發(fā)布時(shí)間：2020-11-20 05:39

　　 【目的】為了探究乙肝病毒核心蛋白(HepatitisBviruscoreprotein,HBc)病毒樣顆粒(Virus-like particles,VLPs)表面抗原密度對免疫后抗體應(yīng)答水平的影響,制備了不同抗原密度的HBc VLPs疫苗,并檢測了其在小鼠體內(nèi)的抗體應(yīng)答水平�！痉椒ā渴紫戎苽淞薔端帶有3個(gè)甘氨酸的人巨細(xì)胞病毒重組抗原域AD-4作為模式抗原,接著通過Sortase A的介導(dǎo)將AD-4連接到HBc VLPs表面上。將系列濃度梯度AD-4抗原在SortaseA介導(dǎo)下分別與相同濃度的HBcVLPs發(fā)生反應(yīng),制備不同抗原密度的HBc-AD-4 VLPs。將其分別免疫6–8周齡BALB/c小鼠3次,每次免疫間隔2 w,間接ELISA法檢測被免疫小鼠血清的抗體應(yīng)答水平。【結(jié)果】結(jié)果表明,當(dāng)HBc VLPs表面抗原密度為44.4%時(shí),即HBc反應(yīng)濃度∶AD-4反應(yīng)濃度為1:0.5時(shí),不足以引起高滴度的抗體產(chǎn)生;當(dāng)HBc VLPs表面抗原密度為64.2%時(shí),即HBc反應(yīng)濃度∶AD-4反應(yīng)濃度為1:1時(shí),HBc-AD-4 VLPs誘導(dǎo)的AD-4特異性抗體滴度與100%抗原密度的HBc-AD-4VLPs所引起的抗體滴度相當(dāng);當(dāng)HBcVLPs表面抗原密度大于64.2%時(shí),引起的抗體應(yīng)答水平不因抗原密度增加而進(jìn)一步增強(qiáng)�！窘Y(jié)論】發(fā)現(xiàn)了HBcVLPs表面抗原密度與免疫后抗體滴度呈正相關(guān),然而免疫64.2%抗原密度的HBc VLPs所產(chǎn)生的抗體滴度可達(dá)峰值,抗原密度進(jìn)一步增加,抗體應(yīng)答水平不會(huì)進(jìn)一步加強(qiáng)。
【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要試劑:
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:
    1.2 蛋白表達(dá)與純化
    1.3 蛋白轉(zhuǎn)肽反應(yīng)體系的配制
    1.4 動(dòng)物分組與免疫
    1.5 間接ELISA法檢測免疫后小鼠抗血清效價(jià)
    1.6 統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果和分析
    2.1 蛋白表達(dá)與純化
    2.2 不同抗原密度的病毒樣顆粒的確定
    2.3 不同抗原密度的病毒樣顆粒的制備
    2.4 免疫小鼠的抗體應(yīng)答
3 討論

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