發(fā)布時(shí)間：2020-12-01 14:50

氧化應(yīng)激能夠?qū)е聞?dòng)物機(jī)體發(fā)生系統(tǒng)性和代謝性疾病,腸道的抗氧化酶系統(tǒng)在氧化應(yīng)激中起重要作用。大量研究表明,魔芋甘露低聚糖可以促進(jìn)腸道有益菌、抑制有害菌的生長,并且具有清除活性氧自由基的能力�？莶菅挎邨U菌對動(dòng)物機(jī)體有多種益生功能,在加強(qiáng)機(jī)體免疫功能、減小機(jī)體氧化應(yīng)激程度、阻止致病菌的生長定殖等方面具有重要作用。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn),魔芋甘露低聚糖對枯草芽孢桿菌的生長有著顯著的促進(jìn)作用,兩者聯(lián)合添加對腸上皮細(xì)胞活性、炎性損傷等方面具有明顯的修復(fù)效果。在前期研究的基礎(chǔ)上,本研究利用LPS刺激結(jié)腸癌上皮Caco-2細(xì)胞,建立細(xì)胞氧化損傷模型,探討魔芋甘露低聚糖和枯草芽孢桿菌對腸上皮細(xì)胞氧化損傷的修復(fù)作用,并建立LPS誘導(dǎo)的小鼠急性損傷模型,進(jìn)一步探討兩者聯(lián)合添加對動(dòng)物機(jī)體的協(xié)同修復(fù)以及防護(hù)作用。主要研究內(nèi)容如下:1.腸上皮細(xì)胞氧化損傷模型的構(gòu)建。利用不同濃度LPS刺激Caco-2細(xì)胞不同時(shí)間,檢測細(xì)胞的氧化和抗氧化指標(biāo),研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),LPS可引起氧化標(biāo)志物MDA的表達(dá)升高,抗氧化酶SOD酶活性降低,最終確定LPS誘導(dǎo)Caco-2細(xì)胞氧化損傷的最佳作用濃度是2μg/m L,作用時(shí)間為8h。并通過Q... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【文章類型】：碩士

【部分圖文】：

LPS最佳作用濃度和時(shí)間的確定本研究進(jìn)一步用2μg/mLLPS處理Caco-2細(xì)胞8h，通過qPCR在mRNA水

圖 4-2 LPS 誘導(dǎo) Caco-2 細(xì)胞的氧化損傷模型指標(biāo)檢測Figure 4-2. LPS induced oxidative damage in Caco-2 cells.4.1.2 LPS 誘導(dǎo)氧化損傷后 Nrf2 及下游抗氧化基因的表達(dá)變化2μg/mL LPS 作用于 Caco-2 細(xì)胞 8h，Nrf2 轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)（圖 A），Keap1錄水平下調(diào)（圖 B），Nrf2 下游的抗氧化基因 SOD1（圖 C）、GPX1（圖 D）和 HO（圖 E）mRNA 表達(dá)上調(diào)如圖 4-3 所示。

圖 4-2 LPS 誘導(dǎo) Caco-2 細(xì)胞的氧化損傷模型指標(biāo)檢測Figure 4-2. LPS induced oxidative damage in Caco-2 cells.4.1.2 LPS 誘導(dǎo)氧化損傷后 Nrf2 及下游抗氧化基因的表達(dá)變2μg/mL LPS 作用于 Caco-2 細(xì)胞 8h，Nrf2 轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)（圖 A錄水平下調(diào)（圖 B），Nrf2 下游的抗氧化基因 SOD1（圖 C）、GPX1（圖（圖 E）mRNA 表達(dá)上調(diào)如圖 4-3 所示。

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