發(fā)布時(shí)間：2018-09-11 11:26

【摘要】：衛(wèi)生部統(tǒng)計(jì)信息顯示，我國腎癌發(fā)病率位居男性惡性腫瘤發(fā)病率前十位，且呈現(xiàn)逐年上升趨勢。在泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤中，腎癌發(fā)病率僅次于膀胱癌。早期或中期腎癌的治療與其他腫瘤相同，均以外科手術(shù)治療為主。晚期腎癌的治療則明顯區(qū)別于其他腫瘤。由于腎癌對順鉑等傳統(tǒng)化療藥物普遍耐藥，，所以晚期腎癌的治療無法像其他腫瘤一樣以化療為主，只能以免疫治療和靶向治療為主，這也使得晚期腎癌治療效果欠佳。 與腎癌不同，睪丸癌的化療效果非常好。以順鉑為基礎(chǔ)的化療方案對睪丸癌的治愈率可達(dá)90%以上。睪丸癌對順鉑的高度敏感性與其DNA修復(fù)蛋白XPF表達(dá)水平較低密切相關(guān)。XPF是一種重要的DNA修復(fù)蛋白，主要參與核苷酸切除修復(fù)途徑。XPF表達(dá)水平降低能夠?qū)е录?xì)胞DNA修復(fù)能力降低，從而使其對DNA損傷類化療藥物的敏感性提高。低表達(dá)XPF的睪丸癌對順鉑高度敏感，該現(xiàn)象提示腎癌對順鉑等化療藥物耐藥可能與其XPF表達(dá)水平較高有關(guān)。如果這種假設(shè)成立，那么可以通過降低腎癌XPF表達(dá)水平來提高其順鉑敏感性，使順鉑應(yīng)用于腎癌治療成為可能。 運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色法檢測癌組織及癌旁組織中XPF表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，在癌組織中，腎癌XPF陽性表達(dá)率最高，膀胱癌次之，睪丸癌最低；在癌旁組織中，腎癌癌旁組織XPF陽性表達(dá)率最高，膀胱癌癌旁次之，睪丸癌癌旁最低。利用蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測多種腎癌細(xì)胞和膀胱癌細(xì)胞中XPF表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，腎癌細(xì)胞的XPF表達(dá)水平高于膀胱癌細(xì)胞。采用克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測癌細(xì)胞的順鉑敏感性發(fā)現(xiàn)，腎癌細(xì)胞的順鉑敏感性低于膀胱癌細(xì)胞。通過shRNA干擾技術(shù)成功構(gòu)建穩(wěn)定低表達(dá)XPF的腎癌細(xì)胞株ACHN-shXPF，其順鉑敏感性顯著提高。選用裸鼠皮下移植瘤模型檢測ACHN-shXPF細(xì)胞在體順鉑敏感性發(fā)現(xiàn)，其在體順鉑敏感性提高。借助宿主反應(yīng)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞周期檢測實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞凋亡檢測實(shí)驗(yàn)分別對ACHN-shXPF細(xì)胞的DNA修復(fù)能力、順鉑誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯情況和順鉑誘導(dǎo)凋亡情況進(jìn)行檢測，結(jié)果示ACHN-shXPF細(xì)胞DNA修復(fù)能力降低，順鉑誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯異常，順鉑誘導(dǎo)凋亡增加。另外，細(xì)胞衰老染色實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，ACHN-shXPF衰老細(xì)胞比例增高。 綜合以上結(jié)果，腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞的XPF表達(dá)水平越高，其順鉑敏感性越低，即XPF表達(dá)水平與順鉑敏感性負(fù)相關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)和在體實(shí)驗(yàn)均證實(shí)降低XPF表達(dá)水平可顯著提高腎癌細(xì)胞的順鉑敏感性。通過降低XPF表達(dá)水平使順鉑敏感性提高的分子機(jī)制包括細(xì)胞DNA修復(fù)能力降低、細(xì)胞周期在順鉑誘導(dǎo)下異常阻滯和順鉑誘導(dǎo)凋亡增加。衰老細(xì)胞比例增加可能也是造成順鉑敏感性升高的機(jī)制之一。本研究提示，通過設(shè)計(jì)小分子藥物干擾腎癌細(xì)胞XPF表達(dá)可提高其順鉑敏感性，使順鉑成功應(yīng)用于腎癌治療。
[Abstract]:Statistics from the Ministry of Health show that the incidence of renal cell carcinoma in China ranks among the top ten male malignant tumors and is on the rise year by year.Among the tumors of the urogenital system, the incidence of renal cell carcinoma is second only to that of bladder cancer.The treatment of early or middle stage renal cell carcinoma is the same as that of other tumors, and surgical treatment is the main treatment.The treatment of advanced renal cell carcinoma is obvious. Different from other tumors, renal cell carcinoma is generally resistant to cisplatin and other traditional chemotherapy drugs, so the treatment of advanced renal cell carcinoma can not be as chemotherapy-based as other tumors, only immunotherapy and targeted therapy, which makes the treatment of advanced renal cell carcinoma poor.
Unlike renal cell carcinoma, testicular cancer is very effective in chemotherapy. The cure rate of testicular cancer can reach more than 90% with cisplatin-based chemotherapy. The high sensitivity of testicular cancer to cisplatin is closely related to the low expression of DNA repair protein XPF. XPF is an important DNA repair protein, mainly involved in nucleotide excision repair pathway. XPF table Low expression of XPF in testicular cancer is highly susceptible to cisplatin, suggesting that resistance to chemotherapy drugs such as cisplatin in renal cancer may be associated with a higher level of XPF expression. The expression level of XPF in renal cell carcinoma can enhance the sensitivity of cisplatin and make cisplatin possible for the treatment of renal cell carcinoma.
The expression of XPF was detected by immunohistochemical staining in cancer tissues and adjacent tissues. It was found that the expression of XPF was the highest in renal carcinoma, followed by bladder cancer and testicular cancer, and the highest in adjacent tissues, followed by bladder cancer and testicular cancer. The expression of XPF in renal cell carcinoma and bladder cancer cells was higher than that in bladder cancer cells. The cisplatin sensitivity of renal cell carcinoma cells was lower than that of bladder cancer cells by clone formation assay. The sensitivity of ACHN-shXPF cell line to cisplatin was significantly increased. The sensitivity of ACHN-shXPF cells to cisplatin in vivo was detected by subcutaneous transplantation tumor model in nude mice. Cell cycle arrest and cisplatin-induced apoptosis were detected. The results showed that the DNA repair ability of ACHN-shXPF cells decreased, the cell cycle arrest induced by cisplatin was abnormal, and the apoptosis induced by cisplatin was increased.
In conclusion, the higher the expression level of XPF in tumor tissue and tumor cells, the lower the sensitivity to cisplatin, that is, the negative correlation between the expression level of XPF and the sensitivity to cisplatin. Molecular mechanisms include decreased DNA repair, abnormal cell cycle arrest induced by cisplatin, and increased apoptosis induced by cisplatin. Increasing the proportion of senescent cells may also be one of the mechanisms responsible for the increased sensitivity to cisplatin. This study suggests that interfering with the expression of XPF in renal cancer cells by designing small molecule drugs may enhance the sensitivity to cisplatin. Platinum is successfully applied to the treatment of renal cell carcinoma.
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R737.11

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 孔易;白江濤;鄭紀(jì)寧;;ERCC1基因多態(tài)性與大腸癌化療療效相關(guān)性的研究進(jìn)展[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年05期

2 Jeffrey Hannah;Peng-Bo Zhou;;The CUL4A ubiquitin ligase is a potential therapeutic target in skin cancer and other malignancies[J];Chinese Journal of Cancer;2013年09期

3 劉海濤;陳余清;李殿明;李偉;王效靜;黃禮年;閔生萍;張永;徐曉玲;孫耕耘;;RRM1、β-Tubb3、ERCC1表達(dá)在Ⅲb/Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌個(gè)體化治療中的研究[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年12期

4 張喬;袁方;黃亞琴;陳志文;楊勁;;DNA損傷修復(fù)蛋白XPF影響腎癌細(xì)胞順鉑耐藥[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年09期

5 時(shí)粒笠;鐘德勝;古春萍;余樂;;塞來昔布拮抗卡鉑在食管癌細(xì)胞的細(xì)胞毒作用[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年06期

6 范寧娟;項(xiàng)萍;段敏;;應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的4種方法的比較[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2014年32期

7 田朗;朱詠貴;成亮;楊作成;;CVB3感染對Hela細(xì)胞凋亡的影響[J];湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年03期

8 許艷華;劉津;陳華群;;雷公藤紅素抑制C2C12細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)其凋亡[J];南京師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年03期

9 李賓;蘇婷婷;王忠民;;ERCC1蛋白及mRNA在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2013年04期

10 高迪;徐玉清;;非小細(xì)胞肺癌鉑類抗腫瘤藥物耐藥的分子機(jī)制進(jìn)展[J];臨床肺科雜志;2014年02期

相關(guān)會議論文 前2條

1 Jiang-Feng Wang;Jian-Guo Feng;Jing Han;Bei-Bei Zhang;Wei-Min Mao;;The Molecular Mechanisms of TanshinoneⅡA on the Apoptosis and Arrest of Human Esophageal Carcinoma Cells[A];抗腫瘤藥物研究新進(jìn)展與腫瘤個(gè)性化藥物治療論壇論文集[C];2013年

2 Huanxi Shen;Jinglian Cao;Zhiqiang Hong;Kai Liu;Jian Shi;Lu Ding;Hengdong Zhang;Cheng Du;Qian Li;Zhengdong Zhang;Baoli Zhu;;A Functional Ser326Cys Polymorphism in hOGG1 Is Associated with Noise-Induced Hearing Loss in a Chinese Population[A];第十三次全國勞動衛(wèi)生與職業(yè)病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2014年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 葛睿;DBDCT初步毒代動力學(xué)、神經(jīng)毒性作用及其機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2013年

2 王云霞;XAF1在卵巢癌組織中的表達(dá)及作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2013年

3 劉志明;廣西三緯度地區(qū)人群AFB_1暴露及其與DNA氧化損傷和修復(fù)關(guān)系的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

4 周必勝;幾個(gè)血管、淋巴管相關(guān)基因的調(diào)控與功能研究[D];華中科技大學(xué);2013年

5 陳宏杰;亞硒酸鈉致白內(nèi)障發(fā)病機(jī)理的初步研究[D];華中科技大學(xué);2013年

6 李丕順;ABH2調(diào)控rDNA轉(zhuǎn)錄與UHRF家族在DNA甲基化中的作用研究[D];華東師范大學(xué);2013年

7 姜洪;氫氣抗糖基化終末產(chǎn)物對內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 唐春蘭;SHP2在順鉑誘導(dǎo)的肺癌多藥耐藥中的作用及其分子機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 喬鑫;非經(jīng)典金屬抗腫瘤化合物的合成、生物活性評價(jià)及作用機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

10 張學(xué)農(nóng);化合物RY10-4部分作用機(jī)制及抗腫瘤活性的研究[D];華中科技大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王娜;表皮生長因子受體信號通路與卵巢癌細(xì)胞SKOV3/DDP耐藥的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 張建鋒;XRCC6基因多態(tài)性與結(jié)直腸癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

3 劉曉艷;四妙勇安湯合生脈飲對缺氧乳鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 石麗君;卵巢癌順鉑耐藥裸鼠模型的構(gòu)建及差異因子篩選[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 趙士俠;赭曲霉毒素A誘導(dǎo)BHK細(xì)胞凋亡及維生素C對其毒性干預(yù)的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 許玲;κ-卡拉膠寡糖對小膠質(zhì)細(xì)胞活化的抑制作用[D];大連大學(xué);2013年

7 蔣平;骨肉瘤分子標(biāo)志物表達(dá)特點(diǎn)及其靶向治療作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

8 梁鴻;下調(diào)EIF3B的表達(dá)抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

9 徐曉東;異丙酚對離體海馬神經(jīng)元存活及p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活性的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

10 宋文輝;ERCC1和BRCA1在晚期尿路上皮癌中表達(dá)的臨床意義及與鉑類化療預(yù)后關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號：2236567