發(fā)布時間：2020-11-21 19:28

　　 胰島素是治療糖尿病的特效藥物,糖尿病是最常見的內分泌代謝疾病。單組分人胰島素已成為目前治療糖尿病的首選藥物。與基因工程生產人胰島素相比,豬胰島素酶促半合成人胰島素的方法簡便有效,且我國豬資源豐富,半合成所需豬胰島素來源充分,研制生產所需的投資少,周期短,符合我國現(xiàn)階段國情。由于一步法固相酶促半合成人胰島素的方法具有一系列優(yōu)點,實用價值更高,因此,人胰島素的一步法固相酶促半合成便成為一個重要課題。 本文報道了用固定化胰蛋白酶催化豬胰島素一步法合成人胰島素的工藝。合成了優(yōu)質且高含量的蘇氨酸叔丁醚叔丁酯,純度可達98.5%,收率穩(wěn)定;快速制備高活力的固定化胰蛋白酶,活力單位高達5990.5U/g,該工藝具有更為快捷簡便的特點。以豬胰島素和蘇氨酸叔丁醚叔丁酯為原料,固定化胰蛋白酶催化,通過一步轉肽法半合成人胰島素,轉肽率可達75.1%。制得的人胰島素經鑒定和純度檢測,結果為:PAGE和SDS-PAGE為單一蛋白帶,遷移率與人胰島素標準品一致;HPLC為單一蛋白峰,保留時間與人胰島素標準品相同。
【學位單位】：四川大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2004
【中圖分類】：R341
【部分圖文】：

12345圖2聚丙烯酞胺凝膠電泳圖譜Fig2PolyaerylamidegeleleetroPhoresis(PAGE)1·Pl2.Hl·E(erudeProduet)3·Hl(debloekedProduct)(PurifiedProduct)5.Nov一NordiskHl人胰島素酣分離純化結果QSepharoseFF陰離子交換層析分離H工一ester圖譜見

QSepharoseFF離子梯度層析純化Hl圖譜PurifieationofHlonQ一SePharoseFastFlowioneolumn(2.0x11em)waselutedby45%ethano5歸e卜扣.bgl詩口TFNH4CI);Flowrate:.0·smllmin.7人胰島素的鑒定結果7.1聚丙烯酞胺凝膠電泳(PAGE)結果:通過12%APGB，對產品進行鑒定，見圖2。結產品為單一蛋白帶，與人胰島素標準品蛋白帶位7.2SDS一聚丙烯酞胺凝膠電泳(SDS一PAGE)結果:通過15%SDS一PAGE，對產品進行鑒定，結果顯分子量與人胰島素對照品相同，且純度較高，為
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1 周蕊;人胰島素一步法固相酶促半合成的研究[D];四川大學;2004年

2 高秀蓉;人胰島素固相酶促半合成及其工藝的研究[D];四川大學;2005年

本文編號：2893486