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褐水螅(Hydra.fusca)中5-HT及其合成酶TPH的免疫組織化學定位研究

發(fā)布時間:2024-06-03 03:57
  本研究運用樹脂石蠟(Colophiny-Paraffin, CP)組織包埋切片技術,采用免疫組化鏈霉菌抗生物素蛋白—過氧化物酶雙染法,對腔腸動物門中典型模式生物褐水螅(Hydra. fusca)的擴散神經系統(tǒng)中5-HT及其合成酶TPH進行免疫組織化學定位分析。褐水螅具有典型的兩胚層解剖學特征,由外部的假復層外胚層和內部的內胚層組成,兩胚層之間由中膠層分隔開。兩胚層中的主要細胞類型為皮肌細胞、感覺細胞、間細胞、神經細胞及刺細胞。褐水螅的細胞層在結構上具有顯著的區(qū)域化特征,如,體柱區(qū)域Ⅰ與區(qū)域Ⅱ相比,外胚層中的細胞種類更齊全,皮肌細胞、感覺細胞多,排列緊密,細胞層較厚;內胚層中細胞排列緊密但細胞層的高度小于區(qū)域Ⅱ。免疫組化實驗結果顯示,大多數(shù)褐水螅呈強5-HT免疫反應,表現(xiàn)出穩(wěn)定的反應模式,所有免疫反應均發(fā)生在外胚層中和中膠層外沿;對羊抗TPH多克隆抗體的免疫陽性反應同樣顯著,且反應模式與5-HT相吻合。成功標記了大量的5-HT/TPH免疫陽性感覺細胞、刺細胞及神經細胞。陽性神經細胞主要位于體柱區(qū)外胚層基部,胞體較小,呈扁橢圓形或三角形,幾乎全部為雙極神經元,具有較短的、沿中膠層平行方向向...

【文章頁數(shù)】:33 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
引言
1. 材料與方法
    1.1 實驗材料
        1.1.1 實驗樣本
        1.1.2 實驗器材
        1.1.3 實驗藥品
    1.2 標本制備過程
    1.3 抗體來源
    1.4 免疫組織化學實驗過程
    1.5 5-HT/TPH共定位分析
    1.6 對照試驗
2. 結果
    2.1 褐水螅的主要結構特征的描述
        2.1.1 外胚層(ectoderm)
        2.1.2 內胚層(entoderm)
        2.1.3 中膠層(mesoglea)
        2.1.4 褐水螅細胞元素區(qū)域化特征
    2.2 5-HT/TPH免疫反應(5-HT/TPH-IR)細胞的形態(tài)學分析
    2.3 5-HT/TPH-IR細胞區(qū)域化分布特點
        2.3.1 口端
        2.3.2 體柱區(qū)域Ⅰ
        2.3.3 體柱區(qū)域Ⅱ
        2.3.4 基盤區(qū)
    2.4 5-HT/TPH-IR異常表達
3. 討論
    3.1 褐水螅神經網中存在特異性TPH
    3.2 芳香氨基酸羥化酶基因家族的進化問題
    3.3 褐水螅中5-HT的功能推測
    3.4 異常表達的5-HT/TPH免疫反應
    3.5 5-HT的合成來源
參考文獻
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致謝



本文編號:3988139

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