發(fā)布時(shí)間：2020-11-23 07:31

　　 目的：在已建立的被動吸煙致神經(jīng)管缺陷的動物模型的基礎(chǔ)上，用光鏡和電鏡技術(shù)觀察畸形胚胎發(fā)生過程的組織學(xué)改變，運(yùn)用親和細(xì)胞化學(xué)技術(shù)探討神經(jīng)上皮及其基膜、脊索和神經(jīng)管周圍間充質(zhì)細(xì)胞表面糖基即凝集素受體的時(shí)空變化，研究被動吸煙致畸的可能的機(jī)理。 方法：將懷孕的金黃地鼠隨機(jī)分為兩組，吸煙組用煙熏的方法建立被動吸煙的致畸模型，并與對照組一起分別在受精后第8天的12時(shí)和18時(shí)、受精后第9天和受精后第10天的8時(shí)取材。用體視顯微鏡和掃描電鏡觀察被動吸煙對胎鼠神經(jīng)管發(fā)育的形態(tài)學(xué)影響；常規(guī)透射電鏡標(biāo)本制備，半薄切片，經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色，對被動吸煙后各組胚胎神經(jīng)上皮的固縮細(xì)胞和有絲分裂相進(jìn)行計(jì)數(shù)；超薄切片經(jīng)醋酸雙氧鈾及枸椽酸鉛染色，在透射電鏡下觀察被動吸煙對神經(jīng)上皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響；其余標(biāo)本制作成石蠟切片，用免疫組織化學(xué)的方法顯示纖維粘連蛋白；用刀豆凝集素和生物素標(biāo)記的荊豆凝集素作為分子探針，作親和細(xì)胞化學(xué)染色，對神經(jīng)上皮及其基膜、脊索和神經(jīng)管周圍間充質(zhì)細(xì)胞的基質(zhì)粘著分子和相應(yīng)糖基即凝集素受體進(jìn)行定性、定位觀察，并利用圖像分析技術(shù)進(jìn)行定量分析。 結(jié)果：1、電鏡觀察結(jié)果顯示：各被動吸煙組胚胎神經(jīng)上皮細(xì)胞排列不規(guī)則，細(xì)胞間隙增寬，游離面微絨毛短縮，有的微絨毛末端膨大，甚至形成若干不規(guī)則的胞質(zhì)突起；細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)許多空泡，線粒體膨脹，嵴減少甚至消失，有的線粒體伸長；細(xì)胞核形態(tài)不規(guī)則，核周間隙局部膨大，可見有形物質(zhì)，核仁分裂，異染色質(zhì)增多，也可見到細(xì)胞核固縮或裂解；有的死亡細(xì)胞裂解形成多個(gè)凋亡小體，在其鄰近的正常細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見被吞噬的凋亡小體。2、固縮細(xì)胞和有絲分裂相計(jì)數(shù)結(jié)果顯示：各被動吸煙組神經(jīng)上皮的固縮細(xì)胞數(shù)比相應(yīng)的對照組高1倍多(P＜0.01)，除了細(xì)胞損傷外，我們也發(fā)現(xiàn)有絲分裂相也高于相應(yīng)的對照各組 中文摘要 (P0.01)。3、被動吸煙組胚胎表現(xiàn)出明顯的發(fā)育遲緩。各吸煙組胚胎 均小于相應(yīng)各對照組，受精后第10天，仍有部分胚胎的前、后神經(jīng)孔沒 有閉合。4、免疫組織化學(xué)和親和細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示:吸煙組中各胎 齡組的纖維粘連蛋白著色均不同程度地比相應(yīng)的對照組淺(P0.01)。吸 煙各組胚胎的大豆凝集素和荊豆凝集素染色均比相應(yīng)的對照各組胚胎著 色深(P0.01)。 結(jié)論:1、被動吸煙可誘導(dǎo)神經(jīng)上皮及其周圍間充質(zhì)細(xì)胞變性，死亡， 細(xì)胞數(shù)量減少，從而導(dǎo)致了神經(jīng)管的形成和分化異常，使神經(jīng)管延遲閉 合或不閉合，這是被動吸煙致神經(jīng)管缺陷的一條重要的途徑。2、盡管被 動吸煙能提高有絲分裂率，可以部分代償神經(jīng)上皮細(xì)胞的減少，但由于 香煙煙霧致細(xì)胞死亡和誘導(dǎo)有絲分裂有明顯的區(qū)域選擇性，提示兩者有 不同的作用機(jī)制。3、被動吸煙導(dǎo)致神經(jīng)管缺陷的另一個(gè)重要途徑是使神 經(jīng)上皮的纖維粘連蛋白減少，干擾這些神經(jīng)上皮細(xì)胞及其周圍間充質(zhì)細(xì) 胞的增殖和遷移，使神經(jīng)管不能正常形成。4、被動吸煙致神經(jīng)管缺陷的 發(fā)生與細(xì)胞膜表面的甘露糖糖基和巖藻糖糖基改變密切相關(guān)。被動吸煙 可使神經(jīng)上皮及其基膜和神經(jīng)管周圍的間充質(zhì)細(xì)胞的相應(yīng)糖基明顯升 高，細(xì)胞間的粘著增強(qiáng)，從而干擾神經(jīng)上皮的正常細(xì)胞增殖、粘著和遷 移過程，這也是引起神經(jīng)管缺陷的主要原因之一。
【學(xué)位單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2003
【中圖分類】：R361
【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
引言
材料與方法
結(jié)果
討論
圖版說明
參考文獻(xiàn)
綜述
致謝

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2894654