弓形蟲(T.gondii)病是一種呈世界性分布的人畜共患病,人群感染普遍,對孕婦和免疫力低下者,危害很大;200多種動物都能感染該病,多數(shù)呈隱性感染,但豬暴發(fā)感染弓形蟲后,可引起大批死亡。弓形蟲病嚴重威脅著人類的健康,同時也給畜牧業(yè)造成了很大的損失。目前,臨床上診斷弓形蟲病,依賴于血清學診斷,主要包括間接血凝試驗、間接熒光抗體試驗、染色試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗,但這些免疫檢測技術(shù)費時、費力,還需要特殊儀器設(shè)備輔助,不適合大面積推廣應(yīng)用。膠體金技術(shù)是一種新型快速診斷技術(shù),已經(jīng)在弓形蟲病的診斷上得到使用,臨床檢測時操作簡便、快速,無需相關(guān)專業(yè)的技術(shù)人員和貴重的儀器設(shè)備,適合于基層大面積檢測、普查等,從而得到了快速發(fā)展。臨床上診斷弓形蟲病時經(jīng)常檢測血清中的抗體,但是抗體可以在體內(nèi)長期存在,不能區(qū)分現(xiàn)癥感染或既往感染,而弓形蟲循環(huán)抗原存在于急性感染弓形蟲病的血清中,適合急性病的診斷。本研究利用膠體金標記技術(shù),運用免疫學方法,根據(jù)層析原理,結(jié)合單克隆抗體制備和選用新材料等多種方法,建立了一種新的檢測弓形蟲循環(huán)抗原的試紙條診斷方法。利用本實驗室制備和保存的D5和B6兩株雜交瘤細胞株,分別制備、純化抗...

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１?含有弓形蟲速殖子的腹腔液（１０Ｘ４０）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｆｌｕｉｄ?ｏｆ?ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ?ｔａｃｈｙｚｏｉｔｅ?（１０ｘ４０）??

２．３．２速殖子可溶性抗原、純化后的單抗Ｄ５、Ｂ６濃度??經(jīng)ＢＣＡ蛋白濃度試劑盒測定后，根據(jù)標準蛋白濃度的測定結(jié)果（見表２－１），繪制標??準曲線（見圖２－２），由測得的速殖子抗原、單抗Ｄ５、單抗Ｂ６的０Ｄ５ｄｌ，帶入公式得到的??濃度分別為：〇？?６７?ｍｇ／ｍＬ、１．?９６?....

圖２－２蛋白濃度標準曲線??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ｓｔａｎｄａｒｄ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??

?；??Ｖ每??圖２－１?含有弓形蟲速殖子的腹腔液（１０Ｘ４０）??Ｆｉｇ．?２－１?Ｔｈｅ?ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ?ｆｌｕｉｄ?ｏｆ?ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ?ｔａｃｈｙｚｏｉｔｅ?（１０ｘ４０）??２．３．２速殖子可溶性抗原、純化后的單抗Ｄ５、Ｂ６濃度??經(jīng)ＢＣＡ蛋白濃度試劑盒測定....

圖２－３?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ電泳結(jié)果??

Ｂ６?單抗?１．９８６?１．７６３?１．２７５?０．８５３?０．６３２?０．３２１?１．０８９?０．０６４?０．０９１??２．３．５?Ｄ５、Ｂ６單抗純度的鑒定??通過ＳＤＳ－－ＰＡＧＥ電泳分析單抗純化前后的純度，見圖２－３，初步提純后腹水中雜蛋??白明顯減少，而親和層析后沒有雜蛋....

圖３－１試紙條組裝示意圖??

膠體金試紙條主要由樣品墊、結(jié)合墊、ＮＣ膜、吸水紙和ＰＶＣ底板按一定的順序組??裝而成。各部分均需要按一定規(guī)格裁剪，并通過不同方式處理。??如圖３－１所示：樣品墊、結(jié)合墊、玻璃纖維膜、吸水紙依次粘貼組裝到ＰＶＣ底板（長??７．?２Ｘ寬０．５?ｃｍ）上，相接的兩個重疊為１ｍｍ，同時在....

本文編號：3991743