狂犬病病毒（Rabies Virus，RABV），為彈狀病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病毒屬（Lyssavirus）成員，是一種高度嗜神經(jīng)病毒，沿神經(jīng)通路傳播，侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS），造成急性致命性感染�？袢“l(fā)生在全球150多個(gè)國家和地區(qū)。每年全世界有超過55,000人死于狂犬病。RABV感染能引起各種致命的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，患者最終死于循環(huán)衰竭。盡管狂犬病造成腦脊髓炎的災(zāi)難性的臨床結(jié)果，但事實(shí)上，炎性變化和神經(jīng)元的退行性變化很少觀察到或在自然條件下并不存在。有研究表明在自然條件下，神經(jīng)元功能障礙，而不是神經(jīng)元死亡，很可能是引起臨床疾病和狂犬病致命的結(jié)果的原因。雖然目前也存在幾個(gè)有理有據(jù)的假設(shè)，但RABV感染神經(jīng)元引起功能障礙的根本原因尚未得到證實(shí)。 微RNA（microRNA，miRNA）是一類廣泛存在的長約22nt的內(nèi)源性非編碼單鏈RNA，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因表達(dá)。目前在各種生物中已經(jīng)確定了成千上萬種miRNA，其參與了細(xì)胞分化、增殖、凋亡和病原感染等諸多生物學(xué)進(jìn)程的調(diào)控。大量的研究結(jié)果表明，病毒在感染過程中會(huì)引起細(xì)胞miRNA表達(dá)模式的改變，這可能是病毒成功感染和致...

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圖1.1直接免疫熒光檢測(cè)結(jié)果

AB圖1.1直接免疫熒光檢測(cè)結(jié)果Fig1.1DirectimmunofluorescenceofN2AcellsinfectedbyRABVA：對(duì)照組；B：接毒組1.3.2RABV毒力測(cè)定為了確定本實(shí)驗(yàn)室所保存RABV的毒力，我們?cè)贜2A細(xì)胞上....

圖1.2RABV感染小鼠原代神經(jīng)元免疫組化鑒定

第二篇研究?jī)?nèi)容1.3.3RABV感染原代神經(jīng)元的免疫組化檢測(cè)為了驗(yàn)證RABV能否有效感染原代神經(jīng)元，我們應(yīng)用免疫組化的方法對(duì)RABV感染的小鼠原代神經(jīng)元進(jìn)行鑒定，結(jié)果表明10TCID50的劑量可以有效感染原代神經(jīng)元（圖1.2），并成功建立了RABV感染原代神....

圖1.3總RNA瓊脂糖凝膠檢測(cè)結(jié)果

V感染小鼠原代神經(jīng)元免疫組化鑒定icaldetectioninRABV-infectedprimaryA.對(duì)照組；B.接毒組元總RNA的質(zhì)量鑒定及濃度測(cè)定A的質(zhì)量能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)的要求，我對(duì)總RNA進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果如圖1.3和到基因芯片的需求，為芯片實(shí)....

圖1.4總RNA質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果

圖1.4總RNA質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果Fig1.4RNAqualitycontrolanalysisA:正常對(duì)照；B:感染后48h；C.感染后96h；D.感染后144h感染小鼠原代神經(jīng)元miRNA表達(dá)譜變化了探索RABV感染小鼠原代神經(jīng)元后miRNA表達(dá)譜....

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