury model was established by routine method. The blood and kidney samples of each group were collected after 24 h reperfusion. Blood samples were used to detect the contents of urea nitrogen (BUN) and creatinine (Scre). Renal tissue specimens were stained with HE to observe the pathological damage and Tunel method was used to detect the apoptosis of renal tubular epithelial cells. The expression of Beclin-1 and Caspase-3 protein was detected by immunohistochemical method. The formation of autophagy in rat kidney was observed by transmission electron microscope. Results compared with the I / R group, the BUN and Scre in the I / R CQ group were significantly higher (P0.05, P0.01), the number of Tunel positive cells was increased (P0.01) (P0.05), the expression of Caspase-3 protein was significantly decreased (P0.01), and the number of autophagic vesicles was significantly decreased in the IP-R Rap group (P0.05). (P0.01), the number of Tunel positive cells decreased (P0.05), the expression of Beclin-1 protein decreased (P0.01) and the number of autophagy increased significantly (P0.01). Conclusion autophagy may play a protective role in the process of renal I / R injury by inhibiting apoptosis, and its mechanism may be related to the regulation of Beclin-1 and Caspase-3 protein expression.
【作者單位】： 北京大學第三醫(yī)院檢驗科;
【基金】：國家自然科學基金(81271903) 國家科技支撐計劃課題(2012BA137B01)
【分類號】：R692

【參考文獻】

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本文編號：2236426