發(fā)布時間：2020-11-18 09:48

　　 目的宮腔粘連是一種嚴重損害女性生殖健康的疾病。為了進一步研究宮腔粘連的發(fā)生機制,采用經(jīng)典的子宮內(nèi)膜刮除法制作宮腔粘連大鼠模型,并對該模型進行評價和改進。方法 60只SD大鼠隨機分為3組:假手術組、子宮內(nèi)膜刮除組和子宮內(nèi)膜及部分間質(zhì)刮除組,每組20只。假手術組打開宮腔后即縫合并關腹。子宮內(nèi)膜刮除組用刀片刮除雙側子宮內(nèi)膜。子宮內(nèi)膜及部分間質(zhì)刮除組用刀片刮除雙側子宮內(nèi)膜和間質(zhì)層,直至表面有粗糙感為止。術后3、7、14、21、28 d取材,行組織學和免疫組織化學評估。結果刮宮后兩組大鼠子宮內(nèi)膜上皮層消失,子宮內(nèi)膜刮除組大鼠術后7 d可發(fā)現(xiàn)重新長出的子宮內(nèi)膜。而子宮內(nèi)膜和部分間質(zhì)刮除組大鼠各時間點組織學染色見上皮層消失,間質(zhì)減少50%以上,腺體數(shù)目減少,子宮內(nèi)膜纖維化面積比隨著刮宮時間延長而增高。刮宮后轉化生長因子β1的表達增高,基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達降低。與宮腔粘連發(fā)生的機制相符。結論刮除子宮內(nèi)膜和部分間質(zhì)能夠制備出大鼠宮腔粘連的模型;該宮腔粘連大鼠模型能反映宮腔粘連的組織學和病理學變化,可用于宮腔粘連的實驗研究。
【部分圖文】：

Vol．50，No．1陳醒等．大鼠子宮腔粘連模型的構建與改進·125·21d、刮宮28d的子宮內(nèi)膜纖維化面積比(%)分別為25.34±1.00、36.21±1.04、40.27±1.42、49.41±1.07、53.19±1.10、53.64±1.13。刮宮各組的子宮內(nèi)膜纖維化面積比均顯著大于對照組(P＜0.01)。圖1子宮內(nèi)膜刮除前后的HE染色標尺示100μm(下同)A．假手術組子宮內(nèi)膜上皮和腺體可見;B．單純子宮內(nèi)膜刮除后，子宮內(nèi)膜上皮層消失，剩余較多子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)層;C．子宮內(nèi)膜和大部間質(zhì)刮除組，子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺體大量減少圖2單純子宮內(nèi)膜刮除組刮宮3d(A)和7d(B)時的HE染色刮宮3d時，尚未見增生的子宮內(nèi)膜上皮;刮宮7d后，已見子宮內(nèi)膜上皮增生，說明模型制作失敗，子宮并未形成粘連圖3子宮內(nèi)膜刮除前后CK18的表達情況A．假手術組子宮組織內(nèi)膜上皮和腺上皮均表達CK18;B．子宮內(nèi)膜刮除后，只有腺上皮表達CK18圖4各組子宮組織的Masson染色膠原纖維染成藍色，腺體、肌層染成紅色A．假手術組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28dFig．1HEstainingofuteribeforeandafterscrapingBar=100μm(Thesamebelow)A，Theendometriumandendometrialglandswereseenintheuterusofshamoperation;B，Noepitheliallayersofendometriumwereseenwhilesomeendometrialglandsandlayersofmesenchymewereseenintheuterusofendometrialscraping;C，EndometrialglandsandmesenchymeweresignificantlydecreasedintheuterusofendometriumandmesenchymescrapingFig．2HEstainingofuteriafter3days(A)and7days(B)ofoperationintheendometrialscarpinggroupNoepithelialcellsofendometriumwereseenafter3daysofoperationwhileregenerativeendometriumwasseenafter7daysofoperation，suggestingthatnofibrosi

·126·解剖學報50卷，1期料染細胞核(藍光)，F(xiàn)ITC(綠光)標記的二抗染TGF-β1和MMP-9。結果發(fā)現(xiàn)，TGF-β1和MMP-9均表達于胞質(zhì)和細胞外基質(zhì)中。假手術組子宮中低表達TGF-β1，刮宮后TGF-β1的表達升高(圖5);假手術組子宮中高表達MMP-9，刮宮后MMP-9的表達下降(圖6)。圖5免疫熒光法檢測各組子宮TGF-β1表達標尺示100μm(下同)A．假手術組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28d刮宮后子宮組織的轉化生子因子β1表達明顯高于對照組圖6免疫熒光法檢測各組子宮MMP-9表達A．假手術組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28d刮宮后子宮組織的基質(zhì)金屬蛋白酶9表達明顯低于對照組Fig．5TGF-β1expressioninshamandendometrialandmesenchymalscrapinggroupbyimmunofluorescenceBar=100μm(Thesamebelow)Sham(A)，3(B)，7(C)，14(D)，21(E)and28(F)daysaftersurgerywereshown，respectively;TheexpressionofTGF-β1inscrapeduteriwerehigherthancontrolgroupFig．6MMP-9expressioninshamandendometrialandmesenchymalscrapinggroupbyimmunofluorescenceSham(A)，3(B)，7(C)，14(D)，21(E)and28(F)daysaftersurgerywereshown，respectively;TheexpressionofMMP-9inscrapeduteriwerelowerthancontrolgroup討論由于倫理問題，宮腔粘連患者病理取材困難，制約著宮腔粘連的機制研究。因此，制備動物的宮腔粘連模型對于推動宮腔粘連的研究有重要意義。宮腔粘連動物模型制備方法很多，物理性方法(機械
【參考文獻】

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