急性肝胰腺壞死病(acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND)是一種細菌性疾病,可導致對蝦急性死亡,患病對蝦死亡率高達100%。該病的暴發(fā)對亞洲和美洲多個國家的對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失,被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須通報的水生動物疾病。起初,攜帶pVA1型質(zhì)粒的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)被認為是該病的唯一病原,最近的研究表明某些特定的坎貝氏弧菌(V.cambellii)、哈維氏弧菌(V.harveyi)、歐文氏弧菌(V.owensii)和浦那弧菌(V.punensis)均可引起對蝦患AHPND。對這些致病菌進行測序分析發(fā)現(xiàn)均攜帶pVA1型質(zhì)粒,且該質(zhì)粒攜帶具有接合轉(zhuǎn)移功能的基因簇,因此推測AHPND致病菌多樣性的形成可能與pVA1型質(zhì)粒的水平轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究通過接合轉(zhuǎn)移試驗,將pVPGX1-Cm^r質(zhì)粒(pVA1型質(zhì)粒)從致AHPND副溶血弧菌(Vp2S01-Cm^r)轉(zhuǎn)移到一株非AHPND致病性的坎貝氏弧菌(VcLMB29)中,且在12 h的接合轉(zhuǎn)移...

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【學位級別】：碩士

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圖1接合轉(zhuǎn)移效率

山東農(nóng)業(yè)大學碩士專業(yè)學位論文23圖1接合轉(zhuǎn)移效率Fig.1Conjugativetransferefficiency選取成功接合轉(zhuǎn)移，編號為convl0320106的菌株（命名為VcLMB29-pVPGX1）進行保種并傳代驗證。該菌株在雙抗培養(yǎng)基中可以生長并連續(xù)傳代至P5代，證明....

圖2接合子PCR檢測結(jié)果

山東農(nóng)業(yè)大學碩士專業(yè)學位論文23圖1接合轉(zhuǎn)移效率Fig.1Conjugativetransferefficiency選取成功接合轉(zhuǎn)移，編號為convl0320106的菌株（命名為VcLMB29-pVPGX1）進行保種并傳代驗證。該菌株在雙抗培養(yǎng)基中可以生長并連續(xù)傳代至P5代，證明....

圖3DNA樣品電泳結(jié)果

基于接合轉(zhuǎn)移的致AHPND坎貝氏弧菌形成機制和致病性研究243.3接合子VcLMB29-pVPGX1基因組掃描3.3.1菌株DNA樣品質(zhì)檢結(jié)果對提取純化的DNA樣品進行質(zhì)量檢測，根據(jù)1%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果可得，DNA樣品無蛋白、色素等雜質(zhì)污染，且主帶在20kb以上，見圖3。圖3D....

圖4pVA1型質(zhì)粒序列的比較分析

基于接合轉(zhuǎn)移的致AHPND坎貝氏弧菌形成機制和致病性研究26圖4pVA1型質(zhì)粒序列的比較分析Fig.4ComparativesequencesanalysisofpVA1-typeplasmids用NCBI下載的pVA1型質(zhì)粒的參考序列進行質(zhì)粒序列分析。從內(nèi)到外的軌道分別代表pV....

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