發(fā)布時間：2020-11-23 07:31

　　 目的：在已建立的被動吸煙致神經管缺陷的動物模型的基礎上，用光鏡和電鏡技術觀察畸形胚胎發(fā)生過程的組織學改變，運用親和細胞化學技術探討神經上皮及其基膜、脊索和神經管周圍間充質細胞表面糖基即凝集素受體的時空變化，研究被動吸煙致畸的可能的機理。 方法：將懷孕的金黃地鼠隨機分為兩組，吸煙組用煙熏的方法建立被動吸煙的致畸模型，并與對照組一起分別在受精后第8天的12時和18時、受精后第9天和受精后第10天的8時取材。用體視顯微鏡和掃描電鏡觀察被動吸煙對胎鼠神經管發(fā)育的形態(tài)學影響；常規(guī)透射電鏡標本制備，半薄切片，經甲苯胺藍染色，對被動吸煙后各組胚胎神經上皮的固縮細胞和有絲分裂相進行計數；超薄切片經醋酸雙氧鈾及枸椽酸鉛染色，在透射電鏡下觀察被動吸煙對神經上皮細胞超微結構的影響；其余標本制作成石蠟切片，用免疫組織化學的方法顯示纖維粘連蛋白；用刀豆凝集素和生物素標記的荊豆凝集素作為分子探針，作親和細胞化學染色，對神經上皮及其基膜、脊索和神經管周圍間充質細胞的基質粘著分子和相應糖基即凝集素受體進行定性、定位觀察，并利用圖像分析技術進行定量分析。 結果：1、電鏡觀察結果顯示：各被動吸煙組胚胎神經上皮細胞排列不規(guī)則，細胞間隙增寬，游離面微絨毛短縮，有的微絨毛末端膨大，甚至形成若干不規(guī)則的胞質突起；細胞質中出現許多空泡，線粒體膨脹，嵴減少甚至消失，有的線粒體伸長；細胞核形態(tài)不規(guī)則，核周間隙局部膨大，可見有形物質，核仁分裂，異染色質增多，也可見到細胞核固縮或裂解；有的死亡細胞裂解形成多個凋亡小體，在其鄰近的正常細胞質內可見被吞噬的凋亡小體。2、固縮細胞和有絲分裂相計數結果顯示：各被動吸煙組神經上皮的固縮細胞數比相應的對照組高1倍多(P＜0.01)，除了細胞損傷外，我們也發(fā)現有絲分裂相也高于相應的對照各組 中文摘要 (P0.01)。3、被動吸煙組胚胎表現出明顯的發(fā)育遲緩。各吸煙組胚胎 均小于相應各對照組，受精后第10天，仍有部分胚胎的前、后神經孔沒 有閉合。4、免疫組織化學和親和細胞化學染色結果顯示:吸煙組中各胎 齡組的纖維粘連蛋白著色均不同程度地比相應的對照組淺(P0.01)。吸 煙各組胚胎的大豆凝集素和荊豆凝集素染色均比相應的對照各組胚胎著 色深(P0.01)。 結論:1、被動吸煙可誘導神經上皮及其周圍間充質細胞變性，死亡， 細胞數量減少，從而導致了神經管的形成和分化異常，使神經管延遲閉 合或不閉合，這是被動吸煙致神經管缺陷的一條重要的途徑。2、盡管被 動吸煙能提高有絲分裂率，可以部分代償神經上皮細胞的減少，但由于 香煙煙霧致細胞死亡和誘導有絲分裂有明顯的區(qū)域選擇性，提示兩者有 不同的作用機制。3、被動吸煙導致神經管缺陷的另一個重要途徑是使神 經上皮的纖維粘連蛋白減少，干擾這些神經上皮細胞及其周圍間充質細 胞的增殖和遷移，使神經管不能正常形成。4、被動吸煙致神經管缺陷的 發(fā)生與細胞膜表面的甘露糖糖基和巖藻糖糖基改變密切相關。被動吸煙 可使神經上皮及其基膜和神經管周圍的間充質細胞的相應糖基明顯升 高，細胞間的粘著增強，從而干擾神經上皮的正常細胞增殖、粘著和遷 移過程，這也是引起神經管缺陷的主要原因之一。
【學位單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2003
【中圖分類】：R361
【文章目錄】：
中文摘要
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引言
材料與方法
結果
討論
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參考文獻
綜述
致謝

【參考文獻】

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本文編號：2894654