發(fā)布時間：2020-11-21 05:08

　　 本論文通過四個試驗研究了L-蛋氨酸和DL-蛋氨酸及添加水平對北京鴨生長性能、屠宰性能、血漿生化和血常規(guī)指標(biāo)的影響,從而估測L-Met相對于DL-Met的生物學(xué)效價,并確定肉鴨蛋氨酸需要量和最大安全限量,并利用RNA-Seq技術(shù)研究了過量蛋氨酸對肉鴨肝臟轉(zhuǎn)錄組的影響,以期為肉鴨生產(chǎn)中晶體蛋氨酸的合理使用和蛋氨酸對肉鴨毒性作用的分子機(jī)制研究提供理論依據(jù)。試驗一采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長前期北京鴨飼糧中L-Met和DL-Met的相對生物學(xué)效價。本試驗采用2×7+1雙因子完全隨機(jī)試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.29%,代謝能12.56MJ/Kg,粗蛋白22.15%),7個L-Met或DL-Met添加組(0.03%,0.06%,0.10%,0.14%,0.19%,0.24%和0.29%),共15個處理組。選取720只1日齡健康雄性北京鴨隨機(jī)分為15個處理,每個處理8個重復(fù),每個重復(fù)6只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比,飼糧添加適量L-Met和DL-Met均能顯著提高北京鴨平均體重(ABG)、日增重(ADG)、日采食量(ADFI)和腿肌率(P0.05)。L-Met組,隨飼糧蛋氨酸水平升高,肉鴨ABG和ADG呈現(xiàn)先升高后降低的規(guī)律,而DL-Met組肉鴨ABG和ADG則先升高而后趨于穩(wěn)定。采用二次曲線模型,以ADG為評價指標(biāo),以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的1~21日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為0.46%和0.54%,T檢驗表明以L-Met為蛋氨酸源時肉鴨對蛋氨酸的需要量顯著低于以DL-Met為蛋氨酸源。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為0.29%,0.32%,0.35%,0.39%,0.43%和0.48%處理組,以ADG為評價指標(biāo),利用線性斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學(xué)效價為134%。試驗二采用玉米-花生粕型飼糧比較了生長后期北京鴨飼糧中L-Met與DL-Met的相對生物學(xué)效價。本試驗采用2×7+1雙因子完全隨機(jī)試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.22%,代謝能12.75MJ/Kg,粗蛋白18.18%),7個L-Met或DL-Met添加組(0.03%,0.06%,0.09%,0.13%,0.17%,0.22%和0.27%),共15個處理組。選取720只15日齡健康北京鴨隨機(jī)分為15個處理,每個處理6個重復(fù),每個重復(fù)8只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧組相比,飼糧添加適量L-Met和DL-Met均能顯著提高北京鴨生長性能和第四主翼羽長度(P0.05),有顯著提高胸肌率的趨勢(0.05P0.10)。采用二次曲線模型,以ADG為評價指標(biāo),以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的15~35日齡北京鴨飼糧蛋氨酸需要量分別為0.41%和0.37%,但T檢驗表明二者差異不顯著。根據(jù)飼糧蛋氨酸總水平為0.22%,0.25%,0.28%,0.31%,0.35%和0.39%處理組,以ADG為評價指標(biāo),利用線性斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學(xué)效價為125%。試驗三采用玉米-豆粕型飼糧比較了生長前期北京鴨飼糧中過量的L-Met和DL-Met的相對生物學(xué)效價。本試驗采用2×5+1雙因子完全隨機(jī)試驗設(shè)計,試驗設(shè)1個基礎(chǔ)飼糧對照組(蛋氨酸0.47%,代謝能12.03MJ/Kg,粗蛋白18.99%),5個L-Met或DL-Met添加組(0.25%,0.50%,0.75%,1.00%和1.25%),共11個處理組。選取492只8日齡健康北京鴨隨機(jī)分為11個處理,每個處理7個重復(fù),每個重復(fù)6只鴨。試驗期21d。結(jié)果表明:與基礎(chǔ)飼糧對照組相比,飼糧蛋氨酸過量時會降低北京鴨ABG、ADG、ADFI、料重比、胸肌率和腹脂率(P0.05);顯著升高鴨血漿中高半胱氨酸、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素、乳酸脫氫酶、平均紅細(xì)胞體積和紅細(xì)胞體積分布寬度(P0.05),而顯著降低血紅蛋白、平均血紅蛋白含量和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(P0.05),并有降低紅細(xì)胞計數(shù)的趨勢(0.05P0.10)。采用折線模型,以日增重為評價指標(biāo),以L-Met和DL-Met為蛋氨酸源時,獲得的飼糧蛋氨酸最大安全限量分別為0.86%和0.89%,T檢驗表明二者無顯著差異。以日增重和日采食量的抑制程度為評價指標(biāo),采用線性模型斜率比法,估測L-Met相對于DL-Met的生物學(xué)效價分別是100%和102%。試驗四利用轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)探究過量蛋氨酸對北京鴨產(chǎn)生毒性作用的分子機(jī)制。本試驗是在試驗三的基礎(chǔ)上從基礎(chǔ)飼糧組(0.47%)和蛋氨酸過量組(1.72%)中分別選取試驗鴨各3只,提取肝臟總RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序分析。結(jié)果表明,根據(jù)|log_2Fold Change|≥0.58且P-value≤0.05,共篩選出1082個差異表達(dá)基因,表達(dá)上調(diào)基因467個,表達(dá)下調(diào)基因615個,這些基因主要與脂質(zhì)代謝、能量代謝和線粒體凋亡有關(guān);GO功能富集分析顯示,差異表達(dá)基因主要富集在脂質(zhì)代謝、免疫反應(yīng)和線粒體凋亡等生物學(xué)過程;KEGG Pathway分析顯示,差異表達(dá)基因主要富集在代謝通路、鈣離子信號通路、炎癥因子與其受體相互作用和PPAR信號通路等代謝通路。綜上,飼糧中適量水平的L-Met和DL-Met均能提高生長前期和生長后期北京鴨的生長性能和胴體品質(zhì),而過量的L-Met和DL-Met均會抑制動物生長,導(dǎo)致動物肝臟損傷并出現(xiàn)貧血。本試驗條件下,當(dāng)飼糧中總蛋氨酸水平對北京鴨生長有促進(jìn)作用時,L-Met的生物學(xué)利用率高于DL-Met;飼糧中總蛋氨酸水平對北京鴨生長產(chǎn)生抑制作用時,L-Met和DL-Met的生物學(xué)利用率相當(dāng)。本試驗條件下,飼糧過量蛋氨酸會引起肝臟中脂質(zhì)代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生顯著變化,脂質(zhì)代謝相關(guān)的信號通路被激活。
【學(xué)位單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S834.81
【部分圖文】：

顯著Pathway統(tǒng)計

顯著GO條目統(tǒng)計
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2892572