發(fā)布時間：2018-02-21 22:24

  本文關鍵詞： 馬立克氏病病毒 GD株 LTR序列　出處：《微生物學報》2014年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】從非免疫健康三黃雞中分離到一株馬立克氏病病毒(MDV),命名為MDV GD06株,本工作系統(tǒng)研究了其生物學特性�！痉椒ā縋CR擴增GD06株Meq基因及短末端重復區(qū)(RS)序列,進行序列分析,并用間接免疫熒光試驗進行血清型特異性鑒定;通過接種SPF雞和雞胚成纖維細胞(CEF)來判定GD06株體內外的增殖能力;為確定GD06株的致病性,用1日齡SPF雞進行攻毒試驗�！窘Y果】GD06株為MDV血清I型病毒,其基因組中自然整合禽網狀內皮增殖癥病毒(REV)的長末端重復序列(LTR),Meq基因富含脯氨酸的結構域比參考強毒株Md5多59個氨基酸,與MD商品化疫苗CVI988/Rispens和814株相符,具有弱毒株的特征。在接種CEF細胞96、120、144、168、192 h,GD06株病毒滴度分別為1.9×105、3.9×105、6.1×105、6.5×105、5.8×105PFU,明顯比CVI988/Rispens(病毒滴度分別為1.3×105、3.5×105、5.0×105、5.7×105、4.7×105PFU)高(P0.05);接種SPF雞21、28天,GD06株在雞體內的病毒滴度分別為740和350 PFU,明顯比CVI988/Rispens株(病毒滴度分別為460、216 PFU)高(P0.05),結果表明,GD06株在CEF細胞和雞體內具有比CVI988/Rispens更快的增殖能力。人工接種攻毒實驗表明,GD06株對SPF雞沒有致病性,不引免疫抑制�！窘Y論】研究結果表明,MDV GD06株為國內首次分離的自然整合有REV LTR序列的重組MDV弱毒株。
[Abstract]:[objective] to isolate a Marek's disease virus (MDV) strain named MDV GD06 strain from non-immune healthy Sanhuang chicken, and to study its biological characteristics systematically. [methods] the Meq gene and short terminal repeats of GD06 strain were amplified by PCR and sequenced. In order to determine the pathogenicity of GD06 strain, the specific serotype was identified by indirect immunofluorescence assay, and the proliferation ability of GD06 strain was determined by inoculation of GD06 chicken and chicken embryo fibroblasts in vitro and in vivo. One day old SPF chicken was used to attack the virus. [results] the GD06 strain was MDV serotype I virus. The long terminal repeats of the naturally integrated avian reticuloendotheliosis virus (Rev) gene contained 59 amino acids more than that of the reference virulent strain Md5, which was consistent with the MD commercial vaccine CVI988/Rispens and 814 strains. The titer of GD06 strain was 1.9 脳 10 53.9 脳 10 55.10 5 脳 10 55.8 脳 10 5 PFU at 96,120,144,168,192 h after inoculation with CEF cells, which was significantly higher than that of CVI 988% Rispensus (virus titer was 1.3 脳 10 555 5 脳 10 55.0 脳 10 55.0 脳 10 55.0 脳 10 55.70 脳 10 55.47 脳 10 5 5 SPF), and the titer of GD06 strain inoculated with SPF chicken was 740 U and 350 U, respectively, compared with that of CVI988/Rispens strain (1. 3 脳 10 55.50 脳 10 55.0 脳 10 55.57 脳 10 55.70 脳 10 557 脳 10 557). The titer of GD06 strain inoculated with SPF chicken was 740 and 350U, respectively (P < 0.05), which was higher than that of CVI988/Rispens strain (P < 0.05). The titer of the virus was 460,216 PFU, respectively. The results showed that GD06 strain could proliferate faster than CVI988/Rispens in CEF cells and chickens, and the inoculation test showed that GD06 strain had no pathogenicity to SPF chickens. [conclusion] the results showed that GD06 strain was the first isolated recombinant MDV attenuated strain with REV LTR sequence.
【作者單位】： 華南農業(yè)大學獸醫(yī)學院;農業(yè)部動物疫病防控生物技術與制品創(chuàng)制重點實驗室;廣東省獸用生物制品生物技術研究與應用企業(yè)重點實驗;
【分類號】：R373

【參考文獻】

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本文編號：1523012