發(fā)布時間：2018-03-11 16:21

  本文選題：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒　切入點(diǎn)：污染　出處：《中國獸醫(yī)學(xué)報》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：使用污染有禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)的弱毒疫苗是REV感染途徑之一,而通常弱毒疫苗中REV的污染劑量較低,難以檢測,本研究對不同方法在檢測弱毒疫苗中REV低劑量污染進(jìn)行了比較研究。將定量好的REV以不同劑量分別人為污染一批商品化新城疫病毒(NDV)弱毒疫苗,提取核酸后分別以TaqMan探針熒光定量RT-PCR檢測、常規(guī)RT-PCR檢測以及PCR產(chǎn)物結(jié)合核酸斑點(diǎn)雜交檢測等不同方法進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示常規(guī)RTPCR檢測僅可檢測到10TCID50/羽份的REV污染,而另外兩種方法均檢測到1TCID50/羽份的低劑量REV污染。將人為污染1TCID50/羽份和2TCID50/羽份REV的NDV弱毒疫苗各接種10只SPF雞,定期針對REV抗體及其核酸進(jìn)行檢測,結(jié)果顯示在免疫污染疫苗后7周內(nèi)REV抗體全部為陰性,而核酸檢測均可以檢測到一定比例的陽性,提示通過接種SPF雞檢測弱毒疫苗中REV污染時,僅僅通過抗體判定可能會對一些劑量較低的REV污染造成漏檢,通過結(jié)合對病原的檢測有助于降低漏檢率。
[Abstract]:The use of attenuated vaccines contaminated with avian reticuloendotheliosis virus (revv) is one of the routes of REV infection, and REV contamination in attenuated vaccines is usually low and difficult to detect. In this study, the low dose pollution of REV in attenuated vaccine by different methods was compared. A batch of commercial Newcastle disease virus (NDV) attenuated vaccine was contaminated with different doses of REV. The nucleic acid was extracted and detected by TaqMan probe fluorescence quantitative RT-PCR detection, conventional RT-PCR detection and PCR product combined with nucleic acid dot hybridization respectively. The results showed that only 10TCID 50 / plume REV contamination could be detected by conventional RTPCR detection. The other two methods detected low dose REV contamination of 1TCID50 / plume. Ten SPF chickens were inoculated with the NDV attenuated vaccine of 1TCID50 / plume and 2TCID50 / plume REV respectively, and the antibody to REV and its nucleic acid were detected regularly. The results showed that all the REV antibodies were negative within 7 weeks after immunization, but the nucleic acid detection could detect a certain proportion of positive, suggesting that the REV contamination in the attenuated vaccine could be detected by inoculation of SPF chickens. The detection of REV with low dose may be caused by the detection of antibodies, and the detection of pathogens can help to reduce the rate of missed detection.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【分類號】：S852.65

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本文編號：1598941