發(fā)布時(shí)間：2019-07-18 09:24

【摘要】：細(xì)菌、病毒病原體引起的動(dòng)物傳染病發(fā)展趨勢越來越復(fù)雜、嚴(yán)峻,在控制疾病方面抗生素發(fā)揮著著越來越重要的作用,但是它們的頻繁使用會(huì)導(dǎo)致藥物殘留以及耐藥菌株的出現(xiàn)。目前,預(yù)防接種疫苗是減少傳染病發(fā)病率的最佳途徑,一般來說,將免疫調(diào)節(jié)劑應(yīng)用在疫苗上,不僅可以增強(qiáng)疫苗的免疫反應(yīng),而且能延長免疫增強(qiáng)作用時(shí)間。鑒于本實(shí)驗(yàn)室前期的相關(guān)研究,來自不同資源的泰山松花粉多糖、蘆薈多糖和蜂膠被證明有良好的免疫調(diào)節(jié)功能和類似的免疫增強(qiáng)效果,但是我們尚不清楚當(dāng)它們聯(lián)合使用時(shí),是否會(huì)具有協(xié)同的免疫增強(qiáng)效果?本試驗(yàn)利用泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖這三種免疫調(diào)節(jié)劑,以它們單獨(dú)或混合地應(yīng)用在免疫禽波氏桿菌滅活苗、新城疫弱毒疫苗的雛雞上作為研究切入點(diǎn),通過測定體液免疫和細(xì)胞免疫相關(guān)免疫指標(biāo),探討泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對(duì)免疫雞的免疫增強(qiáng)效果,篩選出最佳組方,旨在為畜禽業(yè)新一代疫苗佐劑或免疫增強(qiáng)劑的研制開發(fā)提供理論依據(jù)。本研究分為三方面內(nèi)容:1.植物多糖的提取及測定泰山松花粉多糖和蘆薈多糖由本實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)后的水提醇沉法提取,由苯酚-硫酸法測定多糖含量。該方法泰山松花粉多糖、蘆薈多糖的得率分別為4.93%、2.67%,多糖含量為76.4%、80.4%。2.不同免疫佐劑組方對(duì)禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫增強(qiáng)作用的研究為研究泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對(duì)禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫增強(qiáng)效果。將160只3日齡SPF雛雞隨機(jī)分為8組,在3、7和12日齡,TPPPS、PP和AP組雛雞分別皮下注射含有泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖單一免疫佐劑的禽波氏桿菌滅活疫苗;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP組雛雞分別皮下注射內(nèi)含泰山松花粉多糖和蜂膠合劑、蜂膠和蘆薈多糖合劑、泰山松花粉多糖和蘆薈多糖合劑的禽波氏桿菌滅活疫苗;PBS組雛雞皮下注射等量PBS的禽波氏桿菌滅活疫苗;Mock組雛雞僅皮下注射等量生理鹽水。在免疫后7、14、21、28、35和42天,每組隨機(jī)取3份血樣,依次測定血清抗體效價(jià)、血液IL-2含量、外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果顯示,在14、21、28和35d時(shí)TPPPS、PP、TPPPS-PP組各免疫指標(biāo)高于其他各組,且顯著高于PBS、Mock組(P0.05),在14、21和28d時(shí)TPPPS-PP組各指標(biāo)具有最高水平(P0.05)。結(jié)果表明,泰山松花粉多糖和蜂膠合劑能誘導(dǎo)禽波氏桿菌滅活疫苗產(chǎn)生最高水平的體液免疫和細(xì)胞免疫。因此,泰山松花粉多糖和蜂膠可協(xié)同增強(qiáng)禽波氏桿菌滅活疫苗的免疫效應(yīng)。3.不同免疫增強(qiáng)劑組合對(duì)新城疫弱毒疫苗的免疫增強(qiáng)作用的研究為研究泰山松花粉及蘆薈多糖與蜂膠的合劑對(duì)新城疫弱毒疫苗的免疫增強(qiáng)效果。將160只1日齡SPF雛雞隨機(jī)分為8組,其中7組疫苗組在12日齡用新城疫Ⅳ系疫苗點(diǎn)眼滴鼻首免,且在28日齡肌肉注射二免,在首免的同時(shí),TPPPS、PP、AP組雛雞分別皮下注射泰山松花粉多糖、蜂膠和蘆薈多糖;TPPPS-PP、PP-AP、TPPPS-AP組雛雞分別皮下注射泰山松花粉多糖和蜂膠合劑、蜂膠和蘆薈多糖合劑、泰山松花粉多糖和蘆薈多糖合劑;PBS組雛雞皮下注射等量PBS。MOCK組雛雞僅皮下注射等量生理鹽水。在免疫后7、14、21、28、35和42天,每組隨機(jī)取三份血樣,依次測定血清抗體效價(jià)、血液IFN-γ含量、外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、外周血CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量。結(jié)果顯示,在除7d外的所有時(shí)間點(diǎn)時(shí)7個(gè)疫苗組血清抗體水平、IFN-γ含量、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、外周血中CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量均高于MOCK組;在14、21、28d時(shí)6個(gè)免疫增強(qiáng)劑組均高于PBS組;在免疫指標(biāo)達(dá)到峰值時(shí)TPPPS-PP組顯著高于其他各組(P0.05)。結(jié)果表明,泰山松花粉多糖和蜂膠合劑能誘導(dǎo)新城疫弱毒疫苗產(chǎn)生最高水平的體液和細(xì)胞免疫。因此,泰山松花粉多糖和蜂膠的聯(lián)合使用在增強(qiáng)新城疫弱毒疫苗的免疫應(yīng)答上效果最好。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：S853.7

【參考文獻(xiàn)】

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