發(fā)布時(shí)間：2024-10-03 00:51

　　本研究將玉米孤雌生殖單倍體胚作為外植體,在二倍體胚的遺傳再生與轉(zhuǎn)化條件的基礎(chǔ)上對部分條件進(jìn)行優(yōu)化,成功摸索出單倍體幼胚培養(yǎng)中的倍性鑒定方法,成功獲得了單倍體再生植株和轉(zhuǎn)基因陽性植株,初步建立了孤雌生殖單倍體幼胚遺傳再生體系和轉(zhuǎn)化體系;與此同時(shí),利用單倍體成熟胚作為受體進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,不經(jīng)成熟胚較為困難的脫分化過程而直接再生為單倍體植株。本研究探索了一套新的轉(zhuǎn)基因方法,為單倍體育種的應(yīng)用提供了一個新的可能和方向。同時(shí),本研究還對轉(zhuǎn)基因過程中單倍體、二倍體與雜合體之間的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異進(jìn)行了比較分析,為單倍體遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立提供了一定的理論支持。具體地,本研究得到如下結(jié)果：(1)本實(shí)驗(yàn)以玉米孤雌生殖誘導(dǎo)系EDI為父本,18-599R為母本雜交誘導(dǎo)單倍體,利用誘導(dǎo)系標(biāo)記基因的特性對幼胚誘導(dǎo)后的愈傷組織進(jìn)行光照條件的篩選,發(fā)現(xiàn)雜合個體的愈傷組織呈現(xiàn)出紫色,而單倍體個體的愈傷組織仍為黃色,且光照方式對篩選單倍體個體的效果不顯著,而光照時(shí)間間的差異達(dá)到了極顯著水平,其中20 h、40 h下可成功分離篩選出單倍體愈傷組織。但由于40 h水平下,愈傷組織出現(xiàn)了變綠,由朝分化方向發(fā)展的趨勢,不利于后期實(shí)驗(yàn)的...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
一、研究背景
    1 玉米單倍體育種的研究進(jìn)展
        1.1 孤雌生殖單倍體產(chǎn)生的遺傳和生物學(xué)機(jī)制
        1.2 植物單倍體加倍機(jī)制
        1.3 玉米單倍體應(yīng)用前景展望
    2 玉米單倍體轉(zhuǎn)基因育種研究前景
        2.1 單倍體轉(zhuǎn)基因受體的選擇
        2.2 單倍體轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)建立的影響因素
        2.3 玉米單倍體轉(zhuǎn)基因育種前景展望
    3 研究的目的意義
二、材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 供試玉米材料
        1.2 培養(yǎng)基及重要試劑配方
        1.3 分子實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        1.4 主要儀器與設(shè)備
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 技術(shù)路線
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
三、結(jié)果與分析
    1 18-599R×EDI單倍體幼胚遺傳再生體系的建立
        1.1 幼胚誘導(dǎo)愈傷組織情況
        1.2 愈傷組織倍性的鑒定
        1.3 分化條件優(yōu)化結(jié)果
        1.4 單倍體植株的統(tǒng)計(jì)、雙單倍體材料的獲得與雜合體種子的加代
        1.5 單倍體幼胚遺傳再生過程中的異�，F(xiàn)象
    2 18-599R×EDI單倍體幼胚遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立
    3 Hi Ⅱ×EDI單倍體成熟胚遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立
    4 不同倍性玉米愈傷組織亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)差異分析
四、討論與結(jié)論
    1 討論
        1.1 單倍體誘導(dǎo)親本材料的選擇
        1.2 單倍體轉(zhuǎn)基因受體材料的選擇
        1.3 單倍體材料鑒定方法的選擇
        1.4 影響單倍體遺傳轉(zhuǎn)化效率的重要階段
        1.5 自然加倍對單倍體遺傳轉(zhuǎn)化的影響
        1.6 單倍體自身細(xì)胞結(jié)構(gòu)的差異對遺傳轉(zhuǎn)化影響
        1.7 單倍體幼胚遺傳轉(zhuǎn)化體系的改進(jìn)
    2 結(jié)論
    3 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號：4006561