發(fā)布時(shí)間：2020-11-23 15:49

　　 本研究以綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)新疆流行株基因組DNA為模板,通過PCR擴(kuò)增30S RPS11基因,對(duì)其進(jìn)行分子特征性分析,并將其抗原表位集中區(qū)進(jìn)行原核表達(dá),分析重組蛋白免疫原性。結(jié)果表明,30S RPS11基因全長(zhǎng)405bp,編碼134個(gè)氨基酸,該蛋白是一種受磷酸化調(diào)控的蛋白,含有一個(gè)核糖體蛋白S11信號(hào)。SDSPAGE結(jié)果顯示,篩選的抗原表位集中區(qū)重組蛋白分子質(zhì)量為29kDa;Western blot分析顯示,該重組蛋白可被MO陽性血清特異性識(shí)別,說明其具有良好的反應(yīng)原性;小鼠免疫試驗(yàn)表明,重組蛋白誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的間接血凝抗體效價(jià)可達(dá)1∶32~1∶64,表明其具有較強(qiáng)的免疫原性。本試驗(yàn)首次證實(shí)MO核糖體蛋白(30SRPS11)具有良好的免疫原性和反應(yīng)原性,為MO血清學(xué)診斷及亞單位疫苗研發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 質(zhì)粒、菌種及試劑
    1.2 總DNA的提取
    1.3 引物設(shè)計(jì)與合成
    1.4 MO 30S RPS11基因的PCR擴(kuò)增、克隆及分子特征分析
    1.5重組表達(dá)載體pET-32a （+） -30SRPS11質(zhì)粒的構(gòu)建
    1.6 30S RPS11基因的誘導(dǎo)表達(dá)及免疫印跡分析
    1.7 30SRPS11重組蛋白的免疫原性研究
2 結(jié)果與分析
    2.1 30S RPS11基因PCR擴(kuò)增與克隆
    2.2 30S RPS11基因及其編碼蛋白分子特征分析
    2.3 30SRPS11蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)和三級(jí)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè)
    2.4 重組表達(dá)載體pET-32a （+） -30SRPS11的構(gòu)建與鑒定
    2.5 表達(dá)產(chǎn)物的SDS-PAGE和Western blot分析
    2.6 重組蛋白的小鼠免疫試驗(yàn)
3 討論

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前20條

1 明鎮(zhèn)寰,mail.hz.zj.cn;核糖體結(jié)構(gòu)研究中的里程碑[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2000年03期

2 王玉瑤;張志云;梁愛華;;核糖體蛋白L11及其功能[J];生命的化學(xué);2008年01期

3 王玉瑤;張志云;柴寶峰;梁愛華;;游仆蟲重組核糖體蛋白L11與肽鏈釋放因子的體外相互作用分析[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2008年04期

4 劉安玲;趙莉;賈春宏;李明;;克隆、表達(dá)及純化核糖體蛋白S6用于體外激酶活性檢測(cè)[J];生物技術(shù)通訊;2010年03期

5 胡苗清;肖瑞琳;張志云;陳潔;梁愛華;;八肋游仆蟲酸性核糖體蛋白基因克隆與特征分析[J];水生生物學(xué)報(bào);2012年03期

6 榮鳳山;;肺炎桿菌和肺炎球菌核糖體及核糖體蛋白的免疫原性[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).生物制品分冊(cè);1982年04期

7 傅杰青;;鼠疫耶氏菌和大腸埃希氏菌核糖體蛋白的比較研究:氨基酸組成和電泳泳動(dòng)度7[J];地方病譯叢;1989年03期

8 李紅艷;;核糖體蛋白L22對(duì)果蠅發(fā)育的影響及機(jī)制[J];河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年01期

9 王莉江,安成才,陳章良;核糖體滅活蛋白在植物中的作用[J];生物技術(shù)通報(bào);2000年02期

10 叢瀟;邵占濤;袁金鐸;王友政;楊桂文;安利國(guó);;海鱸核糖體蛋白L8cDNA的克隆與進(jìn)化分析(英文)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年05期

11 凌志洋;劉望夷;;核糖體的研究歷程——2009年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)簡(jiǎn)介[J];自然雜志;2009年06期

12 賈志龍;屈武斌;盧一鳴;駱志剛;張成崗;;核糖體譜技術(shù)及其應(yīng)用[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2013年01期

13 張志云;王玉瑤;梁愛華;;八肋游仆蟲核糖體蛋白L11的基因克隆與序列分析[J];四川動(dòng)物;2008年05期

14 楊品紅;王志陶;王志勇;;核糖體的結(jié)構(gòu)與功能研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年06期

15 謝兆輝;;細(xì)菌核糖體的拯救機(jī)制[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2012年05期

16 明鎮(zhèn)寰;核糖體結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展[J];浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2001年01期

17 白秉學(xué),徐東剛,王金鳳,彭善云,鄒民吉,范明;角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2與核糖體蛋白L22相互作用的發(fā)現(xiàn)及在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的驗(yàn)證[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2004年10期

18 凌俊,劉望夷;核糖體失活蛋白對(duì)核糖體拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的影響[J];中國(guó)科學(xué)C輯:生命科學(xué);1996年06期

19 周海燕;吳永堯;陳建紅;曾分有;田云;;反式翻譯模型[J];遺傳;2006年08期

20 趙鏡一;陳鵬;;探索核糖體的奧秘——2009年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)簡(jiǎn)述[J];大學(xué)化學(xué);2009年06期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 張瀟瀟;大腸桿菌中與核糖體相關(guān)的GTP酶EngA的結(jié)構(gòu)與功能研究[D];清華大學(xué);2015年

2 馮博雅;核糖體結(jié)合蛋白ObgE的結(jié)構(gòu)與功能研究[D];清華大學(xué);2015年

3 許銀豐;DOR對(duì)核糖體RNA轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用及其機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2015年

4 譚永聰;核糖體蛋白R(shí)plB的乙�；�以及MSMEG_4620的酶學(xué)特性研究[D];上海交通大學(xué);2014年

5 袁嫕;原核核糖體組裝相關(guān)的GTP酶YihA的結(jié)構(gòu)與機(jī)制研究[D];清華大學(xué);2014年

6 余偉師;核仁蛋白PAK1IP1參與細(xì)胞周期進(jìn)程及核糖體生物發(fā)生的調(diào)控研究[D];華東師范大學(xué);2011年

7 崔頔;核糖體蛋白R(shí)PS26和凋亡相關(guān)蛋白Bat3調(diào)控p53的分子機(jī)制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 程海琴;人類神經(jīng)管畸形患者攜帶編碼基因TCOF1稀有變異A491G影響核糖體生物合成[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 董清;粟酒裂殖酵母核糖體蛋白R(shí)PL32-2的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子篩選研究[D];南京師范大學(xué);2015年

3 鄭怡;核糖體蛋白L13與去乙酰化酶SirT1之間的關(guān)系及其生物學(xué)功能的研究[D];華東師范大學(xué);2013年

4 陳菲菲;粟酒裂殖酵母核糖體蛋白L32的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的篩選與鑒定的初步研究[D];南京師范大學(xué);2013年

5 勿呢爾;大腸桿菌核糖體功能缺陷影響染色體復(fù)制起始[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2016年

6 佘梅;八肋游仆蟲酸性核糖體蛋白P1的性質(zhì)研究[D];山西大學(xué);2016年

7 張國(guó)強(qiáng);游仆蟲核糖體蛋白L11的功能研究[D];山西大學(xué);2010年

8 王玉瑤;重組游仆蟲核糖體蛋白L11與肽鏈釋放因子體外相互作用的分析[D];山西大學(xué);2008年

9 劉振興;某些裂殖酵母核糖體基因和非核糖體基因的敲除及表型比較研究[D];南京師范大學(xué);2012年

10 李雪松;粟酒裂殖酵母核糖體蛋白L32-1和L32-2功能的初步研究[D];南京師范大學(xué);2013年

本文編號(hào)：2894753