發(fā)布時間：2020-11-21 03:00

　　 【背景】由于抗生素的大量使用,導致細菌耐藥性越來越強,尋找新的抗細菌感染藥物成為研究熱點�！灸康摹靠寺”磉_群體感應淬滅酶,探究其對銅綠假單胞菌毒力及致病性的影響。【方法】利用PCR技術從產群體感應淬滅酶的芽孢桿菌QSI-1基因組DNA中克隆出aiiA基因,將其克隆到表達載體pET30a并導入大腸桿菌E.coliBL21(DE3)中進行誘導表達,通過鎳柱親和層析獲得純化的N-�；�高絲氨酸內酯酶。用不同濃度的淬滅酶作用于銅綠假單胞菌,檢測其對銅綠假單胞菌毒力因子產生以及生物膜形成能力的影響;以秀麗隱桿線蟲為模型,考察其對線蟲感染銅綠假單胞菌存活率的影響�！窘Y果】克隆表達出群體感應淬滅酶,該酶能顯著抑制銅綠假單胞菌毒力因子產生和生物膜的形成,并能降低銅綠假單胞菌對感染線蟲的致死率�！窘Y論】群體感應淬滅酶可作為一種能高效抑制細菌致病性的物質,為臨床治療細菌性感染提供新的策略。
【部分圖文】：

2930微生物學通報Microbiol.ChinaTel:010-64807511;E-mail:tongbao@im.ac.cn;http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn圖1PCR產物電泳Figure1PCRproductsofaiiAgene圖2表達的AiiA蛋白SDS-PAGE圖Figure2SDS-PAGEanalysisofAiiAprotein圖3AiiA群體感應淬滅活性測定Figure3CharacterizationofthequorumquenchingactivityofAiiA時稍有減弱，仍達到42.40%，如圖4A所示。淬滅酶對鼠李糖脂也有顯著的抑制作用，實驗組產生鼠李糖脂的水平降到對照組的40%以下，如圖4B所示。為了更好地檢測總蛋白酶生成的變化，采用脫脂奶平板法，實驗組溶蛋白圈大小明顯小于對照組，說明淬滅酶抑制了銅綠假單胞菌蛋白酶的產生，如圖4C所示。2.3群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌生物膜產生的影響采用結晶紫染色法測定淬滅酶對PA生物膜形圖4群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌毒力因子產生的影響Figure4EffectsofAiiAonvirulencefactorsproductionofPseudomonasaeruginosa注：A：綠膿菌素；B：鼠李糖脂；C：蛋白酶.*：P<0.05.Note:A:Pyocyanin;B:Rhamnolipid;C:Protease.*:P<0.05.

2930微生物學通報Microbiol.ChinaTel:010-64807511;E-mail:tongbao@im.ac.cn;http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn圖1PCR產物電泳Figure1PCRproductsofaiiAgene圖2表達的AiiA蛋白SDS-PAGE圖Figure2SDS-PAGEanalysisofAiiAprotein圖3AiiA群體感應淬滅活性測定Figure3CharacterizationofthequorumquenchingactivityofAiiA時稍有減弱，仍達到42.40%，如圖4A所示。淬滅酶對鼠李糖脂也有顯著的抑制作用，實驗組產生鼠李糖脂的水平降到對照組的40%以下，如圖4B所示。為了更好地檢測總蛋白酶生成的變化，采用脫脂奶平板法，實驗組溶蛋白圈大小明顯小于對照組，說明淬滅酶抑制了銅綠假單胞菌蛋白酶的產生，如圖4C所示。2.3群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌生物膜產生的影響采用結晶紫染色法測定淬滅酶對PA生物膜形圖4群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌毒力因子產生的影響Figure4EffectsofAiiAonvirulencefactorsproductionofPseudomonasaeruginosa注：A：綠膿菌素；B：鼠李糖脂；C：蛋白酶.*：P<0.05.Note:A:Pyocyanin;B:Rhamnolipid;C:Protease.*:P<0.05.

2930微生物學通報Microbiol.ChinaTel:010-64807511;E-mail:tongbao@im.ac.cn;http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn圖1PCR產物電泳Figure1PCRproductsofaiiAgene圖2表達的AiiA蛋白SDS-PAGE圖Figure2SDS-PAGEanalysisofAiiAprotein圖3AiiA群體感應淬滅活性測定Figure3CharacterizationofthequorumquenchingactivityofAiiA時稍有減弱，仍達到42.40%，如圖4A所示。淬滅酶對鼠李糖脂也有顯著的抑制作用，實驗組產生鼠李糖脂的水平降到對照組的40%以下，如圖4B所示。為了更好地檢測總蛋白酶生成的變化，采用脫脂奶平板法，實驗組溶蛋白圈大小明顯小于對照組，說明淬滅酶抑制了銅綠假單胞菌蛋白酶的產生，如圖4C所示。2.3群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌生物膜產生的影響采用結晶紫染色法測定淬滅酶對PA生物膜形圖4群體感應淬滅酶對銅綠假單胞菌毒力因子產生的影響Figure4EffectsofAiiAonvirulencefactorsproductionofPseudomonasaeruginosa注：A：綠膿菌素；B：鼠李糖脂；C：蛋白酶.*：P<0.05.Note:A:Pyocyanin;B:Rhamnolipid;C:Protease.*:P<0.05.
【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：2892420