發(fā)布時間：2024-06-02 02:51

　　本研究為建立一種檢測豬瘟病毒(CSFV)和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的二重熒光(LAMP)技術,根據已發(fā)表的CSFV E2基因和PRRSV NSP2基因序列保守區(qū)域,分別設計并合成了2組針對CSFV和PRRSV序列的特異性引物和2條探針,在CSFV探針5′端標記FAM熒光基團,3′端標記BHQ1淬滅基團,PRRSV探針5′端標記CY5.5熒光基團,3′端標記BHQ2淬滅基團。用設計的引物、探針及反應試劑組成反應體系,建立CSFV和PRRSV二重熒光LAMP檢測方法。對建立的方法進行特異性、敏感性、干擾性試驗,并用臨床樣品進行驗證。結果顯示,本研究成功建立了鑒別CSFV和PRRSV的二重熒光LAMP方法,該方法只檢測出CSFV(綠色)或PRRSV(紅色)或CSFV和PRRSV混感(黃色),而對照毒株則無熒光顏色出現,具有較好的特異性。敏感性檢測CSFV或PRRSV的含量濃度,其最低檢測濃度均為100 copies/mL,敏感性較好。干擾性結果顯示,高低不同的模板濃度不影響本方法的檢測擴增,干擾性小。對112份采集的臨床樣品進行檢測,結果,檢出CSFV陽性樣品41份,PRRSV陽...

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