發(fā)布時(shí)間：2020-11-18 09:48

　　 目的宮腔粘連是一種嚴(yán)重?fù)p害女性生殖健康的疾病。為了進(jìn)一步研究宮腔粘連的發(fā)生機(jī)制,采用經(jīng)典的子宮內(nèi)膜刮除法制作宮腔粘連大鼠模型,并對(duì)該模型進(jìn)行評(píng)價(jià)和改進(jìn)。方法 60只SD大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組、子宮內(nèi)膜刮除組和子宮內(nèi)膜及部分間質(zhì)刮除組,每組20只。假手術(shù)組打開宮腔后即縫合并關(guān)腹。子宮內(nèi)膜刮除組用刀片刮除雙側(cè)子宮內(nèi)膜。子宮內(nèi)膜及部分間質(zhì)刮除組用刀片刮除雙側(cè)子宮內(nèi)膜和間質(zhì)層,直至表面有粗糙感為止。術(shù)后3、7、14、21、28 d取材,行組織學(xué)和免疫組織化學(xué)評(píng)估。結(jié)果刮宮后兩組大鼠子宮內(nèi)膜上皮層消失,子宮內(nèi)膜刮除組大鼠術(shù)后7 d可發(fā)現(xiàn)重新長(zhǎng)出的子宮內(nèi)膜。而子宮內(nèi)膜和部分間質(zhì)刮除組大鼠各時(shí)間點(diǎn)組織學(xué)染色見上皮層消失,間質(zhì)減少50%以上,腺體數(shù)目減少,子宮內(nèi)膜纖維化面積比隨著刮宮時(shí)間延長(zhǎng)而增高。刮宮后轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1的表達(dá)增高,基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá)降低。與宮腔粘連發(fā)生的機(jī)制相符。結(jié)論刮除子宮內(nèi)膜和部分間質(zhì)能夠制備出大鼠宮腔粘連的模型;該宮腔粘連大鼠模型能反映宮腔粘連的組織學(xué)和病理學(xué)變化,可用于宮腔粘連的實(shí)驗(yàn)研究。
【部分圖文】：

Vol．50，No．1陳醒等．大鼠子宮腔粘連模型的構(gòu)建與改進(jìn)·125·21d、刮宮28d的子宮內(nèi)膜纖維化面積比(%)分別為25.34±1.00、36.21±1.04、40.27±1.42、49.41±1.07、53.19±1.10、53.64±1.13。刮宮各組的子宮內(nèi)膜纖維化面積比均顯著大于對(duì)照組(P＜0.01)。圖1子宮內(nèi)膜刮除前后的HE染色標(biāo)尺示100μm(下同)A．假手術(shù)組子宮內(nèi)膜上皮和腺體可見;B．單純子宮內(nèi)膜刮除后，子宮內(nèi)膜上皮層消失，剩余較多子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)層;C．子宮內(nèi)膜和大部間質(zhì)刮除組，子宮內(nèi)膜間質(zhì)和腺體大量減少圖2單純子宮內(nèi)膜刮除組刮宮3d(A)和7d(B)時(shí)的HE染色刮宮3d時(shí)，尚未見增生的子宮內(nèi)膜上皮;刮宮7d后，已見子宮內(nèi)膜上皮增生，說明模型制作失敗，子宮并未形成粘連圖3子宮內(nèi)膜刮除前后CK18的表達(dá)情況A．假手術(shù)組子宮組織內(nèi)膜上皮和腺上皮均表達(dá)CK18;B．子宮內(nèi)膜刮除后，只有腺上皮表達(dá)CK18圖4各組子宮組織的Masson染色膠原纖維染成藍(lán)色，腺體、肌層染成紅色A．假手術(shù)組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28dFig．1HEstainingofuteribeforeandafterscrapingBar=100μm(Thesamebelow)A，Theendometriumandendometrialglandswereseenintheuterusofshamoperation;B，Noepitheliallayersofendometriumwereseenwhilesomeendometrialglandsandlayersofmesenchymewereseenintheuterusofendometrialscraping;C，EndometrialglandsandmesenchymeweresignificantlydecreasedintheuterusofendometriumandmesenchymescrapingFig．2HEstainingofuteriafter3days(A)and7days(B)ofoperationintheendometrialscarpinggroupNoepithelialcellsofendometriumwereseenafter3daysofoperationwhileregenerativeendometriumwasseenafter7daysofoperation，suggestingthatnofibrosi

·126·解剖學(xué)報(bào)50卷，1期料染細(xì)胞核(藍(lán)光)，F(xiàn)ITC(綠光)標(biāo)記的二抗染TGF-β1和MMP-9。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TGF-β1和MMP-9均表達(dá)于胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中。假手術(shù)組子宮中低表達(dá)TGF-β1，刮宮后TGF-β1的表達(dá)升高(圖5);假手術(shù)組子宮中高表達(dá)MMP-9，刮宮后MMP-9的表達(dá)下降(圖6)。圖5免疫熒光法檢測(cè)各組子宮TGF-β1表達(dá)標(biāo)尺示100μm(下同)A．假手術(shù)組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28d刮宮后子宮組織的轉(zhuǎn)化生子因子β1表達(dá)明顯高于對(duì)照組圖6免疫熒光法檢測(cè)各組子宮MMP-9表達(dá)A．假手術(shù)組子宮;B．刮宮3d;C．刮宮7d;D．刮宮14d;E．刮宮21d;F．刮宮28d刮宮后子宮組織的基質(zhì)金屬蛋白酶9表達(dá)明顯低于對(duì)照組Fig．5TGF-β1expressioninshamandendometrialandmesenchymalscrapinggroupbyimmunofluorescenceBar=100μm(Thesamebelow)Sham(A)，3(B)，7(C)，14(D)，21(E)and28(F)daysaftersurgerywereshown，respectively;TheexpressionofTGF-β1inscrapeduteriwerehigherthancontrolgroupFig．6MMP-9expressioninshamandendometrialandmesenchymalscrapinggroupbyimmunofluorescenceSham(A)，3(B)，7(C)，14(D)，21(E)and28(F)daysaftersurgerywereshown，respectively;TheexpressionofMMP-9inscrapeduteriwerelowerthancontrolgroup討論由于倫理問題，宮腔粘連患者病理取材困難，制約著宮腔粘連的機(jī)制研究。因此，制備動(dòng)物的宮腔粘連模型對(duì)于推動(dòng)宮腔粘連的研究有重要意義。宮腔粘連動(dòng)物模型制備方法很多，物理性方法(機(jī)械
【參考文獻(xiàn)】

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