第一部分達(dá)格列凈對(duì)血管緊張素Ⅱ刺激小鼠心臟成纖維細(xì)胞的蛋白質(zhì)組及分泌組學(xué)研究【目的】運(yùn)用蛋白質(zhì)組定量技術(shù),分析達(dá)格列凈(Dapagliflozin,DAPA)干預(yù)對(duì)血管緊張素Ⅱ(Angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)刺激小鼠心臟成纖維細(xì)胞(Cardiac fibroblasts,CFs)蛋白以及分泌蛋白的直接影響,從而探討差異表達(dá)蛋白和分泌蛋白與心室重構(gòu)的關(guān)系,并預(yù)測(cè)其可能的作用機(jī)制。【方法】運(yùn)用同位素標(biāo)記的相對(duì)和絕對(duì)定量(Isobaric tags for relative and absolute quantification,i TRAQ)技術(shù)并基于Proteome Discoverer 2.2搜索結(jié)果進(jìn)行蛋白鑒定;采用GO分類工具對(duì)鑒定出的差異蛋白及分泌蛋白所參與的生物過(guò)程,細(xì)胞組成以及分子功能進(jìn)行分類;應(yīng)用Cluster Profiler對(duì)差異蛋白功能進(jìn)行GO富集分析,通過(guò)顯著性分析確定差異蛋白行使的主要生物學(xué)功能;應(yīng)用String軟件對(duì)蛋白-蛋白相互作用進(jìn)行分析。【結(jié)果】1.CFs對(duì)照組與Ang Ⅱ刺激組的差異表達(dá)蛋白有210種,其中上調(diào)差異蛋白有62種,下調(diào)差異蛋白有14...

【文章頁(yè)數(shù)】：132 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
緒論
第一部分 達(dá)格列凈對(duì)AngⅡ刺激小鼠心臟成纖維細(xì)胞的蛋白質(zhì)組和分泌組學(xué)研究
    1.前言
    2.材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        2.2 主要儀器和設(shè)備
        2.3 實(shí)驗(yàn)耗材和試劑
        2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.質(zhì)譜數(shù)據(jù)分析
    4.結(jié)果
        4.1 心臟成纖維細(xì)胞形態(tài)觀察
        4.2 質(zhì)譜分析結(jié)果
        4.3 小鼠成纖維細(xì)胞差異蛋白及其分泌差異蛋白的表達(dá)譜分析
        4.4 小鼠成纖維細(xì)胞差異蛋白的GO富集分析
        4.5 DAPA干預(yù)后小鼠心臟成纖維細(xì)胞差異蛋白相互作用分析
        4.6 小鼠成纖維細(xì)胞分泌差異蛋白的GO富集分析
        4.7 DAPA干預(yù)后小鼠心臟成纖維細(xì)胞分泌差異蛋白相互作用分析
    5.討論
        5.1 差異表達(dá)蛋白及分泌蛋白的生物學(xué)功能分析
        5.2 DAPA干預(yù)后差異表達(dá)蛋白譜和纖維化
        5.3 DAPA干預(yù)差異表達(dá)蛋白譜和心肌細(xì)胞肥大
        5.4 DAPA干預(yù)后差異表達(dá)蛋白譜與心肌細(xì)胞凋亡
    6.創(chuàng)新點(diǎn)和局限性
    7.結(jié)論
    附錄
第二部分 達(dá)格列凈對(duì)壓力后負(fù)荷誘導(dǎo)小鼠心室重構(gòu)的保護(hù)作用及機(jī)制研究
    1.前言
    2.材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        2.2 主要儀器和設(shè)備
        2.3 實(shí)驗(yàn)耗材和試劑
        2.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.結(jié)果
        4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況
        4.2 DAPA改善壓力后負(fù)荷小鼠心功能
        4.3 DAPA減輕壓力后負(fù)荷小鼠的心室肥厚
        4.4 DAPA改善壓力后負(fù)荷小鼠的心肌間質(zhì)及血管周圍纖維化
        4.5 DAPA對(duì) AngⅡ刺激心臟成纖維細(xì)胞增殖的影響
        4.6 DAPA對(duì) AngⅡ刺激心臟成纖維細(xì)胞膠原表達(dá)的影響
        4.7 DAPA對(duì) AngⅡ刺激心臟成纖維細(xì)胞遷移的影響
        4.8 DAPA改善壓力后負(fù)荷小鼠的心肌細(xì)胞凋亡
        4.9 DAPA對(duì) MAPKs及 FoxO1 信號(hào)通路的調(diào)節(jié)作用
    5.討論
        5.1 壓力后負(fù)荷心室重構(gòu)模型的建立
        5.2 壓力后負(fù)荷誘導(dǎo)心室重構(gòu)的發(fā)病機(jī)制
        5.3 SGLT2 抑制劑在心臟中的作用
        5.4 DAPA與心肌間質(zhì)纖維化
        5.5 DAPA對(duì)心肌細(xì)胞的作用
    6.創(chuàng)新性及局限性
    7.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間撰寫(xiě)的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：4054648